微生物接种·分离·培养技术2018

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➢平板划线法
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灭菌接种环（针）—冷却—挑取标本（细菌）—接 种—灭菌接种环（针）
平板划线法
➢分区划线 ➢连续划线
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分区划线法 第一区划线 灭菌接种环 第二区划线 灭菌接种环 第三区划线 灭菌接种环
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置35℃温箱孵育18~24h，计数菌落形成单位（ colony forming unit，CFU），按下式算出每ml 标本中的细菌数：
1ml标本中的活菌数=全平板CFU×稀释倍数
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➢涂布培养法
本法主要用于活菌计数和药敏试验 活菌计数：取一定稀释度的菌液0.1ml滴在平板 上，用无菌L型玻璃棒将液滴涂布均匀，盖上平板 盖，经35℃培养18~24h后计数菌落，则每毫升所 含活菌数=菌落数×10×稀释倍数 直接涂布法：多用于纸片法和管碟法药敏试验
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第二节 微生物分离纯化技术
➢倾注培养法
此法常用于标本或样品中活菌计数 将标本用无菌生理盐水稀释成不同浓度：10-1 、10-2、10-3、10-4、 10-5等 取不同稀释度的标本各1ml分别注入直径90mm 无菌平皿，迅速加 入溶化并冷却至约50℃的营养
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连续划线法
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➢厌氧培养法
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➢富集培养法
灭菌接种环 第二区划线 灭菌接种环 第三区划线 灭菌接种环
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3.液体接种
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4.倾注接种 12
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2.划线接种
灭菌接种环（针）—冷却—挑取标本（细菌）—接 种—灭菌接种环（针）
平板划线法 ➢分区划线 ➢连续划线
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连续划线法
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分区划线法 第一区划线
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微生物接种﹑分离 培养技术
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第一节 微生物接种技术
接种工具（inoculate ）
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基本条件 3
灭
外 接 种
红
菌 器
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接种方法 1.穿刺接种
5.涂布接种 13
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6.三点接种 7.注射接种 8.活体接种
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➢无菌操作
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无菌技术
细菌检验的操作应在无菌室或生物安全柜内进行 无菌室、生物安全柜使用前后均需进行消毒灭菌 细菌检验使用过的物品使用前后需严格灭菌处理 标本的采集严格无菌操作 无菌试管、烧瓶的使用时注意管口灭菌