绪 论 华南师范大学.ppt

红色（棕红色） 橘黄色
（5）Folin一酚反应
orTyr + Trp
磷钼酸 磷钨酸
蓝色（钼蓝与钨蓝混合物）
（6）紫外吸收：Trp、Tyr、（phe） （7）荧光： Trp、Tyr、（phe）
第三节 蛋白质的结构
蛋白质的一级结构
一、蛋白质的一级结构（primary structure） 定义：指多肽链中氨基酸的排列顺序，即它的化 学结构.
（3）与HNO2的反应
NH 2 R CH COOH + HNO2
OH
R CH COOH + H2O + N2 ↑
4. 与2、4一二硝基氟苯的反应
O2N 4
F
2
NO 2
O2N
F + H2N
H C
在弱碱中
COOH
R NO 2
DNFB
O2N
HH N C COOH
R NO 2
DNP-氨基酸（黄色）
-
肽（peptide）
（一）肽的结构和命名
肽是由两个或两个以上的氨基酸通过肽键连接而形成的化合物。
1
R
2
HR
+ H3N
CH C OH + H
N
CH COO -
O
H2O
R1
H R2
+ H3N
CH C
N
CH COO -
O
Peptide bond
二肽 三肽 四肽
二肽→ +肽称寡肽（oligopeptide）
这种分离主要与各种离子所带电荷有关，在电荷相同时， 与极性，非极性有关。
离子交换树脂：
外观： 化学本质：是一种人工合成的聚苯乙烯一苯二乙烯 组成的具有网状结构的高分子聚合物。
阳离子交换树脂：活性基团是酸性的，如磺酸基-SO3H （强酸型），羧基-COOH（弱酸型）
阴离子交换树脂：活性基团是碱性的，如季胺基N+(CH3)3OH-
一、氨基酸的一般结构特点
通式：
二、氨基酸的分类和结构
构成蛋白质的20种氨基酸可以按他们的 极性和带电荷的性质分类，亦可按它们 侧链基团的结构分类（脂肪族A .A和芳 香族A .A ）。
氨基酸的结构、代号:
中性氨基酸
氨基酸的分类、结构、代号
氨基酸有两种分类方法 (1)按侧链R基的结构
半胱氨酸的-SH很活泼，很容易在空气中重 新氧化形成二硫键，一般可用卤代化物对-SH进 行保护。
（2）苯环的黄色反应
源自文库
Tyr
or
+ 浓HNO3
Trp
黄色
phe+少量浓H2SO4+浓HNO3
黄色
（3）酚基的Millon反应（米伦氏反应）
HgNO3
Tyr+
Hg(NO3)2 HNO3
红色
（4）pauly反应 His + 重氮苯磺酸 Tyr + 重氮苯磺酸
多肽（Polypeptide）
氨基酸之间通过肽键连接形成的链称肽链。
R1 H2N CH
N端
O
R2 O
R3 O
C HN CH C HN CH C
氨基酸残基
氨基酸残基
Rn O HN CH COH
C端
肽链书写方式：N端→C端 肽链有链状、环状和分支状。
命名：根据氨基酸组成，由N端→C端命名
O
O
H3C CH C HN CH2 C HN CH COOH
酸性氨基酸，以Asp为例：
碱性氨基酸，以Lys为例：
七、氨基酸的化学性质
1、茚三酮反应 P9 2、离子交换反应 P11 3、与亚硝酸的反应 P11 4、甲醛反应 P11 5、氨基酸与2，4-二硝基氟苯的反应
Sanger试剂 6、侧链的反应 P12
（1）茚三酮反应
(2)离子交换层析法
原理：分离氨基酸时，用离子交换树脂作为支持物，利用离 子交换树脂上的活性基团与溶液中的离子进行交换反应，由于各 种离子交换能力不同，与树脂结合的牢固程度就不同，在洗脱过 程中，各种离子以不同的速度移动，从而达到分离的目的。
氨基酸的等电点(Isoelectric point)P9
我们可以找到一个适中的PH，这时 氨基酸分子呈兼性状态（等离状态）， 氨基酸的净电荷为零,该PH值就称为等电 点。
等电点的计算
中性氨基酸：以Gly为例
COOH
+
H3N CH2
+ H
COO -
K1
+
H3N CH2
Gly+
Gly +-
+ H
COO-
(2) 按侧链R基的极性
六、氨基酸的一般性质 P8
七、氨基酸的化学性质 P8
直接与Protein 有密切关系的理化性质有
两个：等电点和光学性质。
芳香族侧链（色Trp，酪Try，苯丙Phe侧 链）在280nm附近的紫外区有强烈吸收。正 由于芳香族侧链有强烈的紫外吸收，所以 280nm处吸收的测定，也是定量蛋白质浓度 最常用的方法。
K2
H2N CH2
Gly -
[Gly±] [H+] K1= [Gly+]
[Gly- ] [H+] K2= [Gly±]
pI时，[Gly+ ] = [Gly- ]
[H+]2=K1K2 pH=（pK1+pK2）/2 pI=（pK1+pK2）/2
[Gly±] [H+] K1
=
[Gly±] [H+]
K2
pIGly =（2.34+9.60）/2=5.97
第一章 蛋白质化学 Protein
主要内容： 主要介绍氨基酸和蛋白质的结构、性质、功能以及蛋白 质的结构与功能的关系。还介绍了一些基本技术如氨基 酸的分离、纯化，多肽的人工合成，蛋白质的分离、纯 化、鉴定等。
第一节 通 论 一、蛋白质的化学概念
二、蛋白质的分类
三、蛋白质的元素组成
第二节 蛋白质的组成单位 --氨基酸(amino acid)
肽（peptide） 一个A .A的－羧 基和另一个氨基 酸的－氨基脱水 缩合而成的化合 物叫肽.
蛋白质的一级结构
蛋白质的一级结构
肽键（peptide bond） 氨基酸之间脱水后形成的键叫肽键,又称酰胺 键.
蛋白质的一级结构
稳定一级结构的因素: 肽键. 肽链的方向性
N－端或氨基末端（N-terminal） C－端或羧基末端（C-termianl）
+F
5．侧链R基参加的反应 （1）-S-S-和-SH的氧化还原反应
H2N CH COOH
6HCOOOH
CH 2
S
S
CH 2
2R－SH
H2N CH COOH
2 H2N CH COOH + 6HCOOH CH 2 SO3H
2 H2N CH COOH + R－S－S－R CH2 SH
R-SH：HS-CH2CH2OH 巯基乙醇（mercaptoethanol） HS-CH2COOH 巯基乙酸（mercaptoacetic acid） HS-CH2(CHOH)2-CH2SH二硫苏糖醇（dithiothreitol, DTT）