克罗特伦快速检测实验报告

克罗特伦快速检测实验报告
盐酸克伦特罗 (Clenbuterol,CLB) ,又名瘦肉精,分子式为C12H18Cl2N2O•HCl,药品名为克喘素、氨哮素等,为白色或类白色的结晶粉末,无臭、味苦,易溶于水、甲醇、乙醇,微溶于丙酮、氯仿,不溶于乙醚和苯,化学性质稳定;它是一种人工合成的B-肾上腺素受体激动剂,具有扩张支气管的作用,常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病(Mersmann,1998)。

当其应用剂量达到治疗量的5~10倍时,又具有能量重分配作用,可使肌肉合成增加,脂肪沉积减少,因此将其俗称为瘦肉精,在养猪业中一些非法使用者将其作为一种生长促进剂添加到饲料中(Kuip-er,1998),用以改善胴体的品质,但同时也造
成了猪肉中盐酸克伦特罗的残留。

当人们食用含有盐酸克伦特罗残留的肉品后,常常造成心动过速,低血钾,低磷酸盐血症,肌肉震颤,头晕,口干,失眠甚至于瘫痪等中毒症状,对心脏病患者更有生命危险。

国家农业部农牧发[2002]1号文5关于发布食品动物禁用的兽药及其他化合物清单的通知6中,盐酸克伦特罗被列为所有食品动物禁止使用。

实验步骤
（1）使用前将待测样本溶液恢复至室温
（2）取出检测卡平放，用移液枪吸取待测样品溶液100ul，垂直加于加样孔，开始计时
（3）结果应在3~5min读取，其他时间判读无效，根据示意图判定结果。

阴性(-): 两条紫红色条带出现。

表示样品中盐酸克伦特罗浓度低于3 ng/mL,或不含有。

阳性(+): 检测T线无显色，则表示样品中盐酸克伦特罗浓度高于3 ng/mL。

无效:未出现质控C线，表明操作过程不正确或检测卡已失效。

结果与讨论
若待测样品溶液中不含盐酸克伦特罗,当样品溶液进入测试端,盐酸克伦特罗金标单抗在硝酸纤维素膜上层析泳动,被硝酸纤维素膜上检测印迹处的盐酸克伦特罗-BSA偶联物拦截形成盐酸克伦特罗-BSA偶联物)金标盐酸克伦特罗单抗复合物,并在该印迹处形成红色的条带(检测线);测试端多余的金标盐酸克伦特罗单抗在硝酸纤维素膜上继续层析可被对照印迹羊抗鼠IgG单克隆抗体捕获形
成红色的对照条带(对照线)。

当待测尿样中含有一定量的盐酸克伦特罗时,盐酸克伦特罗与盐酸克伦特罗金标单抗形成复合物,从而与硝酸纤维素膜上的盐酸克伦特罗-BSA偶联物形成竞争,抑制了检测印迹处包被的盐酸克伦特罗-BSA偶联物捕获盐酸克伦特罗金标单抗的量,而不能在检测线形成红色印迹或形成颜色较浅的红色印迹,多余的盒标盐酸克伦特罗单抗继续层析在对照印迹处形成对照线。

根据该反应模式,检测线颜色深浅与样品中盐酸克伦特罗含量呈负相关,即检测线颜色越浅表示样品中盐酸克伦特罗含量越高。

1.样品垫的作用是尽快地将加样孔中的样品吸附到试纸中去，以利于继续加样；
2.结合垫中则是含有胶体金标记的盐酸克伦特罗单抗；
3.硝酸纤维素膜上则预先标记了两种物质，在检测线处标记的是盐酸克伦特罗-BSA偶联物。

4.吸收垫一般由吸水纸构成，主要作用是保持从加样垫到吸收垫之间的毛细管作用力。