大鼠胰腺星状细胞分离培养与鉴定

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Ｎａｉ－ｑｉａｎｇ，ｅｔａ１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅａｎｄＷｅｓｔｅｒｎＭｅｄｉｃｉｎｅｓｆｏｒＡｃｕｔｅＡｂｄｏｍｉｎａｌＤｉｓｅａｓｅｓ，ＴｉａｎｊｉｎＮａｎｋａｉＨｏｓ — ｐｉｔａｌ，Ｔｉａｎｊｉｎ（３００１００），ＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｃｕｌｔｕｒｅｏｆｒａｔｐａｎｃｒｅａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ（ＰＳＣ）．
代后ｄｅｓｍｉｎ基本不表达， — ＳＭＡ阳性表达１００％；传代后第３ｄ－５ｄ的胰腺星状细胞处于快速增殖阶段。结论：酶消化结合
Ｎｙｃｏｄｅｎｚ密度梯度离心法分离培养大鼠胰腺星状细胞纯度高，重复性好，可以满足体外研究的需要。
度梯度离心法分离胰腺星状细胞，通过倒置显微镜观察细胞形态，油红Ｏ染色和免疫细胞化学染色ｄｅｓｍｉｎ，０【一ＳＭＡ进行细胞
鉴定，并绘制传代后细胞生长曲线。结果：原代培养的大鼠胰腺星状细胞呈星形或梭形生长；原代胰腺星状细胞油红Ｏ染色
胞浆均可见红色密集脂滴，直至传代后消失；原代胰腺星状细胞培养４８ｈ后，ｄｅｓｍｉｎ表达开始减弱，１３ｉ．一ＳＭＡ表达开始增强；传
中国中西医结合外科杂志２０１４年１０月第２０卷第５期
大鼠胰腺星状细胞分离培养与鉴定
崔立华，张淑坤，崔乃强，夏亚飞，许大辉
摘要目的：分离培养大鼠胰腺星状细胞，为体外研究胰腺纤维化提供细胞模型。方法：采用酶消化结合Ｎｙｃｏｄｅｎｚ密
ｍｅｒｏｕｓｌｉｐｉｄｄｒｏｐｓｉｎｃｙｔｏｐｌａｓｍｏｆｐｉｍａｒｒｙＰＳＣａｎｄｔｈｅｌｉｐｉｄｄｒｏｐｓｄｉｓａｐｐｅａｒｅｄａｆｔｅｒｐａｓｓａｇｅ．Ａｆｔｅｒ４８ｈｏｕｒｓ，ｔｈｅｐｉｒｍａｒｙＰＳＣｓｗｅｒｅｄｅｖｏｉｄｏｆｄｅｓｍｉｎａｎｄｐｏｓｉｔｉｖｅｆｏｒ一ＳＭＡ．Ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｄｅｓｍｉｎａｎｄ１００％ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｏｔ－ＳＭＡａｆｔｅｒｐａｓｓａｇｅ．ＴｈｅｆａｓｔｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｐｅｉｒｏｄｏｆｐａｓｓａｇｅＰＳＣｗａｓｆｒｏｍｔｈｅｔｈｉｒｄｄａｙｔｏｔｈｅ
ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｌｄｅｎｔｉｉｃｆａｔｉｏｎｏｆＲａｔＰａｎｃｒｅａｔｉｃＳｔｅｌｌａｔｅＣｅｌｌｓＣＵＩＬｉ－ｈｕａ，ＺＨＡＮＧＳｈｕ－ｋｕｎ，ＣＵＩ
关键Leabharlann Baidu词：胰腺星状细胞；细胞培养；胰腺纤维化
中图分类号：Ｑ９５ — ３３；Ｑ９５２．５文献标识码：Ａ文章编号：１００７ — ６９４８（２０１４）０５ — ０５０４ — ０４
ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００７ — ６９４８．２０１４．０５．０１２
ＭｅｔｈｏｄｓＰＳＣｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｂｙｅｎｚｙｍｅｄｉｇｅｓｔｉｖｅｍｅｔｈｏｄｃｏｍｂｉｎｅｄＮｙｃｏｄｅｎｚｄｉｓｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｄｅｎｓｉｔｙｇｒａｄｉ．ｅｎｔｅｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎ．ｒｈｅｃｅｌｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｉｎｖｅｒｓｉｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．ＯｉｌｒｅｄＯｓｔａｉｎｉｎｇａｎｄｉｍｍｕｎｏｓ — ｔａｉｎｉｎｇｏｆｄｅｓｍｉｎａｎｄ — ＳＭＡｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｉｄｅｎｔｉｆｙＰＳＣ．ＴｈｅｇｒｏｗｔｈｃｕｖｅｒｗａｓｄｒａｗｎｔｏｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｉｒｓｔｉｃｓｏｆＰＳＣ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｐｉｒｍａｒｙＰＳＣｓｗｅｒｅｓｔａｒｏｒｓｐｉｎｄｌｅｓｈａｐｅｄｕｉｎｒｇｃｕｌｔｕｒｅ．Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｎｕ —