SDS-PAGE的配胶及银染方法
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SDS-PAGE的配胶及银染方法
电泳工作液：
1、A液：丙烯酰胺储液100 mL
30%（W/V）丙烯酰胺（Acr，30 g）+ 0.8%（W/V）甲叉丙烯酰胺（Bis，0.8 g）
2、B液：4×分离胶缓冲液100 mL
75 mL 2M Tris-HCl（pH8.8）
4 mL 10% SDS
21 mL H2O
3、C液：4×浓缩胶缓冲液50 mL
25 mL 1 M Tris-HCl（pH6.8）
2 mL 10% SDS
23 mL H2O
4、10% APS
银染染色试剂及步骤
步骤试剂时间备注
固定液50%乙醇+12%醋酸+0.1%甲醛+38%H2O 20 min
漂洗液50%乙醇 3 min
引发液0.02%Na2S2O3 1 min
清洗H2O 3次/min
染色0.5%AgNO3+0.075%甲醛2~5 min
清洗H2O 3次/min
显色 2.5%Na2CO3+0.05%甲醛至显色
终止1%乙酸
注：染色液的配制方法，40 mL ddH2O中加1 mL20%的AgNO3，再加75 μL30%～40%的甲醛。