脑钠肽前体及氨基末端脑钠肽前体基因的克隆与表达

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９５４一
ＣｈｎＪＬａａｎ，ｕｅ，０１Ｖｏ６，．ｉｂＤｉｇＪｎ２２，ｌ１Ｎｏ６
Ｅ］志勇，ｏｉｓＨｕｆｅ，从风等．器人辅助股骨干骨折复位７阮Ｔｂａｅｎｒ罗机
ｐｔｒａｓｔｄｏｔｏａｄｃｓｒｅｙｓｓｅＪ．ｎＪＭｅｂｔｕｅｓｉｅｒｈｐｅｉｕｇｒｙｔｍ［］ＩｔｄＲｏｏｓ
以可溶性形式表达，有利于保存其生物学活性。结论更
盒的开发奠定基础。
两种蛋白的成功表达将有利于后续的单抗制备及检测试剂
关键词：钠肽前体蛋白（ｒＢｒｔｉ）氨基末端脑钠肽前体蛋白（ＴｐｏＮｒｔｉ）脑ｐｏＮＰｐｏｅ；ｎＮｒＢＰｐｏｅｎ
ＡｂｔａｔＯｂｅｔｖＢｒｉａｒｕｅｉｐｐｉｅｐｅｕｓｒａｄＮ—ｅｍｉａａｎｎｔｉｒｔｅｔｅｐｅｕｓｒｐｏｅｎｓｒｃ：ｊｃｉｅａｎｎｔｉｒｔｅｔｒｃｒｏｎｔｒｎｌｉａｒｕｅｉｐｐｉｒｃｒｏｒｔｉｓｃｄＢｒｃｄ
ｆｒｔｏｒｃｉｎ［］ＩｔｄＲｏｏｉｏｕｓｔＳｒ，ｏｍｉｃｒｅｔｙｏＪ．ｎＭｅｂｔｓＣｍｐｔＡｓｉｕｇＪｃｓ
２０１１６．０４，（）：４
［２ＧｏｌｇＴ，ｅｔｈｌＨｕｎｒｅ１Ｒｏｏｓｉｅｒｃｕｅ１］ｓｉＷｓｐａＲ，ｆｅｔ．ｂｔｓｔｄｆｔｒｎＴ，ａａｓａｒｄｃｉｎａｐｅｉｎｒｔｄｈｅｒｓａｔＪ．ｄＢｏｅｕｔ：ｒｌａｙｓｕｙｉｔｅｆｍｕｈｆ［］Ｍｅｉ一ｏｍｉｎ
（稿日期：０２４３）收２１ —００
［ＯＰｉａｇＬｉＨｕＨａｌｎｕｔａ．ｖｌＤｈｘｐｄｃｒ一１］ｅｕＴｎ，ｅｆ，ｉｇＤｅ１Ｎｏｅ３ｅａｏｏｏｎ
文章编号：０７２７２１）６９４４１０ —４８（０２０ —０５ —０
ｉｓＣｏｃｍｐｔＡｓｉｔＳｒ２１８１１．ｕｓｓｕｇ，０２，（）：７
［２中国组织工程研究与临床康复，００１（３：２２Ｊ．２１，４１）２９．Ｅ９ｅｄＦｓｈｎｂｕｒＭ，ｎｌ８ｉｅＫ，ａｃｉｇａｅＷｅｚＭＥ，ｔ１ＡｅａｏｏｏｘＳｅａ．ｈｘｐｄｒｂｔ－ｅ
脑钠肽前体及氨基末端脑钠肽前体基因的克隆与表达
何涛君，正林，小强，吴钟王琼，来智，学东杨陆
（东医学院附属深圳市福田人民医院检验医学部，东深圳５８３）广广１０３
摘要：目的
＊通讯作者
衰发展趋势提前了解，以尽早开始抗心衰的治疗，延迟终末期心衰的到来，医学界非常关注的问是
１ｇｍｐｔ２０５；（）１１．ＥｎＣｏｕ０４３１：５
［］ｈｏＳｅＨｕｇＭｉｇＹｈＬｅＦｎｔｎｌｓｅｓｎｆａｓｒ９Ｓｕ — ｕｉｎ，ｎ — ｉｅ．ｕｃｉａａｓｓｍｅｔｏｕｏ
ｎｐｌｔｒｏｅｒｈｆｆｃｕｅｒｄｃｉｎ［］ＩｔＪＭｅｉｕａｏｒｍｕａｔｒｔｒｅｕｔｆｆｓａｏＪ．ｎｄＲｏ
ｂｉｓＣｏｐｔＡｓｉｔＳｕｇ，０６，（）２．ｏｔｍｕｓｓｒ２０２３：３８ｃ
ｗｅｅｅｘｅｓｄｉｃｌ．ｅｈｓＲｅｏｍｂｉａａｍｉｒｐｒｓｅｎＥ．ｏｉＭｔｏｄｃｎｎｔｐｌｓｄＰＧＥＸ一０＂２Ｉｏ＂ｐｒＢＮＰａｎｄＰＧＥＸ一０Ｔ— ＴｏＢＮＰｗｅｅｏｎ２Ｎｐｒｒｃｓｒｔｅｏｅｕａｉｏｇｃｌｍｅｈｏｔｕｔｄｂｙｍｌｃｌｒｂｏｌｉａｔｄｓ，ｈｃｒｄｅｔｆｅｗｉｈｗｅｅｉｎｉｉｄｂｙＰＣＲ，ｅｔｉｔｏｎｙｍｅｄｉｓｉｎａｅｕｅｃｎａｒｓｒｃｉｎｅｚｇｅｔｏｎｄｓｑｎｅａｌｙｉ．ｈｅｗｏｅｏｂｉｎｐａｍｉｓ，ｄｎｔｆｅｂｓｑｅｉｓｓＴｏｓｔｒｃｍｎａｔｌｓｄｉｅｉｉｄｙｅｕｎｃｎｇ，ｗｅｅｒｎｓｏｒｅｉｏｒｔａｆｍｄｎｔＥ．ｃｉｎｄｘｅｓｄｏｌＢＩ２１ａｅｐｒｓｅｐｏｒＢＮＰｎａｄＮＴ— ｏｐｒＢＮＰｏｅｎ．ｈｅｔｏｒｃｂｎｎｔｐｒｔｉｓｗｈｃｅｅｉｎｔｆｅｅｔｒ — ｏｔｔｓ．ｓｌｓｐｒｔｉｓＴｏｓｗｅｏｍｉａｏｅｎｉｈｗｒｄｅｉｉｄｂｙＷｓｅｎｂｌｅｔＲｅｕｔＢｒｉｔｉｅｉｐｉｅｕｒｏｎｄＮ— ｅｍｗｅｅｅａｎｎａｒｕｒｔｃｐｅｔｄｅｐｒｃｓｒａ ‘ ｒｎａａｎｎａｒｕｅｉｐｉｅｒｃｓｏｔｉｒｘｐｒｓｅＵ — ｔｅｓｄＳＣ— ｃｓｆｌｙｉｅｓｕｌｎＥ．ｅｌ．ｔｒｔｉｓｗｈｃｅｅｅｏｉＢｏｈｐｏｅｎｉｈｗｒｘｐｒｓｅｎｄｉｓｕｂｉｉｙｐｔｅｎｃｄｕｃｄｔｏｎｅｖｏｌｇｉｃｉｔｅｓｄｉｓｏｌｌｔａｔｒｏｎｅｏｃｓｒｅｂｉｏｃａｔｖｉｙ．ＣｏｌｓｏＴｈｏｅｔｅｏｂｉｎｏｔｉｎｃｕｉｎｓｗｏｒｃｍｎａｔｐｒｅｎｓｗｈｉｈｗｅｅｅｒｓｅｕｃｓｆｌｏｎｃｒｘｐｅｓｄｓｃｅｓｕｌｙｃｄｕｃｄｔｅｒｔｏｎｏＡｂａｄｅｏｐｒｐａａｉｎｍｎｆｕｎｄｔｏｏｒｄｅｅｔｏｉｓｄｖｌｐｍｅｔｉｘｔｐ．ｏａｉｎｆｔｃｉｎｋｔｅｅｏｎｎｎｅｔｓｅＫｅｒ：ａｎｎｔｉｅｉｐｐｔｄｅｒｕｒｏｐｏｅｎ（ｐｏｙｗｏｄｓＢｒｉａｒｕｒｔｃｅｉｐｅｃｓｒｒｔｉｒＢＮＰｏｔｉｐｒｅｎ），Ｎ—ｅｒｉｌｆｂｒｉｔｉｒｉｐｉｔｍｎａｏａｎｎａｒｕｅｔｃｐｅｔｄｅ
在大肠杆菌中表达脑钠肽前体（ｒＢＰ及氨基末端前体蛋白（ —ｒＢ）ｐｏＮ）ＮＴｐｏＮＰ。方法
采用分子生物
学技术构建重组质粒ＰＥ一０ — ｒＢＧＸ２ＴｐｏＮＰ和ＰＥ一０ — ｐｏＮＰ分别对其进行ＰＲ、酶切和测序鉴定，后ＧＸ２ＴＮＴｒＢ，Ｃ双然
ｇｃｌｏｏｏｅｕｔｎｏｏｒｌｒｃｕｅＪ．ｎｄｉｂｔｆｒｒｄｃｉｆｌｗｅｍｂｆａｔｒｓ［］ＩｔＪＭｅａｒｏｉ
ＲｏｏｉｓＣｏｂｔｃｍｐｔＡｓｉｔＳｕｇ２１６：１．ｕｓｓｒ００，４３
ｔｒａｉａｏｏｃｍｐｔｒａｓｓｅｆａｔｒｒｄｕｔｏａｄｄｅｎｌｆｘｔｒｆｒｏｕｅｓｉｔｄｒｃｕｅｅｃｉｎｎｅ
［１ＷｅｔｈｌＷｉｋｌａｈＳＧｏｌｇＴ，ｔ１Ａｓｒｉｌｅｅ — １］ｓｐａＲ，ｎｅｂｅ，ｓｉｅ．ｕｇｃｌｍａｎａａｔ
最终结果。如何在心功能衰竭早期，至还没有出甚
现心功能不全的临床表现时就能将心脏病患者的心
基金项目：圳市福田区科技计划项目（ＴＷＳ０９４）深圳市福深Ｆ２００２，田区科技计划项目（ＴＷＳ０１３Ｆ２１３）
中图分类号：８；７６Ｑ７５Ｑ８文献标识码：Ａ
ＨＥ
ＢｒｎｎｔｉｅｉｅｉｅｐｒｃｒｏｒａｔｒｉｌＢｒｉｔｉｒｔｃｐｅｉｅｕｓｅｅｌｎｉｎｘｅｓｏａｉａｒｕｒｔｃｐｐｔｄｅｕｓｎｄＮ— ｅｍｎａａｎｎａｒｕｅｉｐｔｄｅｐｒｃｒｏｒｇｎｓｃｏｎｇａｄｅｐｒｓｉｎ
ｐｅｕｓｒｐｏｅｎ（ｒｃｒｏｒｔｉＮＴ— ｒＢｐｏＮＰｐｏｅｎｒｔｉ）
（ｈｎＪＬｂＤｉｇｎ，０２１０５Ｃｉａａ２１，６：９４）
心功能衰竭是绝大多数心脏病患者病情发展的
Ｔａ－ｕＷＬＺｅｇｌｎ，ｏｊｎ，，ｈｎ —ｉＺＨＯＮＧＸｉｏｑａｇ，ｔ１（ｈｆｌａｅｈｎｈｎＦｕｉｎＨｏｐｔｌｏｈｄｉａｏａ — ｉｎｅ．ＴｅＡｆｉｉｔｄＳｅｚｅｔｓｉｙｔｅＭｅｃｌＣｌａａａｌｇｙＧｕｎｄｎｅｅｏａｇｏｇ，Ｓｅｚｅ１０３Ｃｉａｈｎｈｎ５８３，ｈｎ）
将已测序鉴定的包含两种重组质粒的工程菌，转化至大肠杆菌Ｂｌ菌中表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白，用Ｉ２并
Ｗｅｔｒ —ｌｔ定纯化的重组蛋白。结果ｓｅｎｂｏ鉴在大肠杆菌中成功的表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白，种蛋白均两