实验一粪便隐血试验

实验一 粪便隐血试验
一、目的要求
1、掌握邻甲苯胺法隐血试验操作方法及结果 判断。 2、熟悉邻甲苯胺法隐血试验的原理
二、试剂及器材
粪便标本、竹签、载玻片、10g/L邻甲苯 胺冰醋酸溶液、3%过氧化氢。
三、试验原理
血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化 物酶的活性，能借助受体（邻甲苯胺）催化 过氧化氢，放出新生态氧，将受体肠氧化成 邻甲偶氮苯而显蓝色。
四、实验步骤
1、用竹签将粪便标本涂于载玻片上。 2、滴加10g/L邻甲苯胺冰醋酸溶液及3%过氧化 氢溶液2-3滴。 3、立即观察结果，在2分钟内显蓝褐色为阳性， 根据颜色的深浅和出现的时间判断结果。
五、结果判断
结果判 断
判断标准
-
加入试剂2分钟后仍不显色
+
加入试剂10秒后初显浅蓝色，渐变蓝色
+ + 加入试剂初显蓝褐色且逐渐加深
血红蛋白被分解
大剂量服用VitC
试剂过期
七、质量控制
①试验器具洁净、不得含有铁离子，更不能沾污血迹或 脓液，否则导致假阳性。 ②H2O2不稳定，每次试验前必须鉴定。 ③试验前3d应禁食影响试验的食品和药物， ④严格遵守操作规程，控制反应时间，统一结果判断标 准。 ⑤每天制备阳性和阴性质控标本，进行对照。
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+ + + 加入试剂后立即呈蓝褐色
+ + + + 加入试剂后立即呈蓝黑褐色
六、方法学评价
灵敏度： 邻甲苯胺法最灵敏，可检出0.2～1.0mg/L的血 红蛋白。
特异性和准确性：受食物、药物、试剂等多种因 素影响，容易出现假阳性或假阴性。
假阳性
外源性动物食品
生食蔬菜（萝卜、甘蓝）
药物（铁剂、铋剂）
假阴性