核酸的序列测定
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Hale Waihona Puke Baidu
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试管，每一试管按精确比例各加入一种 ddNTP，用同位素或
荧光物质标记。 3．利用 ddNTP 可特异地终止 DNA 链延长的特点，4 个 试管的聚合反应可以得到一系列大小不等、被标记的片段。 4．将 4 个反应管同时加到聚丙烯凝胶上电泳，标记片 段按大小分离，放射自显影后可按谱型读出 DNA 序列。 在以上两种方法的基础上，通过与计算机技术和荧光技 术的结合， 发明了自动测序仪。 目前， 常用的测序策略是“鸟 枪法”，形象地说是将较长的基因片段打断，构建一系列的 随机亚克隆，然后测定每个亚克隆的序列，用计算机分析以 发现重叠区域，最终对大片段的 DNA 定序。
核酸的序列测定
DNA 序列是指携带遗传信息的 DNA 分子中的 A、 C、 G、 T 的序列。分析方法主要有两种，一种是 Maxam-Gilbert 化 学法，另一种是 Sanger 的双脱氧法。现在一般都采用后者， 其基本原理是： 1．用凝胶电泳分离待测的 DNA 片段（用作模板）。 2．将模板、引物、4 种 dNTP、合适的聚合酶置于 4 个
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试管，每一试管按精确比例各加入一种 ddNTP，用同位素或
荧光物质标记。 3．利用 ddNTP 可特异地终止 DNA 链延长的特点，4 个 试管的聚合反应可以得到一系列大小不等、被标记的片段。 4．将 4 个反应管同时加到聚丙烯凝胶上电泳，标记片 段按大小分离，放射自显影后可按谱型读出 DNA 序列。 在以上两种方法的基础上，通过与计算机技术和荧光技 术的结合， 发明了自动测序仪。 目前， 常用的测序策略是“鸟 枪法”，形象地说是将较长的基因片段打断，构建一系列的 随机亚克隆，然后测定每个亚克隆的序列，用计算机分析以 发现重叠区域，最终对大片段的 DNA 定序。
核酸的序列测定
DNA 序列是指携带遗传信息的 DNA 分子中的 A、 C、 G、 T 的序列。分析方法主要有两种，一种是 Maxam-Gilbert 化 学法，另一种是 Sanger 的双脱氧法。现在一般都采用后者， 其基本原理是： 1．用凝胶电泳分离待测的 DNA 片段（用作模板）。 2．将模板、引物、4 种 dNTP、合适的聚合酶置于 4 个