第三章核酸的结构与功能
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
2. 亲水的dR和磷酸 基骨架在外侧,疏水
的碱基在内侧;遵循 碱基互补规律
• 2条链的碱基之间以氢键结 合。A与T以2个氢键配对, G与C以3个氢键配对。
这种配对关系称为碱基 互补,每个DNA分子中的 2条链为互补链。
3.螺旋直径2nm,螺旋 旋转一周包含10对碱 基,螺距3.4nm
4. 疏水力和氢键维系 DNA双螺旋结构的稳定
功
能 决定细胞和个体 的复制和表达
的遗传型
第一节 核酸的化学组成
• 核酸的主要组成元素: C, H, O, N, P(9-10%)
核酸的基本组成单位是核苷酸
核酸
核苷酸
核苷 磷酸
碱基 戊糖
DNA的基本组成单位是脱氧核糖核苷酸 。 RNA的基本组成单位是核糖核苷酸 。
一、碱 基
碱基
嘌呤 嘧啶
腺嘌呤(A)
5 4 3N 612
NH
NH2
N
O
NH
NH
O
尿嘧啶(uracil, U)
O
H 3C NH
NH
O
胞嘧啶(cytosine, C)
NH
O
胸腺嘧啶(thymine, T)
二、戊 糖
HO CH2
OH HO CH2
OH
5´ O
O
4´
1´
3´ 2´
OH OH
核糖(ribose) (构成RNA)
OH
脱氧核糖(deoxyribose) (构成DNA)
DNA
mRNA
蛋白
转录
翻译
细胞核
外显子
内含子
DNA
转录
hnRNA
转录后剪接 转运
mRNA 蛋白
翻译
二、tRNA
tRNA的特点
1.含 10~20% 稀有碱基,如 DHU、 TC。
O
N
NH
NH N
C H3 N
稀 有
C H3
N,N二甲基鸟嘌呤
HN CH2
CH
C CH3 CH3
碱 基
N
N
NH N
N6-异戊烯腺嘌呤
横向:氢键 纵向:疏水堆积力 (碱基堆积力)
碱基平面与纵轴垂直,糖环平面与纵轴平行
5.Watson和Crick当 年提出的是理想化 的DNA双螺旋模型, 后来发现其各项参 数均与实际的DNA 双螺旋结构有一定 差异。
不同类型DNA的结构参数
A型-DNA B型-DNA
螺旋旋向
右手螺旋
右手螺旋
螺旋直径
信使RNA
转运RNA 不均一核
RNA
简写
功能
rRNA 组成核蛋白体
mRNA Pr合成模板 tRNA 转运aa
hnRNA 成熟mRNA前体
一、mRNA
mRNA结构特点:
1.大多数真核mRNA的5´末端都以7-甲基鸟苷三 磷酸为起始结构,称为帽子结构:m7GpppN。
2.大多数真核mRNA的3´末端有一个多聚腺苷酸 结构,称为多聚腺苷酸尾或多聚A尾(polyA) 。
五、核酶
具有催化功能的核酸称为核酶。
核酶的锤头状结构
核酶研究的意义
底物部分
核酶的发现,对中心法则作了重要补充;是对 传统酶学的挑战;利用核酶的结构设计合成人
工核酶 。
第四节 核酸的理化性质
一、一般理化性质
• 为两性电解质,含有酸性的磷酸基和碱 性的碱基,显酸性;碱性条件下不稳定
• 分子为线性的大分子
四、核苷酸
定义:核苷(脱氧核苷)中戊糖的
-OH与磷酸通过磷酯键相连接构成 核苷酸(脱氧核苷酸)。
NH 2
酯键 N
N
O HO P O
O-
核苷酸: AMP, GMP, UMP, CMP
脱氧核苷酸:
9
5'
N
N
CH 2 O
HH
1'
H 2'
H
OH
OH
腺苷酸
dAMP, dGMP, dTMP, dCMP
糖苷键
鸟嘌呤(G) DNA、RNA均有
胞嘧啶(C) 胸腺嘧啶(T) 尿嘧啶(U)
DNA有 RNA有
每种核酸都含有四种碱基 。
碱基
嘌呤(purine)
N 7
5 6 1N
8 9 NH
43 2 N
NH2 N
N
NH
N
腺嘌呤(adenine, A)
O
N NH
NH
N
鸟嘌呤(guanine,
NH2
G)
嘧啶(pyrimidine)
N O H2C O P O P O P CH2
鸟嘌呤
O-
O-
O-
O
OH OH
7-甲基鸟苷三磷酸 帽子结构
O
O PO
O 多聚A尾结构
AAA-OH 3/
3.mRNA的功能 :
➢构成遗传密码,传递DNA所携带的遗传信
息。
➢用连续三个核苷酸作为密码子以决定其合
成蛋白质的氨基酸排列顺序。
原核细胞
真核细胞
细胞质
帽子结构和多聚A尾的功能:mRNA核内向胞 质的转位;mRNA的稳定性维系;翻译起始的 调控 。
m7Gpppp
AUGGUG······GCGAGGTGTATTGA······UAA AAAA ······An
5/帽子结构 5/非编码区
编码区
3/非编码区 3/多聚A尾
O HN
H2N
N
CH3 +
O
O
O
• 基因组(genome): 细胞中全部基因序列的 总称
第三节 RNA的结构与功能
• RNA的一级结构是指RNA分子中核苷酸 从5‘-末端到3’-末端的排列顺序。
• RNA通常以一条单链形式存在,经卷曲 盘绕可形成局部双螺旋结构和三级结构。
• RNA分子比DNA分子小得多
RNA
核蛋白体 RNA
多磷酸核苷酸: NMP,NDP,NTP
NH 2
N
N
O
O
O
9
N
N
- O P γ O P β O P α O CH 2 O
O-
O-
O-
HH
1'
H 2'
H
OH
OH
一 磷 酸 腺 苷 ( AM P)
二 磷 酸 腺 苷 ( ADP)
三 磷 酸 腺 苷 ( ATP)
环化核苷酸: cAMP,cGMP
NH 2
氨基酸臂
G
G
C CCCCC
U
C
A
C
GGGGG CDm
TΨ
C
A
GA C 可变环
U
TΨ环
AU
G Cψ
A
A
C
A
U G
U
A A
反密码环
反密码子
3.tRNA的三级结构为 倒L形 X线衍射结构证明, tRNA的共同三级结构为 倒L形。
4. tRNA的功能 在蛋白质合成过
程中作为各种氨基酸 的载体
• 三级结 构呈倒
二、紫外吸收
由于嘌呤和嘧啶中含有共轭双键,核酸在260nm 处有最大吸收峰。
14000
分 12000
子 10000
消 光
8000
系 6000
数 4000
2000
240 250 260 270 280
波长(nm)
碱基的紫外光谱
AMP GMP UMP CMP
dTMP
三、DNA的变性与复性
(一)变性
定义 在某些理化因素作用下,DNA双链解开成 两条单链的过程。
L形
三、rRNA
rRNA占总RNA的80% 以上。
rRNA 参 与 组 成 核 糖 体的大、小亚基,作 为蛋白质生物合成的 场所。
四、核内小RNA
snRNA
除了上述三种RNA外,细胞的不同部位 存在的许多其他种类的小分子RNA,统称为 核内小RNA ,简称小核RNA(small nonmessenger RNAs, snmRNAs),参与 hnRNA的剪接、转运。
• DNA的碱基序列无组织器 官差异性,但有个体、种 属差异性,也不受年龄、 营养和变化的影响。
二、 DNA的二级结构
——双螺旋结构
(一)DNA双螺旋结构的研究背景
碱基组成分析 Chargaff 规则:[A] = [T]
[G] = [C] 不同生物种属的DNA碱基组成不同
同一个体不同器官、不同组织的DNA具有 相同的碱基组成
5' pApCpTpGpCpTpApApC-OH 3' 5' ACTGCTAAC 3'
DNA 与RNA的区别
核酸
碱基
戊糖
DNA A、G、C、T 脱氧核糖
RNA A、G、C、U 核糖
第二节 DNA的结构与功能
一、DNA的一级结构
• DNA的一级结构是指DNA分子 中脱氧核苷酸从5‘-末端到3’末端的排列顺序,实质为DNA 分子中碱基的排列顺序。
三、核苷
定义:
核苷是碱基与戊糖以糖苷键 相连接所形成的化合物。
NH2
N
1
C H 2O H O
N
O
HH
H 2'
1' H
糖苷键
OH H 胞嘧啶脱氧核苷
NH2
N
N
9
N
N
C H 2O H
O
HH
1'
H 2'
H
OH OH 腺嘌呤核苷
糖苷键
方式:
戊糖的第1位C原子分别与嘌呤 碱的第9位N原子、嘧啶碱的第1位 N原子相连接。
O
H
H
NH
H H NH O
双氢尿嘧啶
S
NH
NH O
4-巯尿嘧啶
OH
A
2.可形成局部的双螺旋,
Biblioteka Baidu
C C
使得tRNA的二级结构
C
形似三叶草
U C
U
C
•反密码环,带有反密 码子可破译遗传密码。
G
DD Gm
G A
A
U A
G
CCG
•氨基酸臂,直接结合
D DD
AA
GGC G
被活化的氨基酸。
DUH环
C A
A
G
A G
因素 强酸,强碱,高温,高压,变性试剂如 尿素以及某些有机溶剂如乙醇等。
在实验室最常用的DNA变性方法之一 是加热。
Tm:双链DNA解开 50%时的环境温度称为DNA的 解链温度。其大小与G+C含量成正比。
解链曲线:在连续加 热DNA的过程中以温度为 横坐标,以吸光度A260为 纵坐标作图,所得的曲线 称为解链曲线。
第三章 核酸的结构与功能
核酸(NA)分为两类:
• 脱氧核糖核酸(DNA):存在于细胞核 和线粒体(遗传信息的载体)
• 核糖核酸(RNA):存在于细胞核和细 胞质(参与细胞遗传信息的表达)
DNA 组成单位 dNMP 分 细胞核 98%
RNA NMP 10%
布 细胞浆 2%(线粒体)
90%
携带遗传信息, 参与遗传信息
OD260
0.70 0.65 0.60 0.55 0.50
76 80
84 88 92
Tm
96 100 ℃
(二)复性与杂交
DNA复性 (1)当变性因素去除后,变性DNA的两条互补链 可恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。
(2)热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,这 一过程称为退火。
在DNA复性过程中,将不同种类的DNA单 链分子或RNA分子置同一溶液中,就可以形成 杂化双链。
超螺旋结构(superhelix 或supercoil) DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。
正超螺旋(positive supercoil) 盘绕方向与DNA双螺旋方同相同
负超螺旋(negative supercoil) 盘绕方向与DNA双螺旋方向相反
四、DNA的功能
携带遗传信息
• 基因(gene): DNA分子中经过复制可遗传 给子代,经过转录、翻译可以指导各种蛋 白质有序合成的功能性片段
• 1953年,Watson和Crick提 出了著名的DNA右手双螺旋模 型,分享了1962年的诺贝尔生 理学和医学奖
(二)DNA双螺旋结构模型要点
1. 由两条相互平行但走向相 反的脱氧多核苷酸链围绕同 一中心轴,以右手螺旋方式 形成的双螺旋结构。
2条链反向平行,一条是 5’→3’,另一条是3’→5’
N
N
N
N
O CH 2 O
HH
HH
HO P
O
OH
O
cAMP
NH2 N
糖苷键
HO CH2 O N O
Pi
NH2
OH OH
N O
HO P O CH2 O N O OH
磷酸酯键 OH OH
五、核酸中核苷酸的
连接方式
• 形成3’,5’-磷酸二酯键:通过前 一个核苷酸(脱氧核苷酸)的 3’-OH与后一个分子的5’-磷酸 缩合而生成。
杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形 成 , 也 可 在 DNA 和 RNA 分 子 间 或 者 RNA 与 RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。
Eg: DNA-DNA DNA-RNA RNA-RNA
2.55nm
2.37nm
每一螺旋的碱基对数目
11
10.4
螺距
2.53nm
3.54nm
相邻碱基对之间的垂直间距
0.23nm
0.34nm
Z型-DNA 左手螺旋 1.84nm
12 4.56nm 0.38nm
(三)DNA双螺旋结构的多样性
A型DNA
B型DNA
Z型DNA
三、DNA的三级结构
DNA的超螺旋结构
核苷酸的连接
核苷酸之间以 5´端 3’,5’-磷酸二酯键 连接形成多核苷酸 链,即核酸。
3’,5’-磷酸二 酯键
OH
NH2
HO P O
O
N
C
H3C O N
O
OH HO P O N
O
H3C O N
NH2
N
N
A
3´端
OH
书写方法
A CT GCT AAC 5' P P P P P P P P P OH 3'