生物材料检验 实验一 尿肌酐和尿比重的测定

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2.尿样如浑浊,应离心后,取上清液测定。 3.尿比重计每次使用都要用纯水调零。
4.尿样比重范围1.010~1.035,超出范围认为尿样不合格,
应弃去重新采样。

(二)尿比重的测定--光折射法
尿比重作为估计肾浓缩稀释功能的指标,与尿中水分、 盐类及有机物的含量有关。常被用来校正尿液的浓度变 化。我国推荐尿比重校正参照值为1.020. 实验原理 掌握尿比重的测定原理和过程;熟悉尿比重折射仪的 使用。了解尿比重测定的注意事项。 实验原理 利用溶液中总固体量与溶液对光的折射率之间存在的 相关性,以纯水做参考,测定尿液比重。
仪器与试剂
尿比重计 胶头滴管 尿杯 纯水 实验步骤 1.样品采集和保存 2.尿样的测定 尿比重折射仪的调零:用纯水洗净棱镜表面并用软纸 吸干。用胶头滴管滴2~3滴纯水在棱镜表面,按调零按 钮调零。 尿样测定:洗净棱镜并吸干,滴2~3滴尿样。 测定数值即为尿样的比重值。
Leabharlann Baidu 注意事项
1.尿液不可冷冻。会导致沉淀。
实验一 尿肌酐和尿比重的测定
(一)尿肌酐的测定-分光光度法 肌酐又称肌酸酐,是肌酸和磷酸肌酸的代谢终产物, 主要有肌肉中磷酸肌酸的非酶促反应生成,通过尿液排 除体外,正常人每日尿中排出的肌酐量是恒定的,浓度 随尿量的多少而变化,用来校正尿液浓度值。正常范围 是0.4~1.3g/L。
实验目的
掌握碱性苦味酸法测定尿肌酐的原理;熟悉实验操作 步骤和分光光度计的使用;了解尿肌酐的测定方法的注 意事项。 实验原理 肌酐与过量苦味酸在碱性条件下反应生成橙红色苦味 酸肌酐后,在波长490nm处比色定量。
管号 标准溶液/ml 水 /ml 肌酐浓度/(g/L) 0 0 3.0 0 1 0.20 2.8 0.20 2 0.40 2.6 0.40 3 0.60 2.4 0.60 4 0.80 2.2 0.80 5 1.0 2.0 1.0
向各管中加入2.0ml碱性苦味酸溶液,混匀,于室温 下反应20~30分钟。加5ml水混匀后,以零管做参比, 波长490nm下测吸光值,在0.5小时内比色完毕。每个 浓度测定3次,求平均吸光值。 测定:求标准曲线。 ρ(肌酐)=ρ1×f ρ(肌酐)--尿中肌酐的浓度。 ρ1--标准曲线上计算的肌酐浓度。 f--尿样稀释倍数,30. 注意事项:1.注意非特异的色素原干扰。 2.温度在15~20℃显色稳定,反应温度控制在30℃.
实验仪器与试剂
1.仪器 分光光度计,比色杯 2.试剂 饱和苦味酸溶液(15g/L) 氢氧化钠溶液(100g/L) 碱性饱和苦味酸溶液 盐酸 肌酐标准溶液
实验步骤
1.样品的采集和保存 按所接触毒物或其代谢产物所规 定的采样时间,用50ml聚乙烯塑料瓶收集尿样,冷藏运 输,于4摄氏度下可保存2周。 2.标准曲线绘制及样品的测定 样品处理:取0.1ml尿样至于10ml比色管中,加水至 3ml 试剂空白:取3ml水置于10ml比色管中。 标准曲线的绘制:取6支10ml比色管,按下表配置标 准溶液
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