石蜡切片法
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（2）固定液的选择
根据所用材料的不同，选择不同的固定液。一般，各种器官，不论是根、茎、叶，还是花和果实，其组织切片均用FAA固定液，而根尖、茎尖、花药等材料的压片（非切片法）用卡诺固定液。
（3）材料体积的影响
对于微小材料可直接投入固定液，对于较大材料，则须将其先解剖成较小材料，再迅速投入固定液。若材料外部超过固定液上线，达不到固定作用时，应须立即放入渗透力很强的固定液中，如醋酸酒精溶液；或利用超声波发生器处理数min。
⑵ 纳瓦兴(Navaschjn's)固定液 1912年首创.适用于细胞学与组织学研究的切片观察.但渗透慢,不能长期保存;主要用于显示分裂相.
(三)抽气
植物材料内部多由于含有空气,导致固定液不能完全深入.材料投入固定液后需要立即抽气.以便让固定液有效透入材料组织中,并排除材料内气泡的干扰.
一般抽气时间为20-30 min.抽过气的材料在停止抽气,应沉入底部.
取材的注意事项如下:
(1)取材料要新鲜.动作要迅速,以免挤压损坏组织;取病理材料时,应设置对照材料.
(2)所取材料大小要适当:根和茎一般直径≤5mm,切取成5-10mm小段;叶片一般取过中脉处,切成2-5mm宽,5-8mm长.在切材料时,必须注意刀片与中轴成直角,两切面平行,否则制成的切片细胞是斜的. 雌,雄蕊一般不需分割.
浸蜡是一个渐进的过程,常用
(八)包埋
材料经过足够时间的浸蜡后,需包入蜡块,以备切片.
操作方法:根据切片材料大小,确定所需纸盒的尺寸,用表面光滑的磅纸预先叠好纸盒.
(九)切片
即将包埋好的材料块用切片机切成所需厚度的切片带.
(十)贴片
是用黏贴剂把切片平铺贴在载玻片上,以便于染色和观察.
(六)透明
透明剂要具有既能与脱水剂相混合又能和石蜡相混合的性质,可以将材料中的脱水剂置换出来,使石蜡能顺利进入材料中.
二甲苯是目前应用最广的透明剂,作用迅速,但易使材料变脆..
(七)浸蜡
是指逐步清除材料中的透明剂,以使石蜡充分渗透于材料内部的过程.这样,材料的各部分都能保持原来的结构与位置,切片不致发生破裂或其他变形.
在显微镜下观察植物体内部的细微结构之前,必须根据植物材料的特性,采用不同的方法,对植物材料进行处理,把材料制成透明的玻片标本.根据材料的性质和制作法的不同,常用的植物显微制片技术可以分为切片法与非切片法两大类,前者常用的有徒手切片法,冰冻切片法,火棉胶切片法,石蜡切片法,冷冻切片法等,其中以石蜡切片法最为常用.后者包括整体封藏法,涂布法,压片法等.
（4）多毛芽或根茎的固定
对多毛的芽或根茎固定时，须先投入渗透能力很强的醋酸酒精溶液中数分钟，然后再投入其它固定液中固定。必要时配合抽气装置，其意义在于使固定液尽快渗入材料内部，并排除材料内气泡的干扰。
3．脱水时的注意事项
（1）脱水从低浓度开始逐渐替换高浓度酒精，否则发生细胞收缩。
（2）从同浓度（保存液中）酒精开始。例FAA从70%或50%酒精开始。注意要加盖，各级酒精停留时间因材料而定。
4．透明
等量纯酒精及二甲苯中2h，二甲苯2h(中间换一次)。
5．透蜡
将已经透明的材料和二甲苯一起倒入包埋用的小杯中，此时可把写好的标签投入二甲苯中，然后轻轻倒入溶解的石蜡(熔点为52～54℃)，这样，石蜡就在二甲苯的上层凝固起来。小杯放在35～37℃的熔蜡炉内，使石蜡徐徐溶解到饱和为止，约需l～2d。
(五)脱水
材料经洗涤后含有部分水分,会使材料分解.而且透明剂与水是不相混合的,不利于材料的透明和包埋等后期处理.因此需用脱水剂逐渐除去材料中的水分,以便让石蜡渗透进细胞.所以,脱水是制片的关键环节.脱水剂要求能与水混合,而且能与其他有机溶剂互相替代.
脱水必须在有盖的玻璃器皿中进行,防止吸收空气中的水分;在更换高一级的脱水剂时,最好不要移动材料,以免损坏材料.
(二)固定
将已切好的材料尽快地浸入相当于材料10-15倍体积的固定液中.借助固定液的作用,使细胞的新陈代谢瞬时停止,并保持细胞或组织的形态构造及其内含物的状态不发生变化.从而达到使组织变硬从而便于切片,增强内含物的折光度,令细胞易于着色的目的,同时具有防腐作用.以新鲜配制固定液效果较好.固定的时间依材料的种类,性质,大小等而定.材料固定完毕,保存于加盖的容器内,贴上标签.
五、实验注意事项
1．在材料选择和切割时应注意下列问题：
（1）选取新鲜、无病虫害并具代表性的材料；
（2）先作徒手切片或剥离检查，决定适宜的材料，立即固定；
（3）注意按季节和植物生长发育不同阶段取材；
（4）材料大小要适当。
2．固定时应注意的问题：
（1）标签的填写
必须将标签纸贴于标本瓶上，并写上以下内容：编号、采集时间、地点、处理者姓名。另外，在实验记录本上表明编号的详细情况：何种植物的何种器官，是横切还是纵切，用的是何种固定液等等。
石蜡切片法
石蜡切片法是以石蜡作包埋剂,用旋转切片机将材料切成薄片,经一系列处理制成永久制片的方法.在研究植物的细胞,组织,胚胎以及形态等方面石蜡切片法是最理想的制片方法.
石蜡切片法的一般流程为:取材→固定→抽气→洗涤→脱水→透明→浸蜡→包埋→修块→切片→粘片→染色→封片.
取材
用锋利的刀片切取新鲜的植物材料,选定适宜的材料,立即固定.
（二）切片
1．装蜡
装紧蜡块固定锁紧扳手，并调节好角度与距离。
2．装刀
安装好切片刀，当倾角为15度左右时，用固定螺旋扭紧。
3．固定
先松开刀夹固定钮移动刀架，同时从侧面看，当切片刀刀刃与台木上的蜡面较平行且接近时进行固定，最后重新检查其它固定螺旋是否紧固。
4．调节厚度
调整切片厚度控制盘的刻度，一般切片厚度约在8～12μm之间。
(3)取材时间可根据切片要求有所区别.如:在进行植物发育的研究过程时,需要找到细胞分裂相,一般在晴天的早晨9:00-10:00时取材,此时植物细胞分裂活动较明显.
(4)取材不易过老,否则制片有难度(过老的材料须在滑走切片机上进行);对纵切的材料适当多取材,如根尖,茎尖等,因为切到材料正中的概率较低.
③ 多重染色 多种染料染色,如番红—固绿—桔红G;酸性品红—苯胺蓝—桔红G等.
(十二) 封藏
封藏于中性树胶中,使材料能在显微镜下清晰地显示出来,并能长期保存.
方法:将含材料的载玻片放在吸水纸上(切片一面向上),迅速地在切片的中央滴一滴树胶(必须在二甲苯干燥前进行),用右手持小镊子轻轻地夹住盖玻片的右侧,稍微倾斜使其左侧与封藏剂接触,然后再缓慢地放下,避免产生气泡.
4．透明时的注意事项
（1）使用时材料必须脱尽水分，否则发生乳状混浊。
（2）要避免材料收缩
六、作业
1．编制石蜡切片法中从固定到包埋的时间进程安排表；
2．包埋盒的制作；
3．就你自己在实验过程中遇到的问题进行分析与讨论。
实验八 石蜡切片法——固定与包埋
一、实验目的
掌握石蜡切片法中切片及染色的基本操作步骤及要点；
⑶ 醋酸 为凝固型固定剂.为无色透明的液体,刺激性极强,低温下凝结成冰,故又名冰醋酸.
2. 混合固定液:
由几种试剂,适量配制而成.混合遵循原则:① 优缺点互补;② 膨胀与收缩相互平衡;③ 强氧化剂与还原剂应分别配置.
常用混合固定液有下列几种:
⑴ FAA 固定液(福尔马林-冰醋酸-乙醇) 广泛适用于根,茎,叶,花药,子房的组织切片,所以又称为万能固定液.一般固定时间不低于24 h.该固定液优点是在较低温度下(10℃左右)适用于材料的长期保存,可兼作保存液.并且固定的材料,不妨碍染色,但用于细胞学上的固定效果较差.
３、每张切片都是来之不易的，因此，应倍加爱护，不要损坏。
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其他回答(2)
家，港湾。 3级 2009-09-14
实验七 石蜡切片法——固定与包埋
一、实验目的
掌握石蜡切片法中固定、透明与包埋的基本操作步骤及要点。
二、实验材料
党参、秦艽或其它药材的根
三、实验用具及试剂
福尔马林-酒精-醋酸混合固定液(简称FAA)、各级酒精溶液、二甲苯、石蜡（熔点52～54℃）、恒温箱、电热板、解剖针等。
良好的固定剂,应是穿透力强,使细胞立刻致死,原生质全部凝固;不发生任何变形,增强折光率,并且不妨碍染色.
常用固定液:
简单固定液 以一种化学药品配制的固定液.
⑴ 乙醇 为凝固型固定剂.常用无水乙醇或95%乙醇.
⑵ 甲醛 为非凝固性固定剂.具强烈刺激性气味.纯净的甲醛为无色透明液体.固定用的浓度为4%-10%.
四、实验内容与步骤
1．取材
取培养在花盆中或药用植物园中的党参根或秦艽根，用水冲去附在其上的木屑或泥土，切成5mm长的小段(亦可用带侧根的部分)。
2．固定
FAA固定液中固定24h以上。
3．脱水
将FAA固定液倒出后，转入70%酒精中浸泡1h后，再顺次转入83%和95%酒精中各2h，然后转入纯酒精中2～3h（中间换一次)。
二、实验材料
党参、秦艽或其它药材的根
三、实验用具及试剂
各级酒精溶液、二甲苯、1%番红水溶液、0.1%的固绿酒精溶液、蛋白粘片剂、加拿大树胶、单面保安刀片、毛笔、镊子、电热板、台木、旋转切片机、染色缸等。
四、实验内容与步骤
（一）固着与修整
取保存的材料，卸下纸盒，将蜡块沿材料之间切适当的深沟，用手分裂蜡块，然后切去材料四周的蜡，仅留一少部分不使材料暴露并成为适当大小的方块，材料四周的蜡面一定要平正，用烧热的解剖刀使蜡块底部及蜡座上面的石蜡稍熔化，而将蜡块粘在金属盘或台木的蜡座上。
5．切片
开启切片机总开关，试摇切片机手轮，左手持毛笔每摇动一圈，就切下一个蜡片；第一片常贴在刀刃上，当第二片切下时，第一片与第二片的边缘即连在一起，连续摇动手轮，连续蜡带就形成。当蜡带连成一定长度后，用左手的毛笔将蜡带轻轻抬起，边摇边移动蜡带，待蜡带切下长达20～30cm时，停时摇手轮，另用右手执另一毛笔顺刀刃轻轻取下蜡带，两毛笔托着整个蜡带评放于切片机左侧的白纸上或蜡带盒内。使蜡带靠刀的光滑面向下，无光泽面向上；在粘片时，蜡带在载玻片上放置，也按光面向下的位置贴放。
(四)洗涤
固定液中的成分有可能会妨碍染色或发生沉淀或结晶,影响观察;有的还会继续作用,使材料变质等.因此,在使用材料时,需根据固定液的种类,用水,缓冲液或70%乙醇洗去渗入细胞内部的固定液.如:用FAA固定的材料在脱水时用70%乙醇反复洗涤数次.如用水洗涤,可将材料自固定液中取出,放入指形管,加入半管水,用纱布将管口扎紧,置于水槽内,进行流水冲洗.流水冲洗时间一般为12-24 h.
6．包埋
先将小杯移入56～60℃的恒温箱内(温度宜较石蜡熔点高3℃)，待石蜡熔化后，倒去含二甲苯的石蜡，换以熔化的纯石蜡，以后每隔lh左右换纯蜡一次，材料在恒温箱中的时间视不同材料而异，约为2～5h，共换纯蜡2～3次，即可进行包埋。
包埋时，先用道林纸摺成适当大小的纸盒，放在已经加热的电热板上。然后右手持解剖执针，左手从温箱中取出盛满石蜡的小杯，随手将温箱关好，迅速把石蜡连同材料和标签一起倒入纸盒中，再用烤热的解剖针轻轻拨动材料使之排列整齐。如发现材料附近有石蜡的凝块，则需用热针熔去，同时使标签上有字的一面朝外，以便识别。稍停，待盒中石蜡凝到不致动摇材料时，就将纸盒轻轻放入冷水中使它迅速凝固。半h后，即可取出贮藏备用。
常用的粘片剂有下列二种:
(1) 明胶黏片剂
(2) 蛋清黏片剂
(十一) 染色
即根据植物细胞中不同的化学性质,用染料分别进行染色,以利于观察切片中细胞与组织的形态与构造及其内含物等.染色基本程序为脱蜡,染色,分色封片.
染色方法可分为下列几类:
① 单染 只用一种染料染色.
② 双重染色 两种染料染色,如番红--固绿;苏木精---曙红.
补充：
注意事项：
１、制片是一个连续的操作过程，往往要连续几天才能完成，因此，事先一定要制订工作日程计划，应按顺序进行工作。这样可避免和其它工作发生冲突，也不会因前后顺序颠到或超过了规定的时间，给工作带来不必要的损失。
２、制片的各个步骤都是互相关联的，如脱水不彻底就会影响到透明的程度，以至影响蜡块的质量。为此，必须对任何一个步骤，都要细致、严格进行操作。
根据所用材料的不同，选择不同的固定液。一般，各种器官，不论是根、茎、叶，还是花和果实，其组织切片均用FAA固定液，而根尖、茎尖、花药等材料的压片（非切片法）用卡诺固定液。
（3）材料体积的影响
对于微小材料可直接投入固定液，对于较大材料，则须将其先解剖成较小材料，再迅速投入固定液。若材料外部超过固定液上线，达不到固定作用时，应须立即放入渗透力很强的固定液中，如醋酸酒精溶液；或利用超声波发生器处理数min。
⑵ 纳瓦兴(Navaschjn's)固定液 1912年首创.适用于细胞学与组织学研究的切片观察.但渗透慢,不能长期保存;主要用于显示分裂相.
(三)抽气
植物材料内部多由于含有空气,导致固定液不能完全深入.材料投入固定液后需要立即抽气.以便让固定液有效透入材料组织中,并排除材料内气泡的干扰.
一般抽气时间为20-30 min.抽过气的材料在停止抽气,应沉入底部.
取材的注意事项如下:
(1)取材料要新鲜.动作要迅速,以免挤压损坏组织;取病理材料时,应设置对照材料.
(2)所取材料大小要适当:根和茎一般直径≤5mm,切取成5-10mm小段;叶片一般取过中脉处,切成2-5mm宽,5-8mm长.在切材料时,必须注意刀片与中轴成直角,两切面平行,否则制成的切片细胞是斜的. 雌,雄蕊一般不需分割.
浸蜡是一个渐进的过程,常用
(八)包埋
材料经过足够时间的浸蜡后,需包入蜡块,以备切片.
操作方法:根据切片材料大小,确定所需纸盒的尺寸,用表面光滑的磅纸预先叠好纸盒.
(九)切片
即将包埋好的材料块用切片机切成所需厚度的切片带.
(十)贴片
是用黏贴剂把切片平铺贴在载玻片上,以便于染色和观察.
(六)透明
透明剂要具有既能与脱水剂相混合又能和石蜡相混合的性质,可以将材料中的脱水剂置换出来,使石蜡能顺利进入材料中.
二甲苯是目前应用最广的透明剂,作用迅速,但易使材料变脆..
(七)浸蜡
是指逐步清除材料中的透明剂,以使石蜡充分渗透于材料内部的过程.这样,材料的各部分都能保持原来的结构与位置,切片不致发生破裂或其他变形.
在显微镜下观察植物体内部的细微结构之前,必须根据植物材料的特性,采用不同的方法,对植物材料进行处理,把材料制成透明的玻片标本.根据材料的性质和制作法的不同,常用的植物显微制片技术可以分为切片法与非切片法两大类,前者常用的有徒手切片法,冰冻切片法,火棉胶切片法,石蜡切片法,冷冻切片法等,其中以石蜡切片法最为常用.后者包括整体封藏法,涂布法,压片法等.
（4）多毛芽或根茎的固定
对多毛的芽或根茎固定时，须先投入渗透能力很强的醋酸酒精溶液中数分钟，然后再投入其它固定液中固定。必要时配合抽气装置，其意义在于使固定液尽快渗入材料内部，并排除材料内气泡的干扰。
3．脱水时的注意事项
（1）脱水从低浓度开始逐渐替换高浓度酒精，否则发生细胞收缩。
（2）从同浓度（保存液中）酒精开始。例FAA从70%或50%酒精开始。注意要加盖，各级酒精停留时间因材料而定。
4．透明
等量纯酒精及二甲苯中2h，二甲苯2h(中间换一次)。
5．透蜡
将已经透明的材料和二甲苯一起倒入包埋用的小杯中，此时可把写好的标签投入二甲苯中，然后轻轻倒入溶解的石蜡(熔点为52～54℃)，这样，石蜡就在二甲苯的上层凝固起来。小杯放在35～37℃的熔蜡炉内，使石蜡徐徐溶解到饱和为止，约需l～2d。
(五)脱水
材料经洗涤后含有部分水分,会使材料分解.而且透明剂与水是不相混合的,不利于材料的透明和包埋等后期处理.因此需用脱水剂逐渐除去材料中的水分,以便让石蜡渗透进细胞.所以,脱水是制片的关键环节.脱水剂要求能与水混合,而且能与其他有机溶剂互相替代.
脱水必须在有盖的玻璃器皿中进行,防止吸收空气中的水分;在更换高一级的脱水剂时,最好不要移动材料,以免损坏材料.
(二)固定
将已切好的材料尽快地浸入相当于材料10-15倍体积的固定液中.借助固定液的作用,使细胞的新陈代谢瞬时停止,并保持细胞或组织的形态构造及其内含物的状态不发生变化.从而达到使组织变硬从而便于切片,增强内含物的折光度,令细胞易于着色的目的,同时具有防腐作用.以新鲜配制固定液效果较好.固定的时间依材料的种类,性质,大小等而定.材料固定完毕,保存于加盖的容器内,贴上标签.
五、实验注意事项
1．在材料选择和切割时应注意下列问题：
（1）选取新鲜、无病虫害并具代表性的材料；
（2）先作徒手切片或剥离检查，决定适宜的材料，立即固定；
（3）注意按季节和植物生长发育不同阶段取材；
（4）材料大小要适当。
2．固定时应注意的问题：
（1）标签的填写
必须将标签纸贴于标本瓶上，并写上以下内容：编号、采集时间、地点、处理者姓名。另外，在实验记录本上表明编号的详细情况：何种植物的何种器官，是横切还是纵切，用的是何种固定液等等。
石蜡切片法
石蜡切片法是以石蜡作包埋剂,用旋转切片机将材料切成薄片,经一系列处理制成永久制片的方法.在研究植物的细胞,组织,胚胎以及形态等方面石蜡切片法是最理想的制片方法.
石蜡切片法的一般流程为:取材→固定→抽气→洗涤→脱水→透明→浸蜡→包埋→修块→切片→粘片→染色→封片.
取材
用锋利的刀片切取新鲜的植物材料,选定适宜的材料,立即固定.
（二）切片
1．装蜡
装紧蜡块固定锁紧扳手，并调节好角度与距离。
2．装刀
安装好切片刀，当倾角为15度左右时，用固定螺旋扭紧。
3．固定
先松开刀夹固定钮移动刀架，同时从侧面看，当切片刀刀刃与台木上的蜡面较平行且接近时进行固定，最后重新检查其它固定螺旋是否紧固。
4．调节厚度
调整切片厚度控制盘的刻度，一般切片厚度约在8～12μm之间。
(3)取材时间可根据切片要求有所区别.如:在进行植物发育的研究过程时,需要找到细胞分裂相,一般在晴天的早晨9:00-10:00时取材,此时植物细胞分裂活动较明显.
(4)取材不易过老,否则制片有难度(过老的材料须在滑走切片机上进行);对纵切的材料适当多取材,如根尖,茎尖等,因为切到材料正中的概率较低.
③ 多重染色 多种染料染色,如番红—固绿—桔红G;酸性品红—苯胺蓝—桔红G等.
(十二) 封藏
封藏于中性树胶中,使材料能在显微镜下清晰地显示出来,并能长期保存.
方法:将含材料的载玻片放在吸水纸上(切片一面向上),迅速地在切片的中央滴一滴树胶(必须在二甲苯干燥前进行),用右手持小镊子轻轻地夹住盖玻片的右侧,稍微倾斜使其左侧与封藏剂接触,然后再缓慢地放下,避免产生气泡.
4．透明时的注意事项
（1）使用时材料必须脱尽水分，否则发生乳状混浊。
（2）要避免材料收缩
六、作业
1．编制石蜡切片法中从固定到包埋的时间进程安排表；
2．包埋盒的制作；
3．就你自己在实验过程中遇到的问题进行分析与讨论。
实验八 石蜡切片法——固定与包埋
一、实验目的
掌握石蜡切片法中切片及染色的基本操作步骤及要点；
⑶ 醋酸 为凝固型固定剂.为无色透明的液体,刺激性极强,低温下凝结成冰,故又名冰醋酸.
2. 混合固定液:
由几种试剂,适量配制而成.混合遵循原则:① 优缺点互补;② 膨胀与收缩相互平衡;③ 强氧化剂与还原剂应分别配置.
常用混合固定液有下列几种:
⑴ FAA 固定液(福尔马林-冰醋酸-乙醇) 广泛适用于根,茎,叶,花药,子房的组织切片,所以又称为万能固定液.一般固定时间不低于24 h.该固定液优点是在较低温度下(10℃左右)适用于材料的长期保存,可兼作保存液.并且固定的材料,不妨碍染色,但用于细胞学上的固定效果较差.
３、每张切片都是来之不易的，因此，应倍加爱护，不要损坏。
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其他回答(2)
家，港湾。 3级 2009-09-14
实验七 石蜡切片法——固定与包埋
一、实验目的
掌握石蜡切片法中固定、透明与包埋的基本操作步骤及要点。
二、实验材料
党参、秦艽或其它药材的根
三、实验用具及试剂
福尔马林-酒精-醋酸混合固定液(简称FAA)、各级酒精溶液、二甲苯、石蜡（熔点52～54℃）、恒温箱、电热板、解剖针等。
良好的固定剂,应是穿透力强,使细胞立刻致死,原生质全部凝固;不发生任何变形,增强折光率,并且不妨碍染色.
常用固定液:
简单固定液 以一种化学药品配制的固定液.
⑴ 乙醇 为凝固型固定剂.常用无水乙醇或95%乙醇.
⑵ 甲醛 为非凝固性固定剂.具强烈刺激性气味.纯净的甲醛为无色透明液体.固定用的浓度为4%-10%.
四、实验内容与步骤
1．取材
取培养在花盆中或药用植物园中的党参根或秦艽根，用水冲去附在其上的木屑或泥土，切成5mm长的小段(亦可用带侧根的部分)。
2．固定
FAA固定液中固定24h以上。
3．脱水
将FAA固定液倒出后，转入70%酒精中浸泡1h后，再顺次转入83%和95%酒精中各2h，然后转入纯酒精中2～3h（中间换一次)。
二、实验材料
党参、秦艽或其它药材的根
三、实验用具及试剂
各级酒精溶液、二甲苯、1%番红水溶液、0.1%的固绿酒精溶液、蛋白粘片剂、加拿大树胶、单面保安刀片、毛笔、镊子、电热板、台木、旋转切片机、染色缸等。
四、实验内容与步骤
（一）固着与修整
取保存的材料，卸下纸盒，将蜡块沿材料之间切适当的深沟，用手分裂蜡块，然后切去材料四周的蜡，仅留一少部分不使材料暴露并成为适当大小的方块，材料四周的蜡面一定要平正，用烧热的解剖刀使蜡块底部及蜡座上面的石蜡稍熔化，而将蜡块粘在金属盘或台木的蜡座上。
5．切片
开启切片机总开关，试摇切片机手轮，左手持毛笔每摇动一圈，就切下一个蜡片；第一片常贴在刀刃上，当第二片切下时，第一片与第二片的边缘即连在一起，连续摇动手轮，连续蜡带就形成。当蜡带连成一定长度后，用左手的毛笔将蜡带轻轻抬起，边摇边移动蜡带，待蜡带切下长达20～30cm时，停时摇手轮，另用右手执另一毛笔顺刀刃轻轻取下蜡带，两毛笔托着整个蜡带评放于切片机左侧的白纸上或蜡带盒内。使蜡带靠刀的光滑面向下，无光泽面向上；在粘片时，蜡带在载玻片上放置，也按光面向下的位置贴放。
(四)洗涤
固定液中的成分有可能会妨碍染色或发生沉淀或结晶,影响观察;有的还会继续作用,使材料变质等.因此,在使用材料时,需根据固定液的种类,用水,缓冲液或70%乙醇洗去渗入细胞内部的固定液.如:用FAA固定的材料在脱水时用70%乙醇反复洗涤数次.如用水洗涤,可将材料自固定液中取出,放入指形管,加入半管水,用纱布将管口扎紧,置于水槽内,进行流水冲洗.流水冲洗时间一般为12-24 h.
6．包埋
先将小杯移入56～60℃的恒温箱内(温度宜较石蜡熔点高3℃)，待石蜡熔化后，倒去含二甲苯的石蜡，换以熔化的纯石蜡，以后每隔lh左右换纯蜡一次，材料在恒温箱中的时间视不同材料而异，约为2～5h，共换纯蜡2～3次，即可进行包埋。
包埋时，先用道林纸摺成适当大小的纸盒，放在已经加热的电热板上。然后右手持解剖执针，左手从温箱中取出盛满石蜡的小杯，随手将温箱关好，迅速把石蜡连同材料和标签一起倒入纸盒中，再用烤热的解剖针轻轻拨动材料使之排列整齐。如发现材料附近有石蜡的凝块，则需用热针熔去，同时使标签上有字的一面朝外，以便识别。稍停，待盒中石蜡凝到不致动摇材料时，就将纸盒轻轻放入冷水中使它迅速凝固。半h后，即可取出贮藏备用。
常用的粘片剂有下列二种:
(1) 明胶黏片剂
(2) 蛋清黏片剂
(十一) 染色
即根据植物细胞中不同的化学性质,用染料分别进行染色,以利于观察切片中细胞与组织的形态与构造及其内含物等.染色基本程序为脱蜡,染色,分色封片.
染色方法可分为下列几类:
① 单染 只用一种染料染色.
② 双重染色 两种染料染色,如番红--固绿;苏木精---曙红.
补充：
注意事项：
１、制片是一个连续的操作过程，往往要连续几天才能完成，因此，事先一定要制订工作日程计划，应按顺序进行工作。这样可避免和其它工作发生冲突，也不会因前后顺序颠到或超过了规定的时间，给工作带来不必要的损失。
２、制片的各个步骤都是互相关联的，如脱水不彻底就会影响到透明的程度，以至影响蜡块的质量。为此，必须对任何一个步骤，都要细致、严格进行操作。