B族链球菌筛查
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通过实验鉴定，验证了颜色可靠，结果准确
22
GBS检测方法比较
GBS检测方法比较
显色培养基
PCR
免疫
备注
原理 培养
DNA PCR
ELISA/胶体金
培养方法是细菌检测的金标准
操作流程 采样-接种-孵育-观察
采样-准备样品（震荡离心） 胶体金：采样-稀释-加样-
-准备对照品-DNA提取-准备 观察结果 反应液和反应管-扩增-分析 ELISA:样品准备-加样-孵育
本次妊娠有GBS菌尿； 上次新生儿GBS感染史； 在妊娠37周之前分娩； 胎膜早破 分娩温度超过38℃ GBS阳性孕妇新生儿出生以后 产程中发生宫内感染的产妇及新生儿
根据统计，这种方案会对26.7%的分娩者 进行预防性治疗，可以预防86%的新生儿 早发GBS感染
7
美国CDC-2010 GBS筛查指南GBS治疗
➢ 法国进口（10个月效期） ➢ 用于孕妇阴道—肛肠样本中B族链球菌检测时的选择性增菌 ➢ 培养基中成分有助于含多种微生物标本中链球菌的生长。 ➢ 培养基中含抗生素（萘啶酸和粘菌素）能抑制标本附属菌群中的
大部分革兰氏阴性菌的生长。
10
B链筛查培养基
B族链球菌筛查培养基是一种选择性产色培养基，供医疗机构用于筛查临 床样本中孕妇B族链球菌携带情况。 由不同种类的蛋白胨、3种显色底物和抗生素组成，这些成分能够通过培 养基上生长出的浅粉色到红色菌落来筛查无乳链球菌。 其它细菌和酵母菌多数不在这种培养基中生长，或产生紫色、蓝色，无 色的不典型菌落。 典型的无乳链球菌落呈浅粉色到红，圆形呈珍珠状
临床致病表现为菌血症、泌尿系统 感染、胎膜感染、胎膜早破、产褥 感染（发病率为1%～7.2%，是产 妇死亡的四大原因之一）、子宫内 膜感染以及创伤感染。
GBS感染诱发早产率最高达60%， 研究表明，GBS阳性孕妇早产合并 低出生体重儿、极低体重儿的可能 性增加20%-60%。
新生儿
超过半数的新生儿是在母亲 GBS 检查阳性但没有接受治疗的情况下 出生，约有 2% 最终发展成为侵袭 性疾病
母亲阴道携带GBS是新生儿感染的主要 高危因素之一。要降低孕产妇的带菌率 以及新生儿的发病率和病死率,就需要先 进的GBS诊断技术,这样才能有效地对感 染者进行预防和治疗
4
Case analysis
5
6
美国CDC-2010 GBS筛查指南
对所有孕妇于妊娠35-37周进行GBS筛查，结果阳性者进行预防性治疗 以下情况，应进行GBS检查和预防性治疗：
早发型感染-80%(生后7 d以内)主要 引起肺炎和败血症,是新生儿死亡的 主要原因之一
晚期感染-20%（生后第1周至3个月， 平均1个月)，通常因横向传播引起， 表现为菌血症发热和脑膜炎。
值得注意的是，GBS感染即使治愈， 也可能遗留长期病理状态如耳聋、 视力受损、发育障碍以及脑瘫等
3
GBS新生儿感染率
定位
综合性三级医院 地区性有影响力的妇幼保健医院 外资医院（GBS筛查指南要求比较严格）
收费情况
GBS筛查/检测（100-200不等） 套用一般性细菌培养与鉴定（60-80不等）
17
B族链球菌检测案例（临床标本）
孕妇：X某 孕期：36周 症状：发烧 标本：阴道拭子/肛拭子 检测方法：产色培养基 检测试剂：chromID StreptoB
20
根据说明，两个标本均排除B族链球菌感染的可能
强光照射下下出现疑似菌落，为了验证产 色培养基的培养结果，使用Vitek MS （20 Mins）进行快速鉴定
lactobacillus salivarius 唾液乳杆菌
Enterococcus faecalis 粪肠球菌
21
检验结果的解释
经过培养后，观察细菌增长情况以及菌落形态：典型的无乳链球菌菌落 呈浅粉色到红色，圆形呈珍珠状。其他无明显特征颜色，可排除B族链球 菌感染 其它种类微生物的生长会受到抑制，或其生成的菌落呈不同的颜色（例 如：紫色、蓝色、无色等）。
主要危害群体：孕产妇，尤其是新生儿
在美国，大约25%到40%的孕妇的产道携带这种细菌。 其中40%～70%在分娩过程中会传递给新生儿 早发B族链球菌病（小于7天的婴儿）是引起新生儿疾病和死亡的首位感染性疾 病
2
GBS的主要危害
孕产妇
GBS 定植在发展中国家中平均为 12.7%。也是我国孕妇主要携带细 菌之一( 8. 95% ～10. 10% )；
显色培养基操作最简单
结果
-洗板-底物反应-读数
所需设备 无
离心机、荧光PCR仪、漩涡 ELISA:酶标仪、洗板机；
混合器、恒温震荡器
胶体金：无
显色培养基检测毋需设备，节省成本
作用
培养+初步鉴定GBS，培 养的菌落可用于后续药敏 鉴定GBS 实验
鉴定GBS
显色培养基除可做培养和初步鉴定外， 其菌落可用于后续的药敏实验，而 PCR和免疫方法则仅用于鉴别，如需 药敏实验必须重新做培养
孕35-37周取阴道和直肠拭子做GBS检测
GBS(+)
给予青霉素预防
产时高危因素：产时发热 ≥38℃，胎膜早破≥18小时 进行GBS检测未做
GBS(+)
(对于青霉素过敏的病患)
GBS(-)
GBS(-)
毋须药物预防
否
是
青霉素G首剂480万单位，后每4小时240—320万单位静滴 直至分娩或阿莫西林首剂2g，后每4小时1g静滴直至分娩
患者使用青霉素出现下列症状：过敏反 应；血管性水肿；呼吸困难；荨麻疹
否
是
头孢唑啉首剂2g，后每8小时1g静滴直至分娩
是否对克林霉素和红霉素敏感
否
是
万古霉素每12小时1g静滴直至分娩
克林霉素900mg每8小时静滴直至分娩
分娩期预防性使用抗生素，以防止围产期B族链球菌感染，B组链球菌的发病率在过去十年中下降70％-U8S
郭健飞—市场部·生物梅里埃 ramon.guo@
采集标本 直接接种
转运培养基，变浑浊
37℃有氧，24小时后
阴道标本，无菌生长
肛门标本，蓝色细菌
37℃有氧，24小时后，没有发现浅粉色/红色，圆形珍珠状 菌落。继续培养24小时
1948Biblioteka 时的生长情况 阴道标本阴性，48小时，没有细菌生长； 肛门标本阴性，48小时，没有B族链球菌（浅粉/红色，圆形珍珠状）
接种到Strepto产色培 养基（避光18-24h）
如24h无生长 延长至48小时
粉色至红色，圆形&珍珠状菌落 -GBS
无生长或蓝色紫色无色不典型菌落-杂菌
13
颜色典型，清晰明确的判读结果（纯菌落）
Streptococcus agalactiae ATCC NCTC 8190
无乳链球菌 ATCC 12386 + 粪肠球菌ATCC 29212
16
国内市场容量/定位/收费
市场容量
平均每年1600万新生儿（二胎政策开放以后，新生儿数量会增加），目前约一 半剖腹产，随着剖腹产手术的管理加强，顺产儿会超过半数 除35-37围产期筛查之外，有部分医院在产中会做筛查，以保证孕妇和胎儿的健 康情况，避免因为GBS引起的胎膜早破，羊膜腔感染和产褥感染等
B族链球菌筛查
蔄日明—生物梅里埃 amy.man@
什么是GBS？
B族链球菌（GBS）/无乳链球菌，兼性厌氧菌， 革兰阳性球菌，单个、成双、链状排列、长短不一
正常寄居于阴道和直肠，它是一种条件致病菌，围产 期妇女在分娩过程中，新生儿在通过产道时可被感染。
在血琼脂平板上35 ℃培养18 ~ 24 h ，形成灰白色、表面光滑、有乳光、 圆形、β溶血的菌落，部分菌株无β溶血环
11
B链培养基使用方法
采样
阴道口1 / 3
肛门括约肌2~5cm
孕妇：先檫去外阴分泌物，将1根无菌阴道拭子放入阴道下1/3内，旋 转1周采取阴道分泌物，再使用1根棉拭子插入肛门，在肛门括约肌上 2-3cm处轻轻旋转取得直肠分泌物
新生儿：无菌棉拭子在新生儿鼻腔，咽部旋转1周取分泌物。脑脊液、 血液、痰液亦可
可检测样本
阴道直肠拭子；尿液；新 生儿胃吸出物等
阴道直肠拭子
血清，血浆等
孕妇筛查适用样本为阴道直肠拭子
检测时间 18-24小时
2小时
2小时
虽然PCR和免疫学方法有速度优势， 但对于筛查的病人，并不急于诊断， 所以实验室和临床可以接受培养相对 较慢的速度
用户成本 较低
较高
？
一般收费 60-80
60-100
12
* 新生儿消化胃液在国外临床实验中为有效样本类型
B链培养基使用方法
接种 读取结果
使用选择性增菌液，可显著提高 阳性率，避免50%的GBS携带者 出现假阴性结果(US-CDC2010)
Todd-Hewitt增菌肉 汤（18-24h）
接种到Strepto产色培 养基（避光18-24h）
（有氧，37℃）
70年代美国新生儿GBS感染的发病率是(2～3) /1000活产婴,病死率大于 50%。90年代以来,美国的产前抗生素预防策略使GBS感染的发病率和病 死率均有所降低,其中新生儿早发型GBS感染的发病率下降了70% ,但在 晚发型却没有明显变化。
CDC与其他机构共同制定了《围产期B族 链球菌感染筛查及防治指南》，并于 2002年和2010年进行了修改，发病率从 90年代早期1.7/1000个新生儿降低到了 近些年的0.34-0.37/1000个新生儿。
ELISA:30-60 胶体金：10-20
9
chromID StreptoB B链筛查培养基&增菌液
chromID StreptoB（43461-86） B族链球菌筛查培养基
上海生产 筛查临床样本中孕产妇B族链球菌携带情况。
➢ Todd Hewitt broth + antibiotics（42116） B族链球菌增菌肉汤
无乳链球菌 ATCC 12386 + 白色念珠菌 ATCC 10231
实验室实物拍摄
14
颜色典型，清晰明确的判读结果（临床标本）
血平板
需透光观察 少小菌落易漏诊
非溶血B链无法观测
StreptoB 产色平板
颜色典型，清晰可辨 所有的B链均可被检出：
无论是否具有溶血性
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增菌液的必要性和色素增菌液的缺陷
22
GBS检测方法比较
GBS检测方法比较
显色培养基
PCR
免疫
备注
原理 培养
DNA PCR
ELISA/胶体金
培养方法是细菌检测的金标准
操作流程 采样-接种-孵育-观察
采样-准备样品（震荡离心） 胶体金：采样-稀释-加样-
-准备对照品-DNA提取-准备 观察结果 反应液和反应管-扩增-分析 ELISA:样品准备-加样-孵育
本次妊娠有GBS菌尿； 上次新生儿GBS感染史； 在妊娠37周之前分娩； 胎膜早破 分娩温度超过38℃ GBS阳性孕妇新生儿出生以后 产程中发生宫内感染的产妇及新生儿
根据统计，这种方案会对26.7%的分娩者 进行预防性治疗，可以预防86%的新生儿 早发GBS感染
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美国CDC-2010 GBS筛查指南GBS治疗
➢ 法国进口（10个月效期） ➢ 用于孕妇阴道—肛肠样本中B族链球菌检测时的选择性增菌 ➢ 培养基中成分有助于含多种微生物标本中链球菌的生长。 ➢ 培养基中含抗生素（萘啶酸和粘菌素）能抑制标本附属菌群中的
大部分革兰氏阴性菌的生长。
10
B链筛查培养基
B族链球菌筛查培养基是一种选择性产色培养基，供医疗机构用于筛查临 床样本中孕妇B族链球菌携带情况。 由不同种类的蛋白胨、3种显色底物和抗生素组成，这些成分能够通过培 养基上生长出的浅粉色到红色菌落来筛查无乳链球菌。 其它细菌和酵母菌多数不在这种培养基中生长，或产生紫色、蓝色，无 色的不典型菌落。 典型的无乳链球菌落呈浅粉色到红，圆形呈珍珠状
临床致病表现为菌血症、泌尿系统 感染、胎膜感染、胎膜早破、产褥 感染（发病率为1%～7.2%，是产 妇死亡的四大原因之一）、子宫内 膜感染以及创伤感染。
GBS感染诱发早产率最高达60%， 研究表明，GBS阳性孕妇早产合并 低出生体重儿、极低体重儿的可能 性增加20%-60%。
新生儿
超过半数的新生儿是在母亲 GBS 检查阳性但没有接受治疗的情况下 出生，约有 2% 最终发展成为侵袭 性疾病
母亲阴道携带GBS是新生儿感染的主要 高危因素之一。要降低孕产妇的带菌率 以及新生儿的发病率和病死率,就需要先 进的GBS诊断技术,这样才能有效地对感 染者进行预防和治疗
4
Case analysis
5
6
美国CDC-2010 GBS筛查指南
对所有孕妇于妊娠35-37周进行GBS筛查，结果阳性者进行预防性治疗 以下情况，应进行GBS检查和预防性治疗：
早发型感染-80%(生后7 d以内)主要 引起肺炎和败血症,是新生儿死亡的 主要原因之一
晚期感染-20%（生后第1周至3个月， 平均1个月)，通常因横向传播引起， 表现为菌血症发热和脑膜炎。
值得注意的是，GBS感染即使治愈， 也可能遗留长期病理状态如耳聋、 视力受损、发育障碍以及脑瘫等
3
GBS新生儿感染率
定位
综合性三级医院 地区性有影响力的妇幼保健医院 外资医院（GBS筛查指南要求比较严格）
收费情况
GBS筛查/检测（100-200不等） 套用一般性细菌培养与鉴定（60-80不等）
17
B族链球菌检测案例（临床标本）
孕妇：X某 孕期：36周 症状：发烧 标本：阴道拭子/肛拭子 检测方法：产色培养基 检测试剂：chromID StreptoB
20
根据说明，两个标本均排除B族链球菌感染的可能
强光照射下下出现疑似菌落，为了验证产 色培养基的培养结果，使用Vitek MS （20 Mins）进行快速鉴定
lactobacillus salivarius 唾液乳杆菌
Enterococcus faecalis 粪肠球菌
21
检验结果的解释
经过培养后，观察细菌增长情况以及菌落形态：典型的无乳链球菌菌落 呈浅粉色到红色，圆形呈珍珠状。其他无明显特征颜色，可排除B族链球 菌感染 其它种类微生物的生长会受到抑制，或其生成的菌落呈不同的颜色（例 如：紫色、蓝色、无色等）。
主要危害群体：孕产妇，尤其是新生儿
在美国，大约25%到40%的孕妇的产道携带这种细菌。 其中40%～70%在分娩过程中会传递给新生儿 早发B族链球菌病（小于7天的婴儿）是引起新生儿疾病和死亡的首位感染性疾 病
2
GBS的主要危害
孕产妇
GBS 定植在发展中国家中平均为 12.7%。也是我国孕妇主要携带细 菌之一( 8. 95% ～10. 10% )；
显色培养基操作最简单
结果
-洗板-底物反应-读数
所需设备 无
离心机、荧光PCR仪、漩涡 ELISA:酶标仪、洗板机；
混合器、恒温震荡器
胶体金：无
显色培养基检测毋需设备，节省成本
作用
培养+初步鉴定GBS，培 养的菌落可用于后续药敏 鉴定GBS 实验
鉴定GBS
显色培养基除可做培养和初步鉴定外， 其菌落可用于后续的药敏实验，而 PCR和免疫方法则仅用于鉴别，如需 药敏实验必须重新做培养
孕35-37周取阴道和直肠拭子做GBS检测
GBS(+)
给予青霉素预防
产时高危因素：产时发热 ≥38℃，胎膜早破≥18小时 进行GBS检测未做
GBS(+)
(对于青霉素过敏的病患)
GBS(-)
GBS(-)
毋须药物预防
否
是
青霉素G首剂480万单位，后每4小时240—320万单位静滴 直至分娩或阿莫西林首剂2g，后每4小时1g静滴直至分娩
患者使用青霉素出现下列症状：过敏反 应；血管性水肿；呼吸困难；荨麻疹
否
是
头孢唑啉首剂2g，后每8小时1g静滴直至分娩
是否对克林霉素和红霉素敏感
否
是
万古霉素每12小时1g静滴直至分娩
克林霉素900mg每8小时静滴直至分娩
分娩期预防性使用抗生素，以防止围产期B族链球菌感染，B组链球菌的发病率在过去十年中下降70％-U8S
郭健飞—市场部·生物梅里埃 ramon.guo@
采集标本 直接接种
转运培养基，变浑浊
37℃有氧，24小时后
阴道标本，无菌生长
肛门标本，蓝色细菌
37℃有氧，24小时后，没有发现浅粉色/红色，圆形珍珠状 菌落。继续培养24小时
1948Biblioteka 时的生长情况 阴道标本阴性，48小时，没有细菌生长； 肛门标本阴性，48小时，没有B族链球菌（浅粉/红色，圆形珍珠状）
接种到Strepto产色培 养基（避光18-24h）
如24h无生长 延长至48小时
粉色至红色，圆形&珍珠状菌落 -GBS
无生长或蓝色紫色无色不典型菌落-杂菌
13
颜色典型，清晰明确的判读结果（纯菌落）
Streptococcus agalactiae ATCC NCTC 8190
无乳链球菌 ATCC 12386 + 粪肠球菌ATCC 29212
16
国内市场容量/定位/收费
市场容量
平均每年1600万新生儿（二胎政策开放以后，新生儿数量会增加），目前约一 半剖腹产，随着剖腹产手术的管理加强，顺产儿会超过半数 除35-37围产期筛查之外，有部分医院在产中会做筛查，以保证孕妇和胎儿的健 康情况，避免因为GBS引起的胎膜早破，羊膜腔感染和产褥感染等
B族链球菌筛查
蔄日明—生物梅里埃 amy.man@
什么是GBS？
B族链球菌（GBS）/无乳链球菌，兼性厌氧菌， 革兰阳性球菌，单个、成双、链状排列、长短不一
正常寄居于阴道和直肠，它是一种条件致病菌，围产 期妇女在分娩过程中，新生儿在通过产道时可被感染。
在血琼脂平板上35 ℃培养18 ~ 24 h ，形成灰白色、表面光滑、有乳光、 圆形、β溶血的菌落，部分菌株无β溶血环
11
B链培养基使用方法
采样
阴道口1 / 3
肛门括约肌2~5cm
孕妇：先檫去外阴分泌物，将1根无菌阴道拭子放入阴道下1/3内，旋 转1周采取阴道分泌物，再使用1根棉拭子插入肛门，在肛门括约肌上 2-3cm处轻轻旋转取得直肠分泌物
新生儿：无菌棉拭子在新生儿鼻腔，咽部旋转1周取分泌物。脑脊液、 血液、痰液亦可
可检测样本
阴道直肠拭子；尿液；新 生儿胃吸出物等
阴道直肠拭子
血清，血浆等
孕妇筛查适用样本为阴道直肠拭子
检测时间 18-24小时
2小时
2小时
虽然PCR和免疫学方法有速度优势， 但对于筛查的病人，并不急于诊断， 所以实验室和临床可以接受培养相对 较慢的速度
用户成本 较低
较高
？
一般收费 60-80
60-100
12
* 新生儿消化胃液在国外临床实验中为有效样本类型
B链培养基使用方法
接种 读取结果
使用选择性增菌液，可显著提高 阳性率，避免50%的GBS携带者 出现假阴性结果(US-CDC2010)
Todd-Hewitt增菌肉 汤（18-24h）
接种到Strepto产色培 养基（避光18-24h）
（有氧，37℃）
70年代美国新生儿GBS感染的发病率是(2～3) /1000活产婴,病死率大于 50%。90年代以来,美国的产前抗生素预防策略使GBS感染的发病率和病 死率均有所降低,其中新生儿早发型GBS感染的发病率下降了70% ,但在 晚发型却没有明显变化。
CDC与其他机构共同制定了《围产期B族 链球菌感染筛查及防治指南》，并于 2002年和2010年进行了修改，发病率从 90年代早期1.7/1000个新生儿降低到了 近些年的0.34-0.37/1000个新生儿。
ELISA:30-60 胶体金：10-20
9
chromID StreptoB B链筛查培养基&增菌液
chromID StreptoB（43461-86） B族链球菌筛查培养基
上海生产 筛查临床样本中孕产妇B族链球菌携带情况。
➢ Todd Hewitt broth + antibiotics（42116） B族链球菌增菌肉汤
无乳链球菌 ATCC 12386 + 白色念珠菌 ATCC 10231
实验室实物拍摄
14
颜色典型，清晰明确的判读结果（临床标本）
血平板
需透光观察 少小菌落易漏诊
非溶血B链无法观测
StreptoB 产色平板
颜色典型，清晰可辨 所有的B链均可被检出：
无论是否具有溶血性
15
增菌液的必要性和色素增菌液的缺陷