最新南京大学分子生物学第24讲

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（二）真核生物的增强子
1，增强子的特点 2，构成增强子的基本单元（以SV40为
例） （1）72bp正向重复序列 （2）增强子成分
（3）增强子元
3，增强子的组织结构及作用机制
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University （1）增强子元水平上的二元组织方 式
（2）增强子成分水平上的二元组织 方式
（3）增强子所包含的两个水平上的 二元组织方式的意义
（4）增强子的远程作用
４，增强子的种类
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University （１）细胞特异性增强子
（２）诱导性增强子
5，启动子和增强子的相似性
（1）作用机理的相似性
（2）DNA序列及反式作用因子的相似性
（3）启动子和增强子的功能相似性
（三）沉默子 Nanjing
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二、基因调控的顺式作用成分 （一）启动子： Nanjing
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1，TATA框 2，上游启动子成分（UPE）： 主要控制转录起始频率 （1）CCAAT框 （CCAAT box） （2）GC框（GC box） （3）UPE的作用特点
UNniavnejrinsigt调y 控因子 应答元件 DNA序列 结合蛋白 • 热休克 HSE CNNGAANNTCCNNG HSF
• 糖皮质 GRE TGGTACAAATGTTCT 受体
•镉
MRE CGNCCCGGNCNC ？
• 佛波酯 TRE TGACTCA
AP1
• 血清
SRE CCATATTAGG
（2）常见的应答元件有：热休克应
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University 答元件（heat shock response element，HSE），糖皮质应答元件 （glucocorticoid response element，GRE），金属应答元件 （metal response element，MRE） 等
• 随着温度降低，细胞内出现大量游离 的Hsp70，它们与HSF结合，并使皮质等对金属硫蛋白基因的多
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重调控 University
•金属硫蛋白（metallothionein， MT）：是细胞内多余重金属离子的
螯合蛋白，其基因的5’端调控区
（四）RNA聚合酶III及其下游启
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University 动区结合蛋白 1，TFIII A
2，TFIII B
2，TFIII C
Nanjing（五）其他转录因子
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1，概况
（1）应答元件：能与某个（类） 专一蛋白因子结合，从而控制基 因特异表达的DNA上游序列称为应 答元件
Nanjing（三）CCAAT框结合蛋白 University 1， CCAAT框多数是单独起作用的
2， CCAAT框结合蛋白
• 包括CTF，腺病毒核因子NF-1，NF-Y等 3， CTF与NF－1是同一种蛋白
• CTF（NF－1）的双重作用：既是转录 因子，又是腺病毒DNA复制所必需的
4，CTF（NF－1）的作用无组织特异性
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（silencer）
1，作用 2，特点
（四）转座元
三、基因调控的反式作用因子
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University （一）TATA框结合蛋白 1，一般性启动子
2，RNA聚合酶II起始基因
转录所必需的4种辅助蛋白
因子
Nanjing（二）GC框结合蛋白
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1，SP1的特征
（1）是1.05×105的蛋白质单体
（2）结合位点：能与DNA双链中一条链 上包括GGGCGG在内约20bp的序列特异 结合。结合于GC框的大沟中，各SP1均 位于DNA双螺旋的同一侧
Nanjing （3）可以提高转录效率
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10~25倍 （4）作用是双向的 （5）作用无组织特异性
含有多个调控元件，可以同时受几
种转录因子的影响。
• 该基因平时就有本底水平的表达，还能
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• 人MT基因5’上游-40~-160处有4个MRE， 是金属离子诱导转录所必需的
• 位于MT基因5’上游-240~-260处有GRE， 是固醇类激素受体的结合位点
南京大学分子生物学第 24讲
2，甲基化DNA的结合蛋白
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3，DNA甲基化的转录抑制
（1）哺乳动物以CpG甲基化程 度为标准的启动子分类
A，CpG岛启动子
B，组织特异性启动子
（2） DNA甲基化与基因表达活 性的负相关性
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SRF
2，热休克因子HSF
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（1）热休克基因和热休克因子
• 许多生物受热诱导，能合成一系列热 休克蛋白（heat shock protein）。
• 如：受热后，热休克因子（heat shock facote，HSF）与hsp70基因 TATA框上游60bp处的HSE结合，激发转 录起始，可使果蝇体内Hsp70mRNA水平 提高1000倍。
4，激素及其影响
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University •许多类固醇激素及一些代谢激素的 调控作用是通过促进转录而实现的
Nanjing 2，不同基因启动子的GC框
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（1）具GC框的基因
•猿猴病毒SV40的早、晚期 基因，金属硫蛋白，ADP核
糖基转移酶等
Nanjing（2）不同基因GC框的数量、位
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置、排列方向不同（图9-16）
（3）GC框的一致序列
G T
GGGCGG
GGC AAT
Nanjing （2）HSF的作用机制
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•HSF平时以单体形式存在，没有 DNA结合能力。Hsp70可能参与了
HSF的单体形式的维持
•热休克时，细胞内变性蛋白增多， 并与Hsp70结合，HSF被释放
• 同时， HSF被迅速磷酸化，并形成三
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University 体，具有与HSE特异结合的能力，引 起包括hsp70在内的许多热休克基因 表达