生化检测中的影响因素培训课件

• 溶血的干扰机理有以下三种：一是血细胞中高浓度组分逸出，使测定 结果增高,血细胞内浓度比血浆中浓度明显高的物质有LDH、ACP、 AST、K+，只要轻微溶血就可以对这些项目产生很大影响。另外若某 些物质的血细胞内浓度低于血清浓度时，则溶血相当于血清被稀释， 因而使这些血清成分特别是发生重度溶血时的检测值降低，这类项目 主要有Ca2+、Na+、Cl-、UA等。二是血细胞成分进入血清中后因化 学反应而引起其他物质的浓度改变，如溶血后红细胞的磷脂进入血清 被血清中的磷酸酯酶水解，其结果造成血清无机磷浓度显著增高。三 是血红蛋白本身颜色对检测的光学干扰，血红蛋白的颜色在431nm和 555nm波长附近能使比色、比浊法的吸光度增高，如溶血引起重氮单 试剂法胆红素测定结果明显升高。实际上，以上三类干扰在溶血标本 中同时存在并可相互作用，因而使受影响的检项更为复杂，这在超微 量、高精度和多指标的检测分析中显然不可忽视，因此，严控标本溶 血是保证检验质量的重要方面。
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• ６.2脂血对生化检测的干扰:血液脂浊可散
射光线，所以对吸光度一般产生正向干扰， 导致某些项目如ALB、UA、总蛋白（TP） [23]等测定结果。而在pH10以上的环境中， 乳糜中的TG会皂化可使血清逐渐变清，使 许多比色法测定如Ca2+、Cr、ALP、TP等 结果产生负误差。
量、技术含量等常有区别，有时即使同一厂家不 同批号的同种试剂因原料来源、纯度不同以及生 产条件变动，会产生批间变异。同一批号的同种 试剂盒在储存、运输时的情况有所不同，性能也 可能发生变化。同项目试剂盒之间作比较，如果 稳定性好、线性范围宽、正向型试剂空白吸光度 低、反向型试剂空白吸光度高、试剂空白速率低、 瓶间差小者可视为优质试剂。
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• 6.3 黄疸 胆红素对反应结果产生黄色化合物的比色分析影 响很大，一般可以用样本空白或两点比色法、连续监测法 来消除胆红素对黄色结果的影响，但由于胆红素不稳定， 随着胆红素被氧化为胆绿素、胆褐素而变色，此时如果使 用两点法、连续监测法同样也不能排除胆红素对结果的干 扰。此外胆红素作为一种还原剂对氧化反应有干扰，如氧 化酶法测定GLU、TG、UA、胆固醇等，因为胆红素可以 与上述过程中H2O2分解产生的新生态氧发生反应，从而 使新生态氧与氧化酶法反应中的色源物质结合减少，导致 结果偏低。此时也可用双波长法或设计样本空白消除干扰， 亦或当外观检查发现是黄疸血清时可先除蛋白，然后加胆 红素氧化酶预先将胆红素氧化成较稳定的氧化产物胆褐素， 可大大减低甚至消除胆红素的干扰。
生化检测中的影响因 素
检测前的影响因素
一、 标本的因素
• 1. 生理因素对生化检验结果的影响 影响 检验结果的生理因素可分为可控因素和不 可控因素两种类型。主要有年龄、性别、 运动、情绪、体位改变、生活方式、妊娠、 季节变化、海拔高度、生理性波动等.
• 2.饮食对生化检验结果的影响
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• 3.药物对生化检验结果的影响 药物引起生化检
验结果出现误差的原因可分为物理干扰和化学干扰，物理 干扰是由于药物进入体内后使血清的物理性质如颜色等发 生变化进而影响某些项目的检测，而化学干扰是由于药物 本身的化学性质如药物的强还原性等对体内某些物质测定 的影响。此外，许多药物的副作用使肝、肾功能发生改变 而引起检验结果异常。值得注意的是长期静脉点滴的病人 留取标本时可使标本稀释，造成某些项目结果偏低，又因 静点时高浓度的药物进入标本中，使许多检验结果发生巨 大变化。因此护理人员应避免在静点时和用药4h以内采取 检验标本，必要时停药后再查，以防药物的干扰作用。
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• 二、环境的因素 包括生化分析仪的用水、 电源以及环境的温湿度等方面对生化检测 的结果都会产生影响。
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分析中因素
• 确立测定系统的概念 测定系统包括测定 原理、试剂、仪器、校准品四要素。对于
一个临床检测项目，如果所用方法的测定
原理、试剂、仪器、校准品中任何一个不
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关于酶活性测定校准问题
常用K值有以下几种： a) 理论K值：根据理论摩尔消光系数（ε）来计算，如NADH
为6.22×103 b) 实测K值：由于仪器波长的精密及半宽度不同，而应根据
实测ε值来设定K值 c) 厂家给的K值：厂家生产试剂盒说明书上提供的K值（有
定试剂，对硝基苯酚标准液作为血清标本， 实际测定405nm的吸光度值，根据对硝基苯 酚的浓度可计算ε值。
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• 检测方法的选择 不同的检测方法对检测结果的影 响是不言而预的,我们应优先选择国际、国内，行 业内权威机构推荐的方法，没有推荐常规方法的， 应该选择公认的测定方法。
• 试剂的影响 • 生 化 试剂盒有许多生产厂家，不同厂家产品的质
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校准品（Calibrationmaterials）含有已知量的 欲测物，用以校准该测定方法的数值，它与 该方法及试剂、仪器是相关联的。校准品的 作用是为了减少或消除仪器、试剂等造成的 系统误差。 在全自动生化分析仪上使用配套的试剂和标 准品，各仪器厂家均有自己的标准测定系统, 对于校准品不能乱用。
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• 4.标本采集对生化检验结果的影响
• 5.标本处理、储存对生化检验结果的影响
标本的离心速度、时间,离心前放置的时间、 以及标本贮存的温度、时间等都会对生化 检测结果产生影响。
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• 6.标本状态对生化检验结果的影响
• 6.1 溶血 溶血是临床生化检验中最常见的一种影响因素，它能引起很 多指ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ明显异常。
同，都可能得到不同的测定结果。如果我
们想要得到准确可靠的测定结果，而该结
果又具有与国际、国内其他实验室的可比 性，应该自己建立一个标准测定系统。
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• 用已糖激酶（HK）法则定葡萄糖标准液时， 葡萄糖的消耗与NADH的生成是等摩尔关系， 校准生化分析仪340nm处NAD(P)H的摩尔吸 光系数。可用ALP测定试剂的缓冲液作为测