第二章中药化学成分提取、分离和鉴定的一般方法
第二章中药化学成分的一般研究方法
亲脂性有机溶剂：CHCl3、Et2O、Ben、Et2OAc
水(H2O) 甲醇(MeOH)
常用溶剂极性
乙醇(EtOH)
极性大
丙酮（Me2CO） 正丁醇(n-BuOH)
乙酸乙酯(EtOAc) 乙醚(Et2O) 氯仿(CHCl3 ) 苯（C6H6)
四氯化碳(CCl4) 正己烷≈石油醚(Pet.et)
乳化层分离出，长时 间放置
加热破坏乳化层 用滤纸自然过滤
逆流分溶法（CCD）
液滴逆流色谱（DCCC） 液滴逆流色谱
沉淀法
有效成分 ＋ 沉淀剂
杂质
有效成分 杂质溶解 杂质 有效成分溶解
水/醇法（除去糖、蛋白质等水溶性杂质） 沉淀剂：乙醇 醇/水法（除去树脂、叶绿素水不溶性杂质）
醇/醚法（沉淀皂苷成分与脂溶性杂质分离）
100 >β>10 则10~12次分离
β≤2
100次以上分离
β≈1
KA≈ KB，两者性质及其相近无法分离
分离因子β越大，分离效率越高
萃取条件选择：
在一定温度下，两种溶液 不互溶，振摇分层 若所要成分为亲水性物质
水 弱亲水性有机溶剂
若所要成分为脂溶性物质
水 有机溶剂：氯仿、乙醚
乳化现象处理方法：
N + OH OMe
MeO MeO
OMe
N OMe OMe
小檗碱
延胡索乙素
HO
O
OH OH
OH OH
（+）表儿茶素
极性分类
中性成分
强心苷、皂苷 （甾体）
酸性成分 黄酮、蒽醌、香豆素、 有机酸、鞣质
碱性成分 生物碱
天然药物化学-第二章-天然药物化学成分提取分离和鉴定的方法和技术-PPT
1. 溶解度的差异：如结晶法、沉淀法等
2. 分配比不同：如萃取法
3. 吸附性差异：物理吸附、化学吸附及半化学吸附
4.分子大小差异：透析法、凝胶滤过法、超滤法
5.离解程度不同：离子交换法或电泳
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一、根据物质溶解度的差异进行分离
1.系统溶剂提取法：是研究天然药物成分的初步提取分
离方法。用极性从低到高的溶剂依次提取。
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操作：现将中草药粉或碎片装入适当的容器中， 然后加入适宜的溶剂，浸渍药材以溶出其中有效 成分。
特点：简单易行，但提出率较低。最好采用二次、 三次浸渍，以减少损失，提高提取率。如果溶剂 为水的话，需加入适当的防腐剂。
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(2)渗漉法 操作：将中草药粉末装在渗漉器中使药材浸渍
24~48小时膨胀，然后不断添加新溶剂，使其自上而 下渗过药粉，从渗漉筒下端出口流出、收集浸出液。
与水不能互溶的有机溶剂，如石油醚、苯、氯 仿、乙醚等。这些溶剂的选择性能强，不能或不容 易提出亲水性杂质，易提取亲脂性的物质。
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这类溶剂易挥发，多易燃（氯仿除外），一般有毒， 价格较贵，设备要求也较高，操作需要有通风设备； 透入植物组织的能力较弱，往往需要长时间反复提取 才能提取完全。药材中水分的存在，会降低这类溶剂 的穿透力，很难浸出其有效成分，影响提取率，因此 对原料的干燥程度要求较高。
（1）药材的粉碎度
药材粉碎得越细，中药粉末的表面积越大，提取效率 高，但粉碎过细，则表面吸附作用也增强，反而影响 扩散速度，降低了提取效率，另一方面，杂质的提取 量也增高 。一般情况下，用有机溶剂提取时，以过
20目筛为宜。用水提取时，则用粗粉或薄片。
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《中药化学》讲义：中药有效成分的提取与分离(重点)
《中药化学》讲义：中药有效成分的提取与分别(要点)一、中药有效成分的提取( 一) 提取观点：采纳一种方法，使中药里面有效的成分与无效的成分分开。
( 二) 提取方法：1.溶剂提取法：选择一个合适的溶剂将中药里面的有效成分提取出来。
(1)常用提取溶剂：石油醚、正己烷、环己烷、苯、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、乙醇、甲醇、水。
( 极性小→极性大 )(2)提取溶剂的特别性质：石油醚：是混淆型的物质 ; 氯仿：比重要于水 ; 乙醚：沸点很低 ; 正丁醇：沸点大于水。
①亲脂型溶剂与亲水型溶剂：石油醚、正己烷、环己烷、苯、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇与水混淆以后会分层，称为亲脂型溶剂 ; 丙酮、乙醇、甲醇与水混淆以后不分层，称为亲水型溶剂。
②不同溶剂的符号。
(3)选择溶剂：不同成分因为分子构造的差异，所表现出的极性不同样，在提取不同级性成分的时候，对溶剂的要求也不同样。
1)物质极性大小原则：①含 C越多，极性越小 ; 含 O越多，极性越大。
②在含 O的化合物中，极性的大小与含O的官能团相关：含 O官能团所表现出的极性越大，此化合物的极性越大。
③与存在状态相关：游离型极性小; 解离型 ( 联合型 ) 极性大。
2)选择溶剂原则：相像相溶(4)提取方法：1)浸渍法：不用加热，合用于热不稳固化学成分，或含有大批淀粉、树胶、果胶、粘液质的成分提取。
弊端：效率低、时间长。
2)渗漉法：不用加热，弊端：溶剂耗费量大、时间长3)煎煮法：使用溶剂为水，合用于热稳固的药材的提取。
弊端：不是用于含有挥发性或淀粉许多的成分的提取 ; 不可以使用有机溶剂提取。
4)回流提取法与连续回流提取法：使用溶剂为有机溶剂。
回流提取法有机溶剂耗费量大 ; 连续回流提取法溶剂耗费量少，节俭了溶剂，弊端：加热时间长，对热不稳固的成分在使用此法时要十分当心。
5)超声波提取法：提取效率高 ; 对有效成分构造损坏比较小。
6)超临界流体萃取法： CO2萃取。
特色：①不残留有机溶剂，萃取速度快、收率高，工艺流程简单、操作方便。
第二章中药材及其制剂分析的一般步骤
第二章中药材及其制剂分析的一般步骤中药材及其制剂的化学成分是相当复杂的，包括各种类型的无机物和有机物。
其中某些成分有生理活性，有些无活性，亦有的有毒副作用，这些成分共存于同一体系中，特别是复方制剂，各成分之间存在着相互间的作用和变化，这就使中药药物分析面临着十分艰巨的任务，所以对复杂混合体系的分析是共特点一般例行分析中，中药药物分析中，中药分析的一般步骤为：取样→样品制备→鉴别→检查→含量测定→第一节分析样品的制备一、取样及处理中药药物在分析测试之前，首先是取样和样品备，供试样品必须具有代表性、真实性、均匀合理。
一般的应从每个包装的四角及中央五处取样。
深度达1/3~2/3处，取得的样品装入清洁、干燥、具有磨口的容器中或塑料袋中，并标上品名、批次、取样日期、取样人等。
取样人员应熟悉各类中药及其制剂的理化性质，对外观性状已发生变化者，应分别取样，装入不同的容器中。
各类分析样品取样大致如下：1中药材：中药材样品要自然干燥，粉碎，、过筛、粒度在80-100目，按四分法混合均匀。
根据Q=kd2的经验公式取出三份样品，即供试样品，送检样品，保存样品各100g,取样量原则上至少应满足三次分析实验用。
贵重药材可酌情取样Q=kd2式中：Q——应取试样的最低量（kg）k——实验因, 随物质而定，其数值介于0.1-0.5之间d——样品最大颗粒的直径（mm）例 1 有一试样，其为k为0.2，最大颗粒直径为1mm，则取样量为：Q=kd2=0.2×12=0.2kg=200g.若研细至d=0.14mm，则Q=0.2×0.142=3.9g此式反映了最低取样量与物料颗粒细度有关。
即颗粒愈粗，应取样量愈大。
根据我国1985年由中国医药工业公司从实际生产出发，制定的《药品生产管理规范实施指南》规定的“质量管理”为第二项规定抽样办法：凡原辅料总件数（桶、箱等）n≤3时，每件分别抽样；n≤300时，抽样量为n+1；n>300时，抽样量为 n +1。
第二章天然药物化学成分的提取分离和鉴定方法
第二章天然药物化学成分的提取分离和鉴定方法天然药物是指从天然植物、动物和微生物等生物体中提取的具有药用功效的物质。
天然药物的有效成分往往存在于复杂的混合物中，因此需要进行提取、分离和鉴定的过程来获得纯净的有效成分。
本文将从天然药物的提取方法、分离方法和鉴定方法三个方面进行介绍。
天然药物的提取方法是指将药材中的有效成分从原料中提取出来的过程。
不同的药材会有不同的提取方法，常见的提取方法包括浸提法、水蒸气蒸馏法、超声波提取法等。
浸提法是指将药材浸泡在溶剂中，通过溶剂与药材中有效成分的物理性质的相互作用，实现有效成分的迁移。
水蒸气蒸馏法是指利用水蒸气的渗透性质，将药材中的有效成分转化为挥发性的物质，并通过冷凝、分离的方式提取。
超声波提取法是通过超声波的作用，增加药材中的有效成分与溶剂间的传质速度，从而实现有效成分的高效提取。
不同的提取方法具有各自的优缺点，选择合适的提取方法需要考虑到药材的性质、需求的有效成分和实验室条件等因素。
天然药物的分离方法是指通过各种物理和化学手段将复杂的混合物分离成单一的化合物的过程。
常见的分离方法包括色谱法、重结晶法、萃取法等。
色谱法是利用化学成分在固定相和移动相间相互传质速度不同的特点，实现化合物的分离。
常用的色谱方法包括薄层色谱、柱层析、高效液相色谱和气相色谱等。
重结晶法是指通过物质在溶剂中的溶解度差异，实现物质的分离纯化。
萃取法是通过溶剂对混合物中一些成分的选择性溶解作用，实现有效成分的分离。
分离方法的选择需要根据药材中的有效成分的性质和目标物质的纯度要求等因素进行考虑。
天然药物的鉴定方法是指通过化学、生物学和药理学等手段对提取和分离得到的物质进行鉴定的过程。
化学鉴定方法主要包括红外光谱法、质谱法和核磁共振法等。
红外光谱法可以通过检测分子中的特定化学键来鉴定化合物的结构。
质谱法可以通过检测分子中的质量与电荷比，推测出化合物的分子量和分子结构。
核磁共振法可以通过检测分子中的核自旋来鉴定化合物的结构。
中药化学实验集中提取方法注意事项及操作
第二章中药有效成分的提取与分离《中药化学》考前辅导大纲表1 溶剂提取法利用溶剂法提取时，要从化学成分及溶剂两方面来理解方法的原理与应用，因此要熟悉主要化学类型成分的极性、溶解性及特点，这部分内容请参看表2-4。
根据相似相溶原则选择提取溶剂，相似指的是结构或极性相似，即所选溶剂的极性要与所提取成分的极性相似。
常见溶剂的极性大小顺序是：水＞乙醇、甲醇、丙酮＞丁醇＞乙酸乙酯＞氯仿＞乙醚＞苯＞环己烷＞石油醚（注意：丁醇和其后的溶剂与水不完全混溶）。
根据选择的溶剂以及成分的特点，选择提取方法。
如含淀粉较多的药材不宜用水煎煮法提取、含挥发性成分的药材不宜用煎煮法提取、亲脂性成分多用有机溶剂提取故采用回流或连续回流提取法。
水蒸气蒸馏法具有挥发性，热稳定性和水不溶性的成分可选用该法。
升华法具升华性的成分选用该法。
分离与纯化一般是利用物质的溶解度、官能团性质及极性特点进行化合物的分离与纯化，常用方法见表2。
表2 中药化学成分分离纯化常用方法·pH梯度萃取法pH梯度萃取法适合于酸性强弱不同的游离的黄酮类化合物的分离，将混合物溶于有机溶剂（如乙醚）中，依次用5％NaHCO3（萃取出7，4′－二羟基黄酮）、5％Na2CO3（萃取出7－或4′－羟基黄酮）、0.2％NaOH（萃取出具一般酚羟基黄酮）、4％NaOH（萃取出5－羟基黄酮）萃取而使之分离。
分离操作①装柱色谱柱的装填有干装和湿装两种方法。
干装时先在柱底塞上少许玻璃纤维再加入一些细粒石英砂然后将准备好的吸附剂用漏斗慢慢加入干燥的色谱柱中边加入边敲击柱身务必使吸附剂装填均匀 不能有空隙。
吸附剂用量应是被分离混合物量的3040倍必要时可多达100倍。
加够以后在吸附剂上覆盖少许石英砂。
湿装时将准备好的吸附剂用适量展开剂调成可流动的糊如干装时一样准备好色谱柱将吸附剂糊小心地慢慢加入柱中加入时不停敲击柱身务必使吸附剂装填均匀不能有气泡和裂隙还必须使吸附剂始终被展开剂覆盖。
中药化学成分的提取和分离方法研究
中药化学成分的提取和分离方法研究中药是中国传统的珍贵瑰宝，其中蕴含着丰富的化学成分。
中药的药效往往来自于其丰富的化学成分，因此，提取和分离中药中的有效成分成为了中药学研究的重点。
在这篇文章中，我们将探讨中药化学成分的提取和分离方法研究，介绍当前常见的提取和分离方法，并探讨这些方法的优缺点以及应用范围。
一、中药化学成分的提取方法1. 水提法水提法是最常见的中药提取方法之一。
这种方法利用水溶性化合物在水中的溶解度来提取中药中的有效成分。
被提取的药材先用水浸泡，然后将水和浸泡药材一起加热，使水中的药效成分提取到水中。
水提法优点是提取过程简单、易于控制，同时溶解性好的成分可以得到很好的提取，缺点是对于含有脂溶性化合物的药材，提取效果不理想。
2. 乙醇提法乙醇提法是运用酒精的溶剂作用将中药中的有效成分提取出来的方法。
这种方法适用于多种药材中成分的提取，但对脂溶性成分的提取效果不佳。
此外，由于乙醇是一种有毒有害化合物，对于提取到的药效成分，需要进行后续的纯化处理。
3. 甲醇提法与乙醇提法类似，甲醇提法同样是利用甲醇溶解中药中的有效成分的提取方法。
与乙醇相比，甲醇的溶解能力更为强，但同样存在有毒有害性的问题。
二、中药化学成分的分离方法1. 溶剂萃取法溶剂萃取法是利用不同化合物在不同的溶剂中的溶解度不同，进行分离的一种方法。
常用的溶剂包括乙醇、丙酮、甲酸乙酯等，同时也可以使用超临界流体萃取法对药材进行萃取。
溶剂萃取法的优点是操作简单，适用于对大分子化合物的分离。
但离心过程可能会破坏药效成分的结构，因此需要注意离心速度和时间。
2. 薄层色谱法薄层色谱法是利用不同化合物在固定相和流动相之间的不同分配系数进行分离的一种方法。
这种方法常用的固定相是硅胶或纤维素等，而流动相则可以是醋酸乙酯、正己烷、乙酸甲酯等。
薄层色谱法的优点是对于化学成分不明确的药材同样有效，分辨效果好，同时操作简单，常用于中药提取和分离。
3. 高效液相色谱法高效液相色谱法是利用色谱柱固定相和溶液相之间的相互作用来进行分离的方法，可以对中药中的成分进行高效率、高分辨率的分离。
中药化学成分提取分离和鉴定的方法
中药化学成分提取、分离和鉴定的方法一溶剂提取法：1．溶剂提取法的原理：溶剂提取法是根据中草药中各种成分在溶剂中的溶解性质,选用对活性成分溶解度大,对不需要溶出成分溶解度小的溶剂,而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法;当溶剂加到中草药原料需适当粉碎中时,溶剂由于扩散、渗透作用逐渐通过细胞壁透入到细胞内,溶解了可溶性物质,而造成细胞内外的浓度差,于是细胞内的浓溶液不断向外扩散,溶剂又不断进入药材组织细胞中,如此多次往返,直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡时,将此饱和溶液滤出,继续多次加入新溶剂,就可以把所需要的成分近于完全溶出或大部溶出;中草药成分在溶剂中的溶解度直接与溶剂性质有关;溶剂可分为水、亲本性有机溶剂及亲脂性有机溶剂,被溶解物质也有亲水性及亲脂性的不同;有机化合物分子结构中亲水性基团多,其极性大而疏于油；有的亲水性基团少,其;极性小而疏于水;这种亲水性、亲脂性及其程度的大小,是和化合物的分子结构直接相关;一般来说,两种基本母核相同的成分,其分子中功能基的极性越大,或极性功能基数量越多,则整个分子的极性大,亲水性强,而亲脂性就越弱,其分子非极性部分越大,或碳键越长,则极性小,亲脂性强,而亲水性就越弱;各类溶剂的性质,同样也与其分子结构有关;例如甲醇、乙醇是亲水性比较强的溶剂,它们的分子比较小,有羟基存在,与水的结构很近似,所以能够和水任意混合;丁醇和戊醇分子中虽都有羟基,保持和水有相似处,但分子逐渐地加大,与水性质也就逐渐疏远;所以它们能彼此部分互溶,在它们互溶达到饱和状态之后,丁醇或戊醇都能与水分层;氯仿、苯和石油醚是烃类或氯烃衍生物,分子中没有氧,属于亲脂性强的溶剂;这样,我们就可以通过时中草药成分结构分析,去估计它们的此类性质和选用的溶剂;例如葡萄糖、蔗糖等分子比较小的多羟基化合物,具有强亲水性,极易溶于水,就是在亲水性比较强的乙醇中也难于溶解;淀粉虽然羟基数目多,但分子大大,所以难溶解于水;蛋白质和氨基酸都是酸碱两性化合物,有一定程度的极性,所以能溶于水,不溶于或难溶子有机溶剂;甙类都比其甙元的亲水性强,特别是皂甙由于它们的分子中往往结合有多数糖分子,羟基数目多,能表现出较强的亲水性,而皂甙元则属于亲脂性强的化合物;多数游离的生物碱是亲脂性化合物,与酸结合成盐后,能够离子化,加强了极性,就变为亲水的注质,这些生物碱可称为半极性化合物;所以,生物碱的盐类易溶于水,不溶或难溶于有机溶剂；而多数游离的生物碱不溶或难溶于水,易溶于亲脂性溶剂,一般以在氯仿中溶解度最大;鞣质是多羟基的化台物,为亲水性的物质;油脂、挥发油、蜡、脂溶性色素都是强亲脂性的成分;总的说来,只要中草药成分的亲水性和亲脂性与溶剂的此项性质相当,就会在其中有较大的溶解度,即所谓“相似相溶”的规律;这是选择适当溶剂自中草药中提取所需要成分的依据之一;2．溶剂的选择：运用溶剂提取法的关键,是选择适当的溶剂;溶剂选择适当,就可以比较顺利地将需要的成分提取出来;选择溶剂要注意以下三点：①溶剂对有效成分溶解度大,对杂质溶解度小；②溶剂不能与中药的成分起化学变化；③溶剂要经济、易得、使用安全等;常见的提取溶剂可分为以下三类：1水：水是一种强的极性溶剂;中草药中亲水性的成分,如无机盐、糖类、分子不太大的多糖类、鞣质、氨基酸、蛋白质、有机酸盐、生物碱盐及甙类等都能被水溶出;为了增加某些成分的溶解度,也常采用酸水及碱水作为提取溶剂;酸水提取,可使生物碱与酸生成盐类而溶出,碱水提取可使有机酸、黄酮、蒽醌、内酯、香豆素以及酚类成分溶出;但用水提取易酶解甙类成分,且易霉坏变质;某些含果胶、粘液质类成分的中草药,其水提取液常常很难过滤;沸水提取时,中草药中的淀粉可被糊化,而增加过滤的困难;故含淀粉量多的中草药,不宜磨成细粉后加水煎煮;中药传统用的汤剂,多用中药饮片直火煎煮,加温可以增大中药成分的溶解度外,还可能有与其他成分产生“助溶”现象,增加了一些水中溶解度小的、亲脂性强的成分的溶解度;但多数亲脂性成分在沸水中的溶解度是不大的,既使有助溶现象存在,也不容易提取完全;如果应用大量水煎煮,就会增加蒸发浓缩时的困难,且会溶出大量杂质,给进一步分离提纯带来麻烦;中草药水提取液中含有皂甙及粘液质类成分,在减压浓缩时,还会产生大量泡沫,造成浓缩的困难;通常可在蒸馏器上装置一个汽一液分离防溅球加以克服,工业上则常用薄膜浓缩装置;2亲水性的有机溶剂：也就是一般所说的与水能混溶的有机溶剂,如乙醇酒精、甲醇木精、丙酮等,以乙醇最常用;乙醇的溶解性能比较好,对中草药细胞的穿透能力较强;亲水性的成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和部分多糖等外,大多能在乙醇中溶解;难溶于水的亲脂性成分,在乙醇中的溶解度也较大;还可以根据被提取物质的性质,采用不同浓度的乙醇进行提取;用乙醇提取比用水量较少,提取时间短,溶解出的水溶性杂质也少;乙醇为有机溶剂,虽易燃,但毒性小,价格便宜,来源方便,有一定设备即可回收反复使用,而且乙醇的提取液不易发霉变质;由于这些原因,用乙醇提取的方法是历来最常用的方法之一;甲醇的性质和乙醇相似,沸点较低64℃,但有毒性,使用时应注意;3亲脂性的有机溶剂：也就是一般所说的与水不能混溶的有机溶剂,如石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷等;这些溶剂的选择性能强,不能或不容易提出亲水性杂质;但这类溶剂挥发性大,多易燃氯仿除外,一般有毒,价格较贵,设备要求较高,且它们透入植物组织的能力较弱,往往需要长时间反复提取才能提取完全;如果药材中含有较多的水分,用这类溶剂就很难浸出其有效成分,因此,大量提取中草药原料时,直接应用这类溶剂有一定的局限性;3．提取方法：用溶剂提取中草药成分,、常用浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法及连续回流提取法等;同时,原料的粉碎度、提取时间、提取温度、设备条件等因素也都能影响提取效率,必须加以考虑;1浸渍法：浸渍法系将中草药粉末或碎块装人适当的容器中,加入适宜的溶剂如乙醇、稀醇或水,浸渍药材以溶出其中成分的方法;本法比较简单易行,但浸出率较差,且如用水为溶剂,其提取液易于发霉变质须注意加入适当的防腐剂;2渗漉法：渗漉法是将中草药粉末装在渗漉器中,不断添加新溶剂,使其渗透过药材,自上而下从渗漉器下部流出浸出液的一种浸出方法小当溶剂渗进药粉溶出成分比重加大而向下移动时,上层的溶液或稀浸液便置换其位置,造成良好的浓度差,使扩散能较好地进行,故浸出效果优于浸渍法;但应控制流速,在渗渡过程中随时自药面上补充新溶剂,使药材中有效成分充分浸出为止;或当渗滴液颜色极浅或渗涌液的体积相当于：原药材重的10倍时,便可认为基本上已提取完全;在大量生产中常将收集的稀渗淮液作为另一批新原料的溶剂之用;3煎煮法：煎煮法是我国最早使用的传统的浸出方法;所用容器一般为陶器、砂罐或铜制、搪瓷器皿,不宜用铁锅,以免药液变色;直火加热时最好时常搅拌,以免局部药材受热太高,容易焦糊;有蒸汽加热设备的药厂,多采用大反应锅、大铜锅、大木桶,或水泥砌的池子中通入蒸汽加热;还可将数个煎煮器通过管道互相连接,进行连续煎浸;4回流提取法：应用有机溶剂加热提取,需采用回流加热装置,以免溶剂挥发损失;小量操作时,可在圆底烧瓶上连接回流冷凝器;瓶内装药材约为容量的％～％,溶剂浸过药材表面约1～2cm;在水浴中加热回流,一般保持沸腾约：小时小放冷过滤,再在药渣中加溶剂,作第二、三次加热回流分别约半小时,或至基本提尽有效成分为止;此法提取效率较冷浸法高,大量生产中多采用连续提取法;5动连续提取法：应用挥发性有机溶剂提取中草药有效成分,不论小型实验或大型生产,均以连续提取法为好,而且需用溶剂量较少,提取成分也较完全;实验室常用脂肪提取器或称索氏提取器;连续提取法,一般需数小时才能提取完全;提取成分受热时间较长,遇热不稳定易变化的成分不宜采用此法;二水蒸气蒸馏法：;水蒸气蒸馏法,适用于能随水蒸气蒸馏而不被破坏的中草药成分的提取;此类成分的沸点多在100℃以上,与水不相混溶或仅微溶,且在约100℃时存一定的蒸气压;当与水在一起加热时,其蒸气压和水的蒸气压总和为一个大气压时,液体就开始沸腾,水蒸气将挥发性物质一并带出;例如中草药中的挥发油,某些小分子生物碱一麻黄碱、萧碱、槟榔碱,以及某些小分子的酚性物质;牡丹酚paeonol等,都可应用本法提取;有些挥发性成分在水中的溶解度稍大些,常将蒸馏液重新蒸馏,在最先蒸馏出的部分,分出挥发油层,或在蒸馏液水层经盐析法并用低沸点溶剂将成分提取出来;例如玫瑰油、原白头翁素protoanemonin等的制备多采用此法;三升华法：固体物质受热直接气化,遇冷后又凝固为固体化合物,称为升华;中草药中有一些成分具有升华的性质,故可利用升华法直接自中草药中提取出来;例如樟木中升华的樟脑camphor,在本草纲目中已有详细的记载,为世界上最早应用升华法制取药材有效成分的记述;茶叶中的咖啡碱在178℃以上就能升华而不被分解;游离羟基蒽醌类成分,一些香豆素类,有机酸类成分,有些也具有升华的性质;例如七叶内酯及苯甲酸等;升华法虽然简单易行,但中草药炭化后,往往产生挥发性的焦油状物,粘附在升华物上,不易精制除去,其次,升华不完全,产率低,有时还伴随有分解现象;分离和纯化：上述提取法所得到的中草药提取液或提取物仍然是混合物,需进一步除去杂质,分离并进行精制;具体的方法随各中草药的性质不同而异,以后将通过实例加以叙述,此处只作一般原则性的讨论;一溶剂分离法：一般是将上述总提取物,选用三、四种不同极性的溶剂,由低极性到高极性分步进行提取分离;水浸膏或乙醇浸膏常常为胶伏物,难以均匀分散在低极性溶剂中,故不能提取完全,可拌人适量惰性填充剂,如硅藻土或纤维粉等,然后低温或自然干燥,粉碎后,再以选用溶剂依次提取,使总提取物中各组成成分,依其在不同极性溶剂中溶解度的差异而得到分离;例如粉防己乙醇浸膏,碱化后可利用乙醚溶出脂溶性生物碱,再以冷苯处理溶出粉防己碱,与其结构类似的防己诺林碱比前者少一甲基而有一酚羟基,不溶于冷苯而得以分离;利用中草药化学成分,在不同极性溶剂中的溶解度进行分离纯化,是最常用的方法;广而言之,自中草药提取溶液中加入另一种溶剂,析出其中某种或某些成分,或析出其杂质,也是一种溶剂分离的方法;中草药的水提液中常含有树胶、粘液质、蛋白质、糊化淀粉等,可以加入一定量的乙醇,使这些不溶于乙醇的成分自溶液中沉淀析出,而达到与其它成分分离的目的;例如自中草药提取液中除去这些杂质,或自白及水提取液中获得白及胶,可采用加乙醇沉淀法；自新鲜括楼根汁中制取天花粉素,可滴人丙酮使分次沉淀析出;目前,提取多糖及多肽类化合物,多采用水溶解、浓缩、加乙醇或丙酮析出的办法;此外,也可利用其某些成分能在酸或碱中溶解,又在加碱或加酸变更溶液的pH后,成不溶物而析出以达到分离;例如内酯类化合物不溶于水,但遇碱开环生成羧酸盐溶于水,再加酸酸化,又重新形成内酯环从溶液中析出,从而与其它杂质分离；生物碱一般不溶于水,遇酸生成生物碱盐而溶于水,再加碱碱化,又重新生成游离生物碱;这些化合物可以利用与水不相混溶的有机溶剂进行萃取分离;一般中草药总提取物用酸水、碱水先后处理,可以分为三部分：溶于酸水的为碱性成分如生物碱,溶于碱水的为酸性成分如有机酸,酸、碱均不溶的为中性成分如甾醇;还可利用不同酸、碱度进一步分离,如酸性化台物可以分为强酸性、弱酸性和酷热酚性三种,它们分别溶于碳酸氢钠、碳酸钠和氢氧化钠,借此可进行分离;有些总生物碱,如长春花生物碱、石蒜生物碱,可利用不同rH值进行分离;但有些特殊情况,如酚性生物碱紫董定碱corydine在氢氧化钠溶液中仍能为乙醚抽出,蝙蝠葛碱dauricins在乙醚溶液中能为氢氧化钠溶液抽出,而溶于氯仿溶液中则不能被氢氧化钠溶液抽出；有些生物碱的盐类,如四氢掌叶防己碱盐酸盐在水溶液中仍能为氯仿抽出;这些性质均有助于各化合物的分离纯化;二两相溶剂萃取法：1．萃取法：两相溶剂提取又简称萃取法,是利用混合物中各成分在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同而达到分离的方法;萃取时如果各成分两相溶剂中分配系数相差越大,则分离效率越高、如果在水提取液中的有效成分是亲脂性的物质,一般多用亲脂性有机溶剂,如苯、氯仿或乙醚进行两相萃取,如果有效成分是偏于亲水性的物质,在亲脂性溶剂中难溶解,就需要改用弱亲脂性的溶剂,例如乙酸乙酯、丁醇等;还可以在氯仿、乙醚中加入适量乙醇或甲醇以增大其亲水性;提取黄酮类成分时,多用乙酸乙脂和水的两相萃取;提取亲水性强的皂甙则多选用正丁醇、异戊醇和水作两相萃取;不过,一般有机溶剂亲水性越大,与水作两相萃取的效果就越不好,因为能使较多的亲水性杂质伴随而出,对有效成分进一步精制影响很大;两相溶剂萃取在操作中还要注意以下几点：1先用小试管猛烈振摇约1分钟,观察萃取后二液层分层现象;如果容易产生乳化,大量提取时要避免猛烈振摇,可延长萃取时间;如碰到乳化现象,可将乳化层分出,再用新溶剂萃取；或将乳化层抽滤,或将乳化层稍稍加热；或较长时间放置并不时旋转,令其自然分层;乳化现象较严重时,可以采用二相溶剂逆流连续萃取装置;2 水提取液的浓度最好在比重1．1～1．2之间,过稀则溶剂用量太大,影响操作;3 溶剂与水溶液应保持一定量的比例,第一次提取时,溶剂要多一些,一般为水提取液的1/3,以后的用量可以少一些,一般1/4-1/6;4一般萃取3～4次即可;但亲水性较大的成分不易转入有机溶剂层时,须增加萃取次数,或改变萃取溶剂;萃取法所用设备,如为小量萃取,可在分液漏斗中进行；如系中量萃取,可在较大的适当的下口瓶中进行;在工业生产中大量萃取,多在密闭萃取罐内进行,用搅拌机搅拌一定时间,使二液充分混合,再放置令其分层；有时将两相溶液喷雾混含,以增大萃取接触,提高萃取效率,也可采用二相溶剂逆流连续萃取装置;2．逆流连续萃取法：是一种连续的两相溶剂萃取法;其装置可具有一根、数根或更多的萃取管;管内用小瓷圈或小的不锈钢丝圈填充,以增加两相溶剂萃取时的接触面;例如用氯仿从川楝树皮的水浸液中萃取川楝素;将氯仿盛于萃取管内,而比重小于氯仿的水提取浓缩液贮于高位容器内,开启活塞,则水浸液在高位压力下流入萃取管,遇瓷圈撞击而分散成细粒,使与氯仿接触面增大,萃取就比较完全;如果一种中草药的水浸液需要用比水轻的苯、乙酸乙酯等进行萃取,则需将水提浓缩液装在萃取管内,而苯、乙酸乙酯贮于高位容器内;萃取是否完全,可取样品用薄层层析、纸层析及显色反应或沉淀反应进行检查;3．逆流分配法CounterCurrentDistribution,CCD：逆流分配法又称逆流分溶法、逆流分布法或反流分布法;逆流分配法与两相溶剂逆流萃取法原理一致,但加样量一定,并不断在一定容量的两相溶剂中,经多次移位萃取分配而达到混合物的分离;本法所采用的逆流分布仪是由若干乃至数百只管子组成;若无此仪器,小量萃取时可用分液漏斗代替;预先选择对混合物分离效果较好,即分配系数差异大的两种不相混溶的溶剂;并参考分配层析的行为分析推断和选用溶剂系统,通过试验测知要经多少次的萃取移位而达到真正的分离;逆流分配法对于分离具有非常相似性质的混合物,往往可以取得良好的效果;但操作时间长,萃取管易因机械振荡而损坏,消耗溶剂亦多,应用上常受到一定限制;4．液滴逆流分配法：液滴逆流分配法又称液滴逆流层析法;为近年来在逆流分配法基础上改进的两相溶剂萃取法;;对溶剂系统的选择基本同逆流分配法,但要求能在短时间内分离成两相,并可生成有效的液滴;由于移动相形成液滴,在细的分配萃取管中与固定相有效地接触、摩擦不断形成新的表面,促进溶质在两相溶剂中的分配,故其分离效果往往比逆流分配法好;且不会产生乳化现象,用氮气压驱动移动相,被分离物质不会因遇大气中氧气而氧化;本法必须选用能生成液滴的溶剂系统,且对高分子化合物的分离效果较差,处理样品量小1克以下,并要有一定设备;应用液滴逆流分配法曾有效地分离多种微量成分如柴胡皂甙原小檗碱型季铵碱等;液滴逆流分配法的装置,近年来虽不断在改进,但装置和操作较繁;目前,对适用于逆流分配法进行分离的成分,可采用两相溶剂逆流连续萃取装置或分配柱层析法进行;三沉淀法：是在中草药提取液中加入某些试剂使产生沉淀,去杂质的方法;1.铅盐沉淀法：铅盐沉淀法为分离某些中草药成分的经典方法之一;由于醋酸铅及碱式醋酸铅在水及醇溶液中,能与多种中草药成分生成难溶的铅盐或络盐沉淀,故可利用这种性质使有效成分与杂质分离;中性醋酸铅可与酸性物质或某些酚性物质结合成不溶性铅盐;因此,常用以沉淀有机酸、氨基酸、蛋白质、粘液质、鞣质、树脂、酸性皂甙、部分黄酮等;可与碱式醋酸铅产生不溶性铅盐或络合物的范围更广;通常将中草药的水或醇提取液先加入醋酸铅浓溶液,静置后滤出沉淀,并将沉淀洗液并入滤液,于滤液中加碱式醋酸铅饱和溶液至不发生沉淀为止,这样就可得到醋酸铅沉淀物、碱式醋酸铅沉淀物及母液三部分;然后将铅盐沉淀悬浮于新溶剂中,通以硫化氢气体,使分解并转为不溶性硫化铅而沉淀;含铅盐母液亦须先如法脱铅处理,再浓缩精制;硫化氢脱铅比较彻底,但溶液中可能存有多余的硫化氢,必须先通人空气或二氧化碳让气泡带出多余的硫化氢气体,以免在处理溶液时参与化学反应;新生态的硫化铅多为胶体沉淀,能吸咐药液中的有效成分,要注意用溶剂处理收回;脱铅方法,也可用硫酸、磷酸、硫酸钠、磷酸钠等除铅,但硫酸铅、磷酸铅在水中仍有一定的溶解度,除铅不彻底;用阳离子交换树脂脱铅快而彻底,但要注意药液中某些有效成分也可能被交换上去,同时脱铅树脂再生也较困难;还应注意脱铅后溶液酸度增加,有时需中和后再处理溶液,有时可用新制备的氢氧化铅、氢氧化铝、氢氧化铜或碳酸铅、明矾等代替醋酸铅、碱式醋酸铅;例如在黄芩水煎液中加入明矾溶液,黄芩甙就与铝盐络合生成难溶于水的络化物而与杂质分离,这种络化物经用水洗净就可直接供药用;2.试剂沉淀法：例如在生物碱盐的溶液中,加入某些生物碱沉淀试剂见生物碱性质下,则生物碱生成不溶性复盐而析出;水溶性生物碱难以用萃取法提取分出,常加入雷氏铵盐使生成生物碱雷氏盐沉淀析出;又如橙皮甙、芦丁、黄芩甙、甘草皂甙均易溶于碱性溶液,当加入酸后可使之沉淀析出;某些蛋白质溶液,可以变更溶液的pH值利用其在等电点时溶解度最小的性质而使之沉淀析出;此外,还可以用明胶、蛋白溶液沉淀鞣质；胆甾醇也常用以沉淀洋地黄皂甙等;可根据中草药有效成分和杂质的性质,适当选用;四盐析法：盐析法是在中草药的水提液中、加入无机盐至一定浓度,或达到饱和状态,可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出,而与水溶性大的杂质分离;常用作盐析的无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等;例如三七的水提取液中加硫酸镁至饱和状态,三七皂甙乙即可沉淀析出,自黄藤中提取掌叶防己碱,自三颗针中提取小檗碱在生产上都是用氯化钠或硫酸按盐析制备;有些成分如原白头翁素、麻黄碱、苦参碱等水溶性较大,在提取时,亦往往先在水提取液中加入一定量的食盐,再用有机溶剂萃取;五透析法：透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜,而大分子物质不能通过半透膜的性质,达到分离的方法;例如分离和纯化皂甙、蛋白质、多肽、多糖等物质时,可用透析法以除去无机盐、单糖、双糖等杂质;反之也可将大分子的杂质留在半透膜内,而将小分子的物质通过半透膜进入膜外溶液中,而加以分离精制：透析是否成功与透析膜的规格关系极大;透析膜的膜孔有大有小,要根据欲分离成分的具体情况而选择;透析膜有动物性膜、火棉胶膜、羊皮纸膜硫酸纸膜、蛋白质胶膜、玻璃纸膜等;油常多用市售的玻璃纸或动物性半透膜扎成袋状,外面用尼龙网袋加以保护,小心加入欲透析的样品溶液,悬挂在清水容器中;经常更换清水使透析膜内外溶液的浓度差加大,必要时适当加热,并加以搅拌,以利透析速度加快;为了加快透析速度,还可应用电透析法,即在半在半透膜旁边纯溶剂两端放置二个电极,接通电路,则透析膜中的带有正电荷的成分如无机阳离子、生物碱等向阴极移动,而带负电共荷的成分如无机阴离子、有机酸等则向阳极移动,中性化合物及高分子化合物则留在透析膜中;透析是否完全,须取透析膜内溶液进行定性反应检查;一般透析膜可以自制：动物半透膜如猪、牛的膀胱膜、用水洗净,再以乙醚脱脂,,即可供用；羊皮纸膜可将滤纸浸入50％的硫酸15～60分钟,取出铺在板上,以水冲洗制得;其膜孔大小与硫酸浓度、浸泡时间以及用水冲洗速度有关；火棉胶膜系将火棉胶溶于乙醚及无水乙醇,涂在板上,干后放置水中即可供用,其膜孔大小与溶剂种类、溶剂挥发速度有关,溶剂中加入适量水可使膜孔增大,加入少量醋酸可使膜孔缩小；蛋白质胶明胶膜可用20％明胶涂于细布上,阴干后放水中,再加甲醛使膜凝固,冲洗干净即可供用;近来商品有透析膜管成品出售,国外习称“ViskingDialysisTubing”,有各种大小厚度规格,可供不同大小分子量的多糖、多肽透析时选用;六结晶、重结晶和分步结晶法：鉴定中草药化学成分,研究其化学结构,必须首先将中草药成分制备成单体纯品;在常温下,物质本身性质是液体的化台物,可分别用分馏法或层析法进行分离精制;一般他说,中草药化学成分在常温下多半是固体的物质,都具有结晶他的通性,可以根据溶解度的不同用结晶法来达到分离精制的目的;研究中草药化学成分时,一旦获得结晶,就能有效地进一步精制成为单体纯品;纯化台物的结晶有一定的熔点和结晶学的特征,有利于鉴定;如果鉴定的物质不是单体纯品,不但不能得出正确的结论,还会造成工作上的浪费;因此,求得结晶并制备成单体纯品,就成为鉴定中草药成分、研究其分子结构重要的一步;1．杂质的除去：中草药经过提取分离所得到的成分,大多仍然含有杂质,或者是混合成分;有时即使有少量或微量杂质存在,也能阻碍或延缓结晶的形成;所以在制备结晶时,必须注意杂质的干扰,应力求尽可能除去;有时可选用溶剂溶出杂质,或只溶出所需要的成分;有时可用少量活性炭等进行脱色处理,以除去有色杂质;有时可通过氧化铝,硅胶或硅藻土短柱处理后,再进行制备结晶;但应用吸附剂除去杂质时,要注意所需要的成分也可能被吸附而损失;此外,层析法更是分离制备单体纯品所常用的有效方法;如果一再处理仍未能使近于纯品的成分结晶化,则可先制备其晶态的衍生物,再回收原物,可望得到结晶;例如游离生物。
中药化学成分提取分离和鉴定方法
中药化学成分提取分离和鉴定方法中药化学成分的提取、分离和鉴定是中药研究的重要环节，也是中药科学的核心内容之一、在中药研究中，通过提取分离和鉴定化学成分，可以探寻中药的药理作用、药效物质基础，以及优化中药制剂的配方和给药途径等。
下面介绍一些常用的中药化学成分提取、分离和鉴定方法。
提取方法：1.水提取法：将中药材样品浸泡在适量的水中，通过温度、时间等因素促进药物成分的溶解，然后蒸馏或浓缩得到提取物。
2.醇提取法：将中药材样品浸泡在适量的醇溶剂（如乙醇、甲醇等）中，利用醇的溶解性，提取药物成分。
3.超临界流体提取法：在高压、高温下将超临界流体（如二氧化碳）与中药材接触，强化了药物成分的溶剂力。
4.萃取法：使用有机溶剂与中药材进行萃取，如乙醚、丙酮等。
分离方法：1.薄层色谱法：将提取物吸附于薄层色谱板上，然后通过溶剂的上升作用，利用不同成分在色谱板上的迁移性差异，实现成分的分离。
2.柱层析法：将提取物通过柱层析填料（如硅胶、分子筛等）进行分离，根据成分在填料上的迁移速度差异，实现成分的分离。
3.高效液相色谱法：利用液相色谱仪分离和检测样品中的化合物，根据成分在固定相和流动相之间的相互作用不同来实现成分的分离。
4.气相色谱法：通过将样品挥发成气体，利用气相色谱仪对气体中的化合物进行分析和检测。
鉴定方法：1.紫外-可见光谱法：利用中药成分对紫外-可见光的吸收作用，通过测量药物溶液对特定波长光线的吸收强度，推断其中的成分。
2.红外光谱法：通过测量中药样品对红外光的吸收和透射来分析和鉴定中药成分。
3.质谱法：通过分析和测量中药样品中的质子或离子分子的质量-荷电比（m/z）比值，推断其中的成分。
4.核磁共振谱法：通过测量中药样品中核磁共振现象的有关参数（如化学位移、耦合常数等），来分析和鉴定中药成分。
综上所述，中药化学成分提取、分离和鉴定方法博大精深，研究人员可以选择合适的方法进行实验，并结合多种方法对中药样品进行综合分析，以揭示中药的化学成分和药理活性物质基础。
中药化学成分提取分离和鉴定的方法
中药化学成分提取分离和鉴定的方法一、提取方法中药的有效成分一般分布在天然产物中，通过提取可以将其集中起来，常用的提取方法有：1.水浸提取：将中药粉末与适量的水混合，使用热水或冷水浸泡一定时间后，过滤、浓缩，得到中药水提取液。
2.醇提取：将中药粉末与乙醇或其他有机溶剂混合，浸泡一段时间，过滤、浓缩，得到中药醇提取液。
3.超声波提取：通过超声波的机械作用，使溶剂渗入叶片和组织细胞中，加速物质的扩散和溶解，提高提取效率。
二、分离方法提取液中含有多种成分，需要进行分离，常用的分离方法有：1.疏水色谱法：利用不同成分在非极性固定相上的亲疏水性差异进行分离，如硅胶柱色谱、C18柱色谱等。
2.离子交换色谱法：利用各种带电的成分与离子交换树脂之间的相互作用进行分离，如阴离子交换色谱、阳离子交换色谱等。
3.层析法：利用固定相的颗粒特性进行分离，如薄层色谱、高效液相色谱等。
三、鉴定方法分离后的化合物需要进行鉴定，常用的鉴定方法有：1.紫外-可见吸收光谱：通过测量物质在紫外或可见光区域的吸收特性，判断物质的化学结构和含量。
2.红外光谱：利用物质对红外辐射的吸收和散射特性，推断化学结构。
3.质谱：通过分子的分解产物质谱图，确定分子的相对分子量、结构和化学式。
4.核磁共振波谱：通过核磁共振信号的强度、位置和形状，测定化合物的结构和相对分子量。
综上所述，中药化学成分的提取、分离和鉴定方法涵盖了水浸提取、醇提取、超声波提取、疏水色谱、离子交换色谱、层析法、紫外-可见吸收光谱、红外光谱、质谱和核磁共振波谱等一系列实验技术。
这些方法的选用需要根据具体的中药材和目标成分的特点来决定，以获得准确、可靠的结果。
同时，为了提高方法的效率和可重复性，对仪器设备和实验条件的选择与控制也是非常重要的。
第 二 章 中药化学成分提取分离方法
液-液分配色谱（分配原理）
类型 固定相 流动相 应 用 正相色谱 水 > BAW系统 极性、中极性物质分离 （以PPC为例） 反相色谱 ODS < 甲醇-水、乙腈-水 最广泛，非极性、中极性 各类物质的分离
加压液相色谱
类型 压 力（Pa） 分析用高压液相色谱（HPLC） > 20.2 ×105 制备用高压液相色谱（HPLC） 中压液相色谱 ( MPLC ) 5.05~20.2 ×105 低压液相色谱 ( LPLC ) <5.05 ×105 快速色谱 约2.02 ×105 分离规模 1mg左右 > 5mg > 100mg 10mg~1g > 10mg
除去多糖、 蛋白质外 的大多数 化学成分 均可
亲脂性有机溶剂 对化合物溶解选择性较强， 水溶性杂质少、易纯化 ， 游离生物碱 回流法 挥发性大、易燃烧、有毒 ， 苷元 连续回流法 价格昂贵，对提取设备要求高， 某些苷类 穿透力较弱，提取时间长， 作为提取溶剂不常用。 乙醚 bp. 35℃，极易燃 氯仿 bp. 61℃、d 1. 480，不易燃，毒性大 对生物碱溶解性好 苯 bp. 80.1℃，毒性大 石油醚 沸程 30~60℃、60~90℃、90~120℃ 脱脂、脱色常用 于甲醇、乙醇不能任意混溶
分 配 系 数 （ ） 差 异
K
溶解度差异
溶 解 度 差 异
溶剂沉淀法 水提醇沉法（水/醇法） 除去多糖、蛋白质等水溶性杂质 醇提水沉法（醇/水法） 除去树脂、叶绿素等脂溶性杂质 醇/醚（丙酮）法 皂苷的纯化（除去脂溶性杂质） 酸/碱法 生物碱的分离纯化 碱/酸法 酸性成分（如苷元）的分离纯化 试剂沉淀法 钙、钡、铅盐沉淀法 酸性成分的分离 生物碱沉淀试剂沉淀法 生物碱的分离纯化 结晶及重结晶 化合物的进一步精制
中药鉴定学考试复习笔记：第二章（3）
⽩芍 Radix Paeoniae Alba【来源】⽑茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的⼲燥根。
【产地】主产于浙江东阳、安徽亳州、四川等地。
【采收加⼯】夏、秋⼆季采挖种植3～4年植株的根，洗净，除去头尾及细根，置沸⽔中煮⾄透⼼，除去外⽪或去⽪后再煮，晒⼲。
【化学成分】芍药苷，芍药花苷，牡丹酚，⽩芍药苷，苯甲酰芍药苷等。
【性状鉴别】药材呈圆柱形，平直或略弯曲，两端平截。
表⾯浅棕⾊或类⽩⾊，全体光滑，隐约有纵皱纹、⽪孔及细根痕，偶有残存的外⽪。
质坚实，不易折断，断⾯较平坦，类⽩⾊或微红⾊，⾓质样，形成层环明显，⽊质部有放射状纹理（菊花⼼）。
【显微鉴别】粉末特征草酸钙簇晶较多，有的1个细胞含2⾄数个簇晶，也有含晶细胞纵列成⾏；具缘纹孔导管或纹、梯纹导管；⽊纤维主要为纤维管胞；薄壁细胞含糊化淀粉粒。
【理化鉴别】1．化学定性取本品横切⽚，加1%三氯化铁试液显蓝⾊。
取本品粉末5g，加⼄醚50ml，加热回流10min，滤过，取滤液10ml，置⽔浴上蒸⼲，加醋酐1ml与硫酸4～5滴，先显黄⾊，渐变成红⾊、紫⾊，最后呈绿⾊。
2．薄层⾊谱取本品粉末0.5g，加⼄醇10ml，振摇5min，滤过，滤液蒸⼲，残渣加⼄醇1ml，使溶解，作为供试品溶液。
另取芍药苷对照品，加⼄醇制成每1ml含1mg溶液，作为对照品溶液。
吸取2种溶液各10µl，分别点于同⼀硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸⼄酯-甲醇-甲酸（40∶5∶10∶0.2）为展开剂，展开，取出，晾⼲，喷5%⾹草醛硫酸溶液，热风吹⾄斑点显⾊清晰。
供试品⾊谱在与对照品相应的⾊谱位置上，显相同的蓝紫⾊斑点。
【含量测定】芍药苷的含量测定⾼效液相⾊谱法。
本品含芍药苷（C23H28O11）不得少于0.80%。
黄连 Rhizoma Coptidis【来源】⽑茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.、三⾓叶黄连Coptis deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta Wall.的⼲燥根茎，药材依次习称“味连”、“雅连”和“云连”。
天然药物化学 第二章 提取分离鉴定
常用溶剂极性大小顺序： 石油醚＜苯＜无水乙醚＜ 氯仿＜乙酸乙酯 亲脂性有机溶剂 ＜丙酮＜乙醇＜ 甲醇＜ 水 亲水性有机溶剂
溶剂的选择 应综合考虑溶剂的极性、被提取成分及共 存的其他成分的性质三方面的因素来决定， 同时还应兼顾考虑溶剂是否使用安全、价 廉易得、浓缩方便等特点。
提取方法
1、浸渍法
静态
一、溶剂提取法
最普遍的方法。
概念：根据天然药物中各化学成分的溶解 性能，选用对有效成分溶解度大而对其他 成分溶解度小的溶剂，用适当的方法将有 效成分尽可能完全地从药材组织中溶解出 来。
基本原理:是在渗透、扩散作用下，溶剂 渗透入药材组织细胞内部，溶解可溶性 物质，形成细胞内外溶质的浓度差而产 生渗透压，在渗透压的作用下，细胞外 的溶剂不断进入药材组织中，溶解可溶 性成分，细胞内的浓溶液不断向外扩散， 如此反复，直至细胞内外溶液浓度达到 动态平衡。
缺点：受热时间长
取，充分将有效成分浸
出完全的一种方法。 索氏提取器
6、超声提取法
是一种利用超声波浸提有效成分的方法。
优点 ：（1）提取时间短
（2）无需加热，适于提取对热不稳定成分。
适于各种溶剂。
（3）提取效率高 缺点：设备问题有待解决
二、水蒸气蒸馏法
水蒸气蒸馏法系指将含有挥发性成分的 药材与水共蒸馏，使挥发性成分随水蒸 气一并馏出，经冷凝分取挥发性成分的 提取方法。
2、三要素 固定相：反相色谱常用C18、C8硅胶 移动相：复合溶剂系统 被分离物质 3、操作 装柱 上样 洗脱
Ⅲ、离子交换柱色谱法
是利用离子交换树脂上的功能基在水溶液中能 与溶液的其他离子进行可逆性交换的性质，以 离子交换树脂为固定相，使混合成分中离子型 与非离子型物质得到分离的方法。 根据功能基性质的不同，树脂分为两大类：
中药化学成分鉴定
中药化学成分鉴定
中药化学成分的鉴定是通过分析中药材中所含有的化学成分，以确定其中的活性化合物和其含量。
以下是中药化学成分鉴定的一般步骤：
1.样品制备：
o从中药材中提取目标化合物。
这可以通过水提取、醇提取、溶剂抽提等方法来实现。
2.分离与纯化：
o使用色谱技术分离样品中的化学成分。
常见的技术包括薄层色谱、柱层析、高效液相色谱(HPLC)等。
o分离后的目标化合物可以通过进一步的溶剂结晶、固相萃取等方法进行纯化。
3.结构鉴定：
o使用各种分析技术来确定目标化合物的化学结构，包括核磁共振(NMR)、质谱分析(MS)、红外光谱(IR)
等。
o通过与已知化合物进行对比，对目标化合物进行鉴定。
4.含量测定：
o使用合适的分析技术来测定样品中目标化合物的含量。
常见的方法包括比色法、滴定法、高效液相色
谱等。
o通过校准曲线或相对浓度的计算，得出目标化合物的含量。
5.数据分析和报告：
o对实验结果进行统计和分析，得出所含化学成分的结论。
o编写鉴定报告，包括样品信息、分析方法、结果和结论等。
通过中药化学成分的鉴定，可以了解中药材中的活性化合物、药理作用和药效，为中药材的质量控制和药物研发提供依据。
这个过程中需要使用多种分析技术和仪器，以确保结果的准确性和可靠性。
中药化学成分提取分离与鉴定方法.
4、回流提取法
（1）适用范围：有效成分对热稳定，易溶于 低沸点有机溶剂的天然药材
（2）优点：提取效率高 （3）缺点：溶剂消耗量大，对热不稳定的药
材不适用
5、连续回流提取法
（1）用少量溶剂进行连续循环回流提取，充 分将有效成分浸出；
二、水蒸气蒸馏法
（1）基本原理：水和与水互不相溶的液体成 分共存时，其总的蒸气压升高，但沸点降 低（低于水的沸点），使有效成分在较低 的温度下随水蒸气蒸馏出来；
（2）适用范围：具有挥发性，沸点高能随水 蒸气馏出而不被破坏，不溶或难溶于水， 与水不发生化学反应的天然药物化学成分。 如挥发油、麻黄碱、丹皮酚等。
2、渗漉法（动态浸提方法）
（1）适用范围：遇热不稳定的成分或含大量 多糖类药材的提取
（2）提取温度：常温 （3）提取时间：较长 （4）优点：保持较好的浓度差，提取效率高 （5）缺点：操作不方便，提取溶剂用量大，
时间长。 （6）连续渗漉装置
3、煎煮法
（1）适用范围：有效成分能溶于水且不易被 水、热破坏的天然药材，不宜用于含挥发 性成分、遇热不稳定及含多糖类的药材
2、基本原理（渗透扩散原理）
粉碎后的药材，加入适宜的溶剂 → 溶 剂渗透、进入药材，溶解可溶性成分 → 药 材细胞内外，可溶性成分形成浓度差，产 生渗透压 → 扩散 → 再不断地渗透、扩散 → 最终达到动态平衡
3、影响因素
影响提取效率的因素：
（1）溶剂的选择：相似相溶的原理，根据溶剂
的极性，被提取成分及共存的其他成分的性质来 决定，同时兼顾考虑溶剂是否使用安全、易得、 价廉、浓缩方便等问题；
中药化学成分提取分离和鉴定方法
中药化学成分提取分离和鉴定方法一、中药提取方法中药提取方法是指将中药材中的有效成分溶解或萃取出来的过程。
常用的提取方法包括水浸提、乙醇提、超声波提、微波提等。
水浸提是指将中药材与适量的水浸泡，使其溶解于水中，随后经过过滤、浓缩得到提取物。
该方法适合提取水溶性物质，如多糖类、黄酮类等。
乙醇提是指将中药材用乙醇溶解，得到提取物。
乙醇提取适用于提取脂溶性物质，如挥发油、生物碱等。
超声波提是将中药材置于适量的溶剂中，通过超声辅助作用使溶剂中各种物质迅速溶解出来。
超声波可以提高提取速度和提取率，并且不会破坏有效成分的活性。
微波提是利用微波辐射对中药材进行加热，使其中的有效成分被溶解出来。
微波提取时间短、效果快，适用于提取热敏感物质。
二、中药分离方法中药分离方法是指将提取物中的复杂成分通过分离技术分离开来，以得到单一化合物或纯净化合物。
常用的分离方法包括薄层色谱法、柱层析法、液相色谱法等。
薄层色谱法是将提取物溶解于适当溶剂中，然后在薄层硅胶或薄层纸上进行分离。
通过溶剂在固定相上的上升方式，使待测物分离成若干斑点，并用目视或检出物征显色剂检测。
薄层色谱法操作简单、分离效果好，被广泛应用于中药成分分离。
柱层析法是将已提取物溶解于适当溶剂中，填充在柱子中，经由分配作用在固定相上发生分离，得到目标化合物。
柱层析法分为预柱和正柱两个步骤，预柱是为了除去杂质，正柱是为了分离纯化目标化合物。
液相色谱法是利用样品在固定相上的不同亲和性而进行分离的一种方法。
常用的液相色谱法有高效液相色谱法、气相色谱法等。
高效液相色谱法被广泛应用于中药成分分离，具有分离效果好、分离时间短等优点。
三、中药鉴定方法中药鉴定方法是通过对提取物或分离物进行各种实验手段，确认其化学性质、物理性质和结构特征。
常用的鉴定方法包括红外光谱法、核磁共振法、质谱法等。
红外光谱法可以检测样品中各种有机化合物的化学键和官能团。
通过比较待测物的红外光谱和参照物的红外光谱，可以确定待测物的结构特征和官能团。
第二章 天然药物化学成分的提取,分离和鉴定方法
• 90年代，开始从植物药中提取目标成分，如从蛇床子、 茵陈蒿、桑白皮中提取活性成分。
中 小 型 SFE 装 置 图
第一节 提取方法
5.超声提取法（ultrasonic extraction) 为物理过程，无化 学反应，生物活性不 减。大能量的超声波 产生的极大压力造成 植物细胞壁及整个生 物体破裂，胞内物质 的释放、扩散及溶解。
1.1 结晶法
关键：选择合适的溶剂
① 对被溶解成分的溶解度随温度不同应有显著差别
②与被结晶成分不应产生化学反应
③ 沸点适中
第二节 分离方法
a 分级沉淀法：改变极性
水提醇沉法：含有糖类或蛋白质的水溶液中，分次加 入乙醇，使含醇量逐步增高，逐级沉淀出分子量段 由大到小的蛋白质、多糖、多肽等。 在含皂苷的乙醇溶液中分次加入乙醚或乙醚-丙酮混 合液可使极性有差异的皂苷逐段沉淀出来。
R
CHO CH3 CHO
R’
(D-Glc)2 (D-Glc)2 H
R OR" OH OO O R'
黄夹次苷B 黄夹次苷C
黄夹次苷D
CH3 CH2OH
COOH
H H
H
CH3 OCH3
单乙酰黄夹 次苷B
CH3
H
单乙酰黄夹次苷B R”=COCH3, 其它R”=H
第二节 分离方法
答案：
1. 极性大 小：黄夹苷A＞黄夹苷B ＞次 苷D＞次苷C＞次苷A＞次苷B ＞单乙酰黄夹 次苷B
第一节 提取方法
2.水蒸气蒸馏法（water-steam distillation ） 提取具有挥发性，能随水蒸气 蒸馏而不被破坏的成分，如挥发油。
Simple water-steam distillation refluxing assembly
第二章提取、分离、鉴定教学提纲
三七的水提液 MgSO4 至饱和 （三七皂苷乙）
（三）简单萃取法（simple extraction）
原理：利用混合物中各成分在两种互不相溶的 溶剂中分配系数的不同而达到分离的方法。 分配系数相差越大，分离效率越高。
纳滤 反渗透
1-10nm ≤1nm
去除分子量为 3000-1000 的小分子物质，集 浓缩与透析于一体。
仅透过小分子溶剂，截留无机盐，金属离子， 和低分子量的物质。制备医用水，注射用水， 医用透析水；水的脱盐纯化
膜分离技术在中药提取分离中的应用
➢ ①用于提取中药有效成分 ➢ ②用于制备中药注射剂及大输液 ➢ ③用于制备中药口服液 ➢ ④用于制备药酒等其他中药制剂
保。 ➢ ③选择性高。 ➢ ④适用范围广（热原，细菌→有机物，无机物）。 ➢ ⑤可实现连续化和自动化操作，易与其他生产过程匹配，满足中
药现代化生产要求。
膜分离技术的类型
类型 范围
应用
微滤
≥0.1μm
截留颗粒物，液体的澄清，细菌的去除；超 滤和反渗透的前处理。
超滤
除颗粒，除菌，澄清；除病菌，热原，胶体， 10-100nm 蛋白等大分子物质。用于分离提纯和浓缩。
pH梯度萃取法
总提取物/乙酸乙酯 酸性 水萃取
酸水层 调pH12，有机溶剂萃取
有机层 NaHCO3
有机层
水层
NaHCO3层
（碱性物质）（糖等强极性、 酸化，有机溶剂萃取
有机层 NaOH液提萃取
中性物质）
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苷元与糖或糖的衍生物通过苷键（缩醛键）连接而 成的化合物。苷易水解成苷元和糖。
CH 2 OH O
OH
HO CH 2 OH O O OH
HO
OH
人参皂苷Rb1
(ginsenoside Rb1)
OH
水解
HO HO
HO
糖类（saccharides）
单糖：无色晶体，味甜。易溶于水，难溶于有机溶剂。 低聚糖：2~10个单糖缩合而成。味甜，溶于水，难溶于有机溶剂。 多糖：10个以上单糖脱水缩合而成。无甜味，大多不溶于水。
细辛醚 (asarone)
强心苷（cardica glycosides ）
对心脏有显著生理活性的甾体苷类。无色，有旋光性、 对粘膜有刺激性。
洋地黄毒苷 (digitoxin)
皂苷（saponins）
由螺甾烷类或三萜类化合物与糖结合的低聚糖苷， 前者为甾体皂苷，后者为三萜皂苷。无色，对粘膜有刺 激性，有吸湿性、发泡性和溶血性。
HO
CH 2 OH O
OH
OH
O HO
CH 2 O
OH
OH
O HO
CH
2
OH O
O
OH
HO CH 2 OH O O OH
HO
OH
薯蓣皂苷
(dioside Rb1)
其他成分
有机酸 鞣质 氨基酸、蛋白质和酶 植物色素 树脂 油脂和蜡 无机成分 微量元素
第2节 中药化学成分预试验
CH3O CH3O
CH3O CH3O
OH CH3 CH3
黄芩苷
(baicalin)
萜类和挥发油（terpeonids and volatile oils ）
萜类：由甲戊二羟酸衍生、分子式符合（C5H8）n的 衍生物。
挥发油（精油）：可随水蒸气蒸馏的与水不相混溶 的无色或淡黄色透明油状液体。
薄荷醇 (menthol)
❖ 药材鉴定 a. 原植物的拉丁学名 b. 采集地点和时间 c. 药及部位 d. 民间药用情况
（3）已知/未知成分研究策略 ❖ 已知成分：结构类型，确定提取、分离路线； ❖ 未知成分：系统预试验，活性跟踪；
2.提取方法
溶剂提取法 O
水蒸气蒸馏法
超其他临界方流法体萃O取法
N+ Cl-
N+ Cl-
具有醌式结构化合物。分子中多有酚－OH，有一定 酸性。
O O
HO
CH 3 O
O
CH 3 O
O
OH
CH 3 O
O
OH
OH
OH
大黄酚
大黄酚-D-葡萄糖苷
(chrysophanol)
(chrysophanol-8-D-glucoside)
苯丙素类（phenylpropanoids ）
以苯丙基（C6-C3）为基本骨架的化合物。 香豆素：具有苯骈α-吡喃酮母核的一类天然化合物。 木脂素：有两分子苯丙素衍生物聚合而成的天然化合物。
目的：初步判定中药中含有哪些化学成分，为设计 提取、分离方案奠定基础。
1.预试验的分类 2.预试验的方法 3.预试验供试液的制备
1.预试验的分类
单项预试：重点检查某类成分。 系统预试：全面检查各类成分。
2.预试验的方法
试管法 纸片法 薄层及纸色谱法
3.预试液的制备
水浸液 5g/50ml水，浸泡过夜，过滤。滤液A用以检查氨基酸、多肽、
第3节 提取分离中药有效成分常用的方法
概述 提取方法 分离纯化方法 影响因素
1.概述
（1）中药化学成分的构成特点 ❖ 同种植物含有多种结构类型的化学成分 ❖ 总成分含量少而种类多 ❖ 有效成分含量低
（2）提取分离前进行文献调研
❖ 研究进展 a. 做过否？ b. 研究的深度和广度如何？ c. 如何开展？
1g/10ml，浸泡2-3h，过滤。 滤液用以检查挥发油、萜类等。
常用显色剂：
生物碱：碘化铋钾试剂 棕红色 酚：三氯化铁试剂 蓝色 有机酸：溴酚蓝试剂 蓝色背景黄色斑点 皂苷：磷钼酸试剂 蓝-蓝紫色 内酯、香豆素：异羟肟酸铁试剂 蓝-紫 黄酮：三氯化铝试剂、盐酸-镁粉、乙酸镁试剂 + 蒽醌：氢氧化钾试剂 红色 强心苷：3,5-二硝基苯甲酸试剂 紫红色 氨基酸：茚三酮试剂 + 挥发油：油斑试验 无斑点 有机化合物：硫酸试剂
OCH 3
（1）溶剂提取法
原理：相似相溶。
溶剂穿透入药材粉末的细胞膜，溶解溶质，形成 细胞内外溶质的浓度差，将溶质渗出，进行提取。
范围：所有化学成分。
溶剂
石油醚 环己烷
D-葡萄糖 L－鼠李糖 D－葡萄糖醛酸
(D-glucose) (L-rhamnose) (D-glucuronic acid)
HO O OH
glc-OO OH
CH3 O
CH3 O
α-D-Gal-(1→4)-β-D-Glc-[β-D-Fru-(1→6)]-(1→4) -β-D-Glc
醌类（quinones）
第2章 中药化学成分提取、分离 和鉴定的一般方法
目的要求
了解中药化学成分的类型及理化性质。 掌握中药有效成分的提取、分离方法。 了解中药有效成分结构鉴定的方法。
教学内容
第1节 中药中所含各类化学成分简介 第2节 中药化学成分预试验 第3节 提取、分离中药有效成分常用的方法 第4节 中药化学成分鉴定和结构研究简介 第5节 药理供试样品的配制
蛋白质；滤渣水浴 60℃加热10min，过滤。滤液B用以检查糖、 有机酸、苷、鞣质、水溶性生物碱等。 乙醇提取液
中性醇提液：5g/50ml 95%乙醇，水浴加热回流20min，过滤。 滤液用以检查黄酮、蒽醌、香豆素、萜、苷等。
酸性醇提液：2g/10ml 0.5%盐酸乙醇溶液，水浴加热回流10min， 过滤。滤液用以检查生物碱等。 石油醚提取液
第1节 中药中所含各类化学成分简介
生物碱 糖和苷 醌类 苯丙素类 黄酮类 强心苷 皂苷 萜类和挥发油 其他成分
生物碱（alkaloids）
生物体内的含氮有机物，有似碱的性质（能与酸 成盐），有生理活性。
盐酸小檗碱 (Berberine hydrochloride)
苷类（glycosides）
OH
七叶内酯 (aesculetin)
CH3O CH3O
CH3O
CH＝CHC3 H
五味子酯甲 (schisantherin A)
黄酮类（flavonoids）
两个苯环通过三碳链连接而成（C6-C3-C6）的化合 物。多有酚－OH，有一定酸性。
HO HO
O
O
黄芩素 (baicalein)
CH3O CH3O