中药金银花提取物抗炎作用研究

注 : ①3 3 表示与生理盐水组比较差异极显著 ( P < 0. 01) , 3 表示与生理盐水组比较差异显著 ( P < 0. 05) 。下同 。
3 结果与分析 3. 1 腹腔注射金银花对大白鼠足跖肿胀的影响 从表 1 可见 ,金银花组在 10～60 min 内 ,大鼠足跖 肿胀度均小于与阴性对照组 ,差异显著 ( P < 0. 05) 。 在第 10～40 min 内 ,金银花组大鼠的足跖肿胀度大 于阳性对照 ,对大鼠足跖肿胀的抑制率小于阳性对 照组 ,金银花的抗炎作用没有地塞米松作用明显 ;但 在第 50～60 min 内 ,金银花组大鼠的足跖肿胀度小 于阳性对照 ,对大鼠足跖肿胀的抑制率高于阳性对照 组 ,金银花的抗炎作用好于地塞米松 。整个试验期 内 ,金银花组与阳性对照组差异不显著 ( P > 0. 05) 。
从大鼠足跖肿胀的变化情况来看 ,阴性对照生 理盐水组 ,在注入蛋清后第 20 min 肿胀度达最大 , 以后随着时间的延长肿胀度逐渐下降 ;阳性对照组 在第 40 min ,肿胀度达到最大 ;金银花组与阴性对
照组相同 ,在第 20 min 肿胀度达到最大 。由此说 明 ,腹腔注射地塞米松 ,大鼠炎症出现时间晚 ,而腹 腔注射金银花大鼠炎症出现的时间与阴性对照没有 区别 。从整体作用效果来看 ,在第 10～60 min 内地 塞米松对大鼠足跖肿胀的抑制率由高到低呈减弱趋 势 ,抗炎作用逐渐减弱 ;而金银花组则大体呈由低到 高的增强趋势 ,抗炎作用逐渐增强 。
抑制率 ( %)
0. 98 ±0. 30
-
0. 52 ±0. 08 3 0. 52 ±0. 21 3
47. 2 47. 2
90 min
肿胀度 ( ml)
0. 78 ±0. 14 0. 51 ±0. 07 0. 48 ±0. 22 3
抑制率 ( %) -
35. 2 38. 3
3. 2 外敷金银花醇提物对大白鼠足跖肿胀的影响 从表 2 可见 , 金银花组 和皮 炎平 组 , 在 30 ～ 90 min 大鼠足跖肿胀度均明显小于生理盐水组 ,金银 花组与皮炎平组差异不显著 ( P > 0. 05) ;在第 60～ 90 min 金银花组与生理盐水组相比 ,差异显著 ( P < 0. 05) 。对大鼠足跖肿胀的抑制率金银花组在第 30 min 低于皮炎平组 ,在第 60 min 与阳性对照相同 , 在第 90 min 高于阳性对照 。从试验结果分析可见 , 外用金银花与外用皮炎平抗炎效果相当 ,两者无显 著差异 。在早期 ,皮炎平抗炎效果略好于金银花 ;在
组别
10 min
肿胀度 抑制率
20 min 肿胀度 抑制率
30 min 肿胀度 抑制率
40 min 肿胀度 抑制率
50 min 肿胀度 抑制率
60 min 肿胀度 抑制率
( ml)
( %)
wk.baidu.com
( ml)
( %)
( ml)
( %)
( ml)
( %)
( ml)
( %)
( ml)
( %)
生理盐水组 0. 66 ±0. 07 - 0. 73 ±0. 09 - 0. 68 ±0. 12 - 0. 60 ±0. 08 - 0. 50 ±0. 06 - 0. 42 ±0. 06 -
肿胀急性炎症模型 ,分别采用腹腔注射法和外敷法观察金银花提取物对炎症反应的抑制作用 。腹腔注射法以 5 %地塞米松作 为阳性对照 ;外敷法以皮炎平为阳性对照 ;均以生理盐水作为阴性对照 。结果表明 ,金银花提取物对蛋清引起的局部急性炎 症有明显的抑制作用 。为金银花的开发和临床应用提供了试验依据 。
抑制率 ( %) = [ (对照组平均肿胀度 - 给药组平 均肿胀度) / 对照组平均肿胀度 ] ×100 % 2. 3 外敷法对大白鼠蛋清性足跖肿胀的抑制作用 Wistar 大白鼠 30 只 ,随机分成 3 组 ,第 1 组生理 盐水组 ,作为阴性对照 ;第 2 组皮炎平软膏组 ,作为
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(上海隆拓仪器设备有限公司) ,索氏回流提取器 ,大 白鼠足容积毛细管放大测量装置 (自制) 。 2 方法 2. 1 金银花提取物的制备 根据药典 (2005) 记载 , 提取金银花的主要有效成分绿原酸和木犀草苷 。将 金银花放于恒温干燥箱 50 ℃、24 h 烘干 ,准确称取 干燥的金银花 20 g ,粉碎后过 60 目标准筛 , 加入 57 %乙醇 50 ml ,60 ℃水浴作用 4 h ; 600 W 、超声 1 s 、间隙 5 s 超声波细胞粉碎机作用 10 min (丁既鹏 等 ,2005) ;加入 250 ml 沸腾的三蒸水 ,搅拌提取 10 min 后过滤 ,收集滤液 ,重复一次 ,合并滤液 (赵钟兴 等 ,2004) ;60 ℃水浴 、索氏回流提取器回流提取2 h , 60 ℃水浴真空旋转蒸发至 20 ml ,所得提取物浓度 相当于每毫升 1 g 生药 。115 ℃、15 min 高压灭菌 , 4 ℃冰箱保存备用 。 2. 2 腹腔注射法对大白鼠蛋清性足趾肿胀的抑制 作用 Wistar 大白鼠 30 只 ,雌雄各半 ,随机分成 3 组 ,第 1 组为生理盐水组 ,作为阴性对照 ;第 2 组为 地塞米松组 ,作为阳性对照 ;第 3 组为金银花组 。各 组在注射完相应药物后 1 h ,每只大白鼠右后足掌 皮内注入 10 %新鲜鸡蛋清 0. 1 ml 。在注入蛋清前 及注入后第 10 、20 、30 、40 、50 、60 min ,测定右后足 容积 ,计算 其肿 胀度 。用药 剂 量 为 地 塞 米 松 5. 0 mg/ kg 体重 , 金银花 100 mg/ kg 体重 ( 吕世明等 , 2001) 。通过抑制率计算药物的抗炎效果 (舒孝顺 等 ,2006) ,公式如下 :
地塞米松组 0. 26 ±0. 10 33 60. 7 0. 32 ±0. 09 33 56. 9 0. 33 ±0. 08 33 52. 9 0. 34 ±0. 09 3 42. 6 0. 32 ±0. 10 3 36. 7 0. 31 ±0. 06 26. 8
金银花组 0. 46 ±0. 12 3 30. 5 0. 53 ±0. 10 3 27. 5 0. 49 ±0. 05 3 27. 8 0. 40 ±0. 06 3 32. 2 0. 28 ±0. 13 3 44. 6 0. 20 ±0. 14 3 51. 9
后期金银花抗炎效果略好于皮炎平 。 用 SPSS 统计软件对 3 个处理组进行组间比
较 ,结果显示 :皮炎平组与生理盐水组之间差异极显 著 ( P < 0. 01) ;金银花组与生理盐水组之间差异极显 著 ( P < 0. 01) ;金银花组与皮炎平组无显著差异 ( P > 0. 05) 。由此说明 ,相对于生理盐水 ,外敷皮炎平与外 敷金银花提取物对大鼠的足跖肿胀疗效极显著 ,均具 有显著的抗炎作用 ,且金银花与皮炎平疗效相当 。 4 讨论
多种化学物质 ( 如蛋 清 、甲 醛等) 均可 刺激 大
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鼠 ,导致足跖红肿 。由于炎性渗出引起组织水肿 , 导致炎症局部体积增大 ,测定炎症程度的容积法 就是根据此病理特征建立起来的 。从试验结果可 见 ,腹腔注射和外敷金银花提取物的大鼠 ,足跖肿 胀度均小于阴性对照组 ,差异显著 ,由此可见 ,金 银花 对 蛋 清 性 大 鼠 急 性 炎 症 具 有 明 显 的 抑 制 作用 。
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阳性对照 ;第 3 组外敷金银花提取物 。每只大白鼠 右后足掌皮内注入 10 %新鲜鸡蛋清 0. 1 ml 后 ,立 刻在右后足上涂上药物 ,皮炎平每次涂 20 mg ,金银 花提取物每次 50μl ;在注入蛋清前及注入后第0. 5 、 1. 0 、1. 5 h 测定右后足容积 (每次测定前先擦净足 上药物 ,测完后再立刻涂上药物) ;计算其肿胀度 ,抑
关键词 :金银花 ;抗炎作用 ;动物模型 中图分类号 : S853. 75 文献标识码 :A 文章编号 :167127236 (2008) 0820082203
金银花 ( f los lonicerae j a ponicae) 又名忍冬 、双 花 ,为忍冬科 ( ca p ri rol i aceae) 忍冬属 ( lonicera) 植 物忍冬 ( lonicera j a ponica t h unb) 的干燥花蕾或初 开的花 ,为常用中药 ,应用历史悠久 。药理作用研究 结果表明金银花具有清热解毒 、凉风散热 、保肝利 胆 、抗多种病原微生物 、抗肿瘤 、免疫调节 、降血压 、 降血脂 、清除自由基等作用 ;临床上主要用于多种感 染 、各种炎症 (梁晓天 ,2004) 。为了更加深入 、系统 地研究金银花 ,了解其抗炎免疫作用 ,合理利用药用 资源 ,作者对金银花的抗炎药理活性进行了研究 ,为 其临床应用提供一定的理论依据 。 1 材料 1. 1 试验动物 清洁级成年 Wistar 大白鼠 (270～ 280 g) ,雌雄各半 ,购自河南省实验动物中心 。饲养 环境保持在 25 ℃左右及约 55 %的相对湿度 ,各组大 鼠于试验前禁食 18 h 。 1. 2 药物 金银花 (河南农业大学农学院张重义教 授惠赠 ,产地河南省封丘县) ; 5 %地塞米松 ,批号 : 200704018 ;0. 9 %生理盐水由本实验室提供 ;999 皮 炎平复方醋酸地塞米松乳膏 ,批号 : 0603091 ,每支 (20 g) 含醋酸地塞米松 15 mg 。 1. 3 主要仪器 旋转蒸发器 RE252 (上海青浦沪西 仪器厂) , S H Z2III 型循环水真空泵 (上海仪表供销 公司) ,J Y982III 超声波细胞粉碎机 (上海新芝生物 技术研究所) ,SSY2H24数控不锈钢电热恒温水浴锅
收稿日期 :2008201231 作者简介 :王林青 (1978 - ) ,男 ,河南人 ,硕士生 ,主要从事动物
疫病分子病原学及分子免疫学研究 。 通讯作者 :崔保安 (1948 - ) ,男 ,教授 ,博导 ,主要从事动物疫病
分 子 病 原 学 及 分 子 免 疫 学 研 究 。 Tel : 03712 63558878 , E2mail :baoancui @henau. edu. cn 基金项目 :河南省杰出人才创新基金 (0621002100) 。
用 SPSS 统计软件对 3 个处理组进行组间比 较 ,结果显示 :地塞米松组与生理盐水组之间差异极 显著 ( P < 0. 01) ;金银花组与生理盐水组之间差异 极显著 ( P < 0. 01) ;金银花组与地塞米松组之间差 异不显著 ( P > 0. 05) 。由此说明 ,相对于生理盐水 , 腹腔注射地塞米松和金银花提取物对大鼠的足跖肿 胀疗效极显著 ,具有显著的抗炎作用 ,且金银花的疗 效与地塞米松相比没有显著差别 。
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中药金银花提取物抗炎作用研究
王林青1 ,崔保安1 ,2 ,张红英1 ,2 ,高文明1 ,李双亮1
(1. 河南农业大学牧医工程学院 ,郑州 450002 ; 2. 河南省食品安全重点实验室 ,郑州 450002)
摘要 :为研究金银花提取物对大鼠急性炎症的抗炎作用 ,了解金银花的抗炎免疫作用 ,本试验采用鸡蛋清致大白鼠足跖
表 2 各试验组对大白鼠蛋清性足跖肿胀的抑制作用
组别
生理盐水组 皮炎平组 金银花组
动物数量 (只)
10 10 10
30 min
肿胀度 ( ml)
0. 81 ±0. 02 0. 52 ±0. 10 3 0. 55 ±0. 26
抑制率 ( %) -
35. 9 31. 9
60 min
肿胀度 ( ml)
制率按 2. 2 公式计算 。 2. 4 数据分析 试验数据用 SPSS11. 5 软件进行 处理 。组间数据选用 One2Way ANOVA 单因素方 差统计分析 ,利用 L SD 、Duncan’s 进行多重比较和 组间比较 ,数据以 x ±s 表示 。
表 1 各试验组对大白鼠蛋清性足跖肿胀的抑制作用 (n = 10 ,x ±s )