精 液
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是检测抗精子抗体最经典的方法 （1）试管-玻片凝集试验 （2）明胶凝集试验 （3）浅盘凝集试验 结果：用（1）（2）（3）无凝集（或观察10
个Hp有6个以上无凝集表示生育力正常）
抗原结合位点AsAb与SP ——免疫结合
头--头； 头--尾； 尾--尾； 混合型凝集
精子凝集模拟图
2．精子制动试验
临床意义clinical significance：临床上常将PCT 作为检测免疫性不育的初筛试验，PCT 取决于精子与宫颈黏液的相互作用，任 何一方异常均可影响其结果。
———————————————
女方因素
———————————————
1．时间选择不当 非排卵期检查
2．内分泌异常
不排卵
3．性功能障碍
人精子形态模式图
Anatomy of Spermatozoon
头部：轮廓规则，顶体清
楚，顶体帽至少覆盖 头部表面的1/3。头长 4.0 ～ 5.0μm ， 宽 2.5～3.0μm。
中段：细长，不超过头宽
1/3，轮廓直而规则， 长约5～7μm，宽1μm。
尾部：细长，弯而不卷曲，
一般长约50～60μm。
评价：方法简单，影响因素少，可大批测定，可 判断异常在男方或女方，取决于精子质量和宫 颈黏液或其他介质的性质和试验时的温度。
正常：1小时后于5cm处，取出置显微镜下观察， 正常精子大于10个。下一张
毛细管-精子穿透试验装置 返回
（4）精子-宫颈黏液玻片穿透试验
Miller-Kurzrok 试验图
返回
（3）生精细胞 spermatogenic cell 、精原、 初级精母、次极精母、精子细胞。
正常时少量，当曲细精管的生精能力受到损害时， 精液中可出现较多的病理性幼稚细胞。
（4）其他成分 红细胞（极少）—— 血精症、睾丸瘤、前列腺瘤 白细胞（小于等于5个/HP）—— 生殖道炎症 癌细胞 —— 输精管恶性肿瘤
相差显微镜观察≥50%的活动精子头部 结合有免疫球蛋白有明显诊断意义。
4．混合免疫球蛋白试验MAR
吸附人Ig G乳胶颗粒 + 新鲜精液 或绵羊红细胞 （标本）
混合 + 抗人IgG
混合凝集 （胶乳颗粒和活动精子） 10%~50%的精子与颗粒黏附，疑为免疫性不育 ≥50%的精子与颗粒黏附，为免疫性不育
—————————————————————
（3）精子毛细管穿透试验
capillary tube sperm penetration
方法：将含有宫颈黏液的毛细玻管插入精液池中， 在一定时间内观察精子穿透介质中向前运动的 距离及该距离的活动精子数目，用以判断精子 的穿透能力图
结果：根据对穿透高度、穿透密度和活动力三项 指标判断
精子缺乏症:若仅见少量精子，常规精子记数低 于20×109/L或一次射精精子总数低于400万。
1．精子活力：
（1）活率sperm activity rate ： 指或精子的数目， 是测定活精子/死精子的定量方法。
（2）活动力sperm motillity ：指活动精子的质量 和活动率。精子向前运动的能力。
5.免疫标记法
（1免疫荧光的抗球蛋
白反应试验
（二）精浆免疫球蛋白测定
正常
IgA 90.3±57.7mg/L； 升 高 见 于 生 殖 系 炎 症
IgM 2.3±1.9mg/L ；升高见于AsAb阳性者
IgG28.6±16.7mg/L
；
IgE 只参加变态反应，与免疫不孕、流产无关。
酶单位定义：每毫升精浆在37℃与基质作用15 分钟，产生1mg酚者为1U
临床意义：
正常 下降
48.8~208.6U/ml 见于前列腺功能低下
明显增加 用于诊断前列腺癌有重要意义
2．乳酸脱氢酶同工酶X活力测定
（lactate dehydrogenase-x, LDH-X）
临床意义：正常相对活性大于等于 42.6%（LD-X/LD），减低或消失见 于睾丸萎缩、精子生成缺陷及少精或 无精症。
四．精液检查的目的
aim of semen examination
1．评估男性的生育功能 2．男性绝育后效果观察 3．男性生殖系统某些疾病的诊断 4．人工受精的优质精子的筛选 5．法医学检查
五、标本采集specimen collection
1．采集方法collection method
（1）手淫法，采集精液最好的方法
七 、精液的生化检查
chemical examination
（一）果糖测定 是精子能量的主要来源 临床意义： 正常大于8.3mmol/L，减低见于精 囊炎、雄激素分泌不足，为0见于先天 性输精管阻塞性无精症。
（二）酶类enzyme
1．酸性磷酸酶（acid phosphatase ,ACP) 来自前列腺
sperm immobilization test,SIT
抗体（IgG，IgM）+ 精子表面抗原
激活补体
精子失去活力 精子制动值= C/T
C:阴性对照孔活动精子百分比 T:实验孔活动精子百分比
正常：精子制动值＜2，≥2为阳性，结果可靠， 特异性强
3．免疫珠试验：
正常参考：免疫珠黏附率＜20%
相差显微镜观察≥20%的活动精子头部 结合有免疫球蛋白为阳性。
（2）取精器，电按摩法
（3）体外射精法
（4）前列腺按摩 2．注意事项announcements （1）采集前必须禁欲3~5天 （2）标本采集后，应立即送检，存放时间不得超过 1小时，温度25~35℃。 （3）因精子数量变化范围很大，不能仅凭一次分析 结果做出判断，应间隔1~2周进行复查，反复2~3次 方能判断。
Figure 16.3 Slide 16.3A
睾丸曲细精管内 的生精细胞
垂体 前叶
精原细胞
初级精母 细胞
次级 精母 细胞
精子
精子细胞
三．精液的组成及作用
精液semen
（PH碱性）
精子sperm约5% 精浆seminal plasma约95%
精浆
精囊液 50~65% 前列腺液 30~34% 睾丸、附睾、输精管、尿道旁腺、 尿道球旁腺分泌
3．粘稠度和液化 液化时间：是指新排出的精液从胶冻状转变
为自由流动状态所需的时间，称为精子液化时间。
25℃~35℃室温正常30分钟液化； 1小时仍不液化的精液应视为异常；
24小时不液化，则不需做显微镜检查，直接报 告液化时间异常。
粘稠度：正常情况下新排出的精液迅速凝成胶
冻状，然后逐渐液化，完全液化以后的黏度即 精液的粘稠度。
阴道痉挛
4．宫颈疾病
炎症、粘连、囊肿、手术史
5．黏液异常
粘滞度大、酸性黏液、脓细胞
6．免疫因素
抗精子抗体
—————————————————————
男方因素
—————————————————————
1．性功能障碍 阳痿、逆行射精
2．精液异常 3．免疫因素
精子密度低、活动差、畸形精子 精浆或精子表面结合有抗精子的抗体
（三）精浆免疫抑制物测定
(seminal plasma immunionhibition material,SPIM)
能抑制机体对精子的免疫反应， 保持受精卵免受排斥反应，使得正常 的生殖生理过程能顺利进行。
活力下降见于精索静脉曲张，生殖系 非特异性感染，及使用某些抗代谢药物、 抗疟药、氧化氮芥等，过度饮酒、吸烟、 慢性疾病、身体虚弱。
2．精子密度sperm density
可用精子浓度和总数表示。
浓度（1）粗略估计法： HP观察5个视野，取平均数×109/L ，
如平均50个/5个视野，则精子密度为 50×109/L。
4．精子穿透试验：hemizona assay
正常精子
穿透女性生殖道分泌物
运行到达受精部位，获能和顶体反应
穿透卵细胞的放射冠、透明带、细胞膜 使卵细胞受精
受精
方法：体内穿透试验；体外穿透试验
（1）体内穿透试验又名性交后试验
(post coital test,PCT)
正常值reference interval：2~8小时宫颈管内活 动精子可见25/HP个以上，宫颈内口可 见10/HP个以上。
4．pH
方法： 精密pH试纸 正常：精液pH呈弱碱性，为7.2~7.8 pH 小于7：慢性感染性疾病 pH大于8：附属性腺或附睾有急性感染性
疾病
（二）显微镜检查microscopic examination
镜检前应将液化的标本充分混匀 LP观察有无 精子，是否运动 若无 离心后重复一次
若二次全片都无，则报告无精子勿需做显微镜检 查。
六．精液一般检查general examination of
spermatic fluid
（一）精液一般性状检查
1．量
正常 2~6ml，平均3.5ml。 小于 1ml，视精液减少、无精症，见于精囊腺和前 列腺病变。 大于 8ml，精子浓度低。
2．外观和气味
气味正常有粟花和石楠花刺激性腥味，是由前列 腺产生。
WHO把精子的活动力分为4级。 d极：不活动，无向前运动。 c极：活动不良，向前运动微弱 b极：活动一般，有中等向前运动 a极：活动良好，向前运动活跃
按活动力分极标准计算出各极活动力精子的百分比
正常情况下normal condition: 活率：正常排精后60min，≥75% 活动力：正常排精后60min，a级精子>25% 临床意义clinical significance：
下降，见于睾丸生精功能低下， 先天性或后天性睾丸、输精管和射精 管疾病，精索静脉曲张，男性绝育手 术后。
3．精子细胞形态学检查
sperm morphology
（1）正常精子 形态: 正常在精液中占80%。 （2）畸形精子:头部形状、大小异常；体部异 常、尾部异常。
意义：正常畸形精子小于30%。畸形精子数增 加见于生殖系感染、精索静脉曲张引起精子的 生长发育不良、雄性激素水平异常、某些化学 药物如硝基呋喃妥英、遗传因素或全身营养状 况欠佳也可影响睾丸生精功能，导致畸形精子 增多。下一张
37℃，30分钟，观察呈指状突起后呈扇形散开。 玻片穿透试验判断标准
————————————————————————
精子数（HP）
视野 ————————————————
优
良
差
阴性
————————————————————————
F1 16~25 6~15 1~5
0
F2 11~25 2~10 1
0
——————————————————————— 下一张
精子-宫颈黏液玻片穿透试验示意图 返回
（5）去透明带仓鼠卵-精子穿透试验
zone-free-hamster egg penetration assay 或 aperm penetration
assay,SPA
方法： 评价： 临床意义：
卵子受精率=受精卵子数/卵子总数 受精指数=穿入卵子的精子总数/卵子总数 正常参考值： 卵子受精率≥10% 受精指数≥5
er
一．概述
overview
Male Reproductive System
Figure 16.1 Slide 16.1A
二．精子的生成
睾丸液
精子在睾丸形成后
附睾
70%附睾 2%输精管内 输精管的壶腹部
Blood Testosterone Concentration and Sperm Production
外观正常呈灰白色，厚稠胶冻状，放置一段时间， 自行液化呈半透明乳白色。
血精：精液呈红色、淡红、暗红或酱油色并含有 大量红细胞，见于生殖系统的炎症、肿瘤或结 核、结石所致。
血精症： 脓精症：又称白细胞精子症。当精液镜检时发
现白细胞大于5/HP或白细胞计数大于1×109/L ，
称为脓精症，因精囊或生殖系统炎症、感染化 脓、精液排出时脓细胞伴随而下所致。
临床意义：正常相对活性≥42.6%， 减低或消失见于睾丸萎缩、精子生成 缺陷及少精或无精症。
3．顶体酶活力acrosin :
参考值：苯甲酰精氨酸乙酯BAEE-ADH法 36.72±21.43U/L
临床意义：判断男性生殖能力的弱强
八：免疫学检查immunologic examination
(一)血清、生殖道分泌物抗精子抗体的检查 1．精子凝集试验sperm agglutination test
（ 2）精确计数法：
0.38稀释液
加20ul精液（待精液液化后） 充分摇匀
计数池静置1~2分钟 以精子头部为准计数，中央大方格内四角和中央
N×20×5×10×106 精子总数=精子数/L×精液量（ml）/103
正常：密度（50~100）×109/L 总数（40~60）×106/一次
临床意义clinical significance：
个Hp有6个以上无凝集表示生育力正常）
抗原结合位点AsAb与SP ——免疫结合
头--头； 头--尾； 尾--尾； 混合型凝集
精子凝集模拟图
2．精子制动试验
临床意义clinical significance：临床上常将PCT 作为检测免疫性不育的初筛试验，PCT 取决于精子与宫颈黏液的相互作用，任 何一方异常均可影响其结果。
———————————————
女方因素
———————————————
1．时间选择不当 非排卵期检查
2．内分泌异常
不排卵
3．性功能障碍
人精子形态模式图
Anatomy of Spermatozoon
头部：轮廓规则，顶体清
楚，顶体帽至少覆盖 头部表面的1/3。头长 4.0 ～ 5.0μm ， 宽 2.5～3.0μm。
中段：细长，不超过头宽
1/3，轮廓直而规则， 长约5～7μm，宽1μm。
尾部：细长，弯而不卷曲，
一般长约50～60μm。
评价：方法简单，影响因素少，可大批测定，可 判断异常在男方或女方，取决于精子质量和宫 颈黏液或其他介质的性质和试验时的温度。
正常：1小时后于5cm处，取出置显微镜下观察， 正常精子大于10个。下一张
毛细管-精子穿透试验装置 返回
（4）精子-宫颈黏液玻片穿透试验
Miller-Kurzrok 试验图
返回
（3）生精细胞 spermatogenic cell 、精原、 初级精母、次极精母、精子细胞。
正常时少量，当曲细精管的生精能力受到损害时， 精液中可出现较多的病理性幼稚细胞。
（4）其他成分 红细胞（极少）—— 血精症、睾丸瘤、前列腺瘤 白细胞（小于等于5个/HP）—— 生殖道炎症 癌细胞 —— 输精管恶性肿瘤
相差显微镜观察≥50%的活动精子头部 结合有免疫球蛋白有明显诊断意义。
4．混合免疫球蛋白试验MAR
吸附人Ig G乳胶颗粒 + 新鲜精液 或绵羊红细胞 （标本）
混合 + 抗人IgG
混合凝集 （胶乳颗粒和活动精子） 10%~50%的精子与颗粒黏附，疑为免疫性不育 ≥50%的精子与颗粒黏附，为免疫性不育
—————————————————————
（3）精子毛细管穿透试验
capillary tube sperm penetration
方法：将含有宫颈黏液的毛细玻管插入精液池中， 在一定时间内观察精子穿透介质中向前运动的 距离及该距离的活动精子数目，用以判断精子 的穿透能力图
结果：根据对穿透高度、穿透密度和活动力三项 指标判断
精子缺乏症:若仅见少量精子，常规精子记数低 于20×109/L或一次射精精子总数低于400万。
1．精子活力：
（1）活率sperm activity rate ： 指或精子的数目， 是测定活精子/死精子的定量方法。
（2）活动力sperm motillity ：指活动精子的质量 和活动率。精子向前运动的能力。
5.免疫标记法
（1免疫荧光的抗球蛋
白反应试验
（二）精浆免疫球蛋白测定
正常
IgA 90.3±57.7mg/L； 升 高 见 于 生 殖 系 炎 症
IgM 2.3±1.9mg/L ；升高见于AsAb阳性者
IgG28.6±16.7mg/L
；
IgE 只参加变态反应，与免疫不孕、流产无关。
酶单位定义：每毫升精浆在37℃与基质作用15 分钟，产生1mg酚者为1U
临床意义：
正常 下降
48.8~208.6U/ml 见于前列腺功能低下
明显增加 用于诊断前列腺癌有重要意义
2．乳酸脱氢酶同工酶X活力测定
（lactate dehydrogenase-x, LDH-X）
临床意义：正常相对活性大于等于 42.6%（LD-X/LD），减低或消失见 于睾丸萎缩、精子生成缺陷及少精或 无精症。
四．精液检查的目的
aim of semen examination
1．评估男性的生育功能 2．男性绝育后效果观察 3．男性生殖系统某些疾病的诊断 4．人工受精的优质精子的筛选 5．法医学检查
五、标本采集specimen collection
1．采集方法collection method
（1）手淫法，采集精液最好的方法
七 、精液的生化检查
chemical examination
（一）果糖测定 是精子能量的主要来源 临床意义： 正常大于8.3mmol/L，减低见于精 囊炎、雄激素分泌不足，为0见于先天 性输精管阻塞性无精症。
（二）酶类enzyme
1．酸性磷酸酶（acid phosphatase ,ACP) 来自前列腺
sperm immobilization test,SIT
抗体（IgG，IgM）+ 精子表面抗原
激活补体
精子失去活力 精子制动值= C/T
C:阴性对照孔活动精子百分比 T:实验孔活动精子百分比
正常：精子制动值＜2，≥2为阳性，结果可靠， 特异性强
3．免疫珠试验：
正常参考：免疫珠黏附率＜20%
相差显微镜观察≥20%的活动精子头部 结合有免疫球蛋白为阳性。
（2）取精器，电按摩法
（3）体外射精法
（4）前列腺按摩 2．注意事项announcements （1）采集前必须禁欲3~5天 （2）标本采集后，应立即送检，存放时间不得超过 1小时，温度25~35℃。 （3）因精子数量变化范围很大，不能仅凭一次分析 结果做出判断，应间隔1~2周进行复查，反复2~3次 方能判断。
Figure 16.3 Slide 16.3A
睾丸曲细精管内 的生精细胞
垂体 前叶
精原细胞
初级精母 细胞
次级 精母 细胞
精子
精子细胞
三．精液的组成及作用
精液semen
（PH碱性）
精子sperm约5% 精浆seminal plasma约95%
精浆
精囊液 50~65% 前列腺液 30~34% 睾丸、附睾、输精管、尿道旁腺、 尿道球旁腺分泌
3．粘稠度和液化 液化时间：是指新排出的精液从胶冻状转变
为自由流动状态所需的时间，称为精子液化时间。
25℃~35℃室温正常30分钟液化； 1小时仍不液化的精液应视为异常；
24小时不液化，则不需做显微镜检查，直接报 告液化时间异常。
粘稠度：正常情况下新排出的精液迅速凝成胶
冻状，然后逐渐液化，完全液化以后的黏度即 精液的粘稠度。
阴道痉挛
4．宫颈疾病
炎症、粘连、囊肿、手术史
5．黏液异常
粘滞度大、酸性黏液、脓细胞
6．免疫因素
抗精子抗体
—————————————————————
男方因素
—————————————————————
1．性功能障碍 阳痿、逆行射精
2．精液异常 3．免疫因素
精子密度低、活动差、畸形精子 精浆或精子表面结合有抗精子的抗体
（三）精浆免疫抑制物测定
(seminal plasma immunionhibition material,SPIM)
能抑制机体对精子的免疫反应， 保持受精卵免受排斥反应，使得正常 的生殖生理过程能顺利进行。
活力下降见于精索静脉曲张，生殖系 非特异性感染，及使用某些抗代谢药物、 抗疟药、氧化氮芥等，过度饮酒、吸烟、 慢性疾病、身体虚弱。
2．精子密度sperm density
可用精子浓度和总数表示。
浓度（1）粗略估计法： HP观察5个视野，取平均数×109/L ，
如平均50个/5个视野，则精子密度为 50×109/L。
4．精子穿透试验：hemizona assay
正常精子
穿透女性生殖道分泌物
运行到达受精部位，获能和顶体反应
穿透卵细胞的放射冠、透明带、细胞膜 使卵细胞受精
受精
方法：体内穿透试验；体外穿透试验
（1）体内穿透试验又名性交后试验
(post coital test,PCT)
正常值reference interval：2~8小时宫颈管内活 动精子可见25/HP个以上，宫颈内口可 见10/HP个以上。
4．pH
方法： 精密pH试纸 正常：精液pH呈弱碱性，为7.2~7.8 pH 小于7：慢性感染性疾病 pH大于8：附属性腺或附睾有急性感染性
疾病
（二）显微镜检查microscopic examination
镜检前应将液化的标本充分混匀 LP观察有无 精子，是否运动 若无 离心后重复一次
若二次全片都无，则报告无精子勿需做显微镜检 查。
六．精液一般检查general examination of
spermatic fluid
（一）精液一般性状检查
1．量
正常 2~6ml，平均3.5ml。 小于 1ml，视精液减少、无精症，见于精囊腺和前 列腺病变。 大于 8ml，精子浓度低。
2．外观和气味
气味正常有粟花和石楠花刺激性腥味，是由前列 腺产生。
WHO把精子的活动力分为4级。 d极：不活动，无向前运动。 c极：活动不良，向前运动微弱 b极：活动一般，有中等向前运动 a极：活动良好，向前运动活跃
按活动力分极标准计算出各极活动力精子的百分比
正常情况下normal condition: 活率：正常排精后60min，≥75% 活动力：正常排精后60min，a级精子>25% 临床意义clinical significance：
下降，见于睾丸生精功能低下， 先天性或后天性睾丸、输精管和射精 管疾病，精索静脉曲张，男性绝育手 术后。
3．精子细胞形态学检查
sperm morphology
（1）正常精子 形态: 正常在精液中占80%。 （2）畸形精子:头部形状、大小异常；体部异 常、尾部异常。
意义：正常畸形精子小于30%。畸形精子数增 加见于生殖系感染、精索静脉曲张引起精子的 生长发育不良、雄性激素水平异常、某些化学 药物如硝基呋喃妥英、遗传因素或全身营养状 况欠佳也可影响睾丸生精功能，导致畸形精子 增多。下一张
37℃，30分钟，观察呈指状突起后呈扇形散开。 玻片穿透试验判断标准
————————————————————————
精子数（HP）
视野 ————————————————
优
良
差
阴性
————————————————————————
F1 16~25 6~15 1~5
0
F2 11~25 2~10 1
0
——————————————————————— 下一张
精子-宫颈黏液玻片穿透试验示意图 返回
（5）去透明带仓鼠卵-精子穿透试验
zone-free-hamster egg penetration assay 或 aperm penetration
assay,SPA
方法： 评价： 临床意义：
卵子受精率=受精卵子数/卵子总数 受精指数=穿入卵子的精子总数/卵子总数 正常参考值： 卵子受精率≥10% 受精指数≥5
er
一．概述
overview
Male Reproductive System
Figure 16.1 Slide 16.1A
二．精子的生成
睾丸液
精子在睾丸形成后
附睾
70%附睾 2%输精管内 输精管的壶腹部
Blood Testosterone Concentration and Sperm Production
外观正常呈灰白色，厚稠胶冻状，放置一段时间， 自行液化呈半透明乳白色。
血精：精液呈红色、淡红、暗红或酱油色并含有 大量红细胞，见于生殖系统的炎症、肿瘤或结 核、结石所致。
血精症： 脓精症：又称白细胞精子症。当精液镜检时发
现白细胞大于5/HP或白细胞计数大于1×109/L ，
称为脓精症，因精囊或生殖系统炎症、感染化 脓、精液排出时脓细胞伴随而下所致。
临床意义：正常相对活性≥42.6%， 减低或消失见于睾丸萎缩、精子生成 缺陷及少精或无精症。
3．顶体酶活力acrosin :
参考值：苯甲酰精氨酸乙酯BAEE-ADH法 36.72±21.43U/L
临床意义：判断男性生殖能力的弱强
八：免疫学检查immunologic examination
(一)血清、生殖道分泌物抗精子抗体的检查 1．精子凝集试验sperm agglutination test
（ 2）精确计数法：
0.38稀释液
加20ul精液（待精液液化后） 充分摇匀
计数池静置1~2分钟 以精子头部为准计数，中央大方格内四角和中央
N×20×5×10×106 精子总数=精子数/L×精液量（ml）/103
正常：密度（50~100）×109/L 总数（40~60）×106/一次
临床意义clinical significance：