动物实验设计与实施

四、准备研究方案
1、示意性的实验设计，包含了实验过程中的各种处理 2、对实验操作过程的解说和测量方法的描述 3、简述可能对动物造成的不适
4、应用动物的例数和所用的统计学方法都应当加以说明
5、简述实验准备情况，包括准备的方法、过程和分析的资 料
6、实验中的一些实际情况：人员需求、实验负责人姓名、 所需经费
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假说提出的一般过程： 1、观察和记录所有相关的信息（包括研究者已开展的初步实验结果） 2、分析和归类这些信息 3、在这些信息的基础上提出假说
三、选择研究材料
主要是用于制作实验需要的动物模型 注意：需要特殊品种品系的动物进行实验时，尤其是需要 从国外进口相关实验动物进行动物实验时一定要提前做工 作，否则会给实验带来很多负面影响。
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பைடு நூலகம்
实验动物的准备
应注意以下几个问题： 1、购入或领取实验动物前，应进行各项计划的核实，检查各项实验前的 准备工作，如动物笼盒数量、饲养室卫生及消毒情况。 2、购入或领取实验动物时，应向供应部门索取所用动物的遗传背景和微 生物控制质量资料、以及动物品系、年龄、体重、胎次等资料。
3、根据实验观察时间长短的需要，同时购入或领取相应数量的饲料和垫 料。
例：外源基因转染的细胞体内移植研究测定方法：
细胞和亚细胞水平：光镜和电镜观察
整体水平：测定体液的生理生化指标 RNA水平： • 原位杂交法测定mRNA • RT-PCR法半定量测定RNA表达量 • Northern法定量测定。 蛋白水平： • 免疫组化与生物体视学结合 • Western blotting定量测定 • Elisa法测蛋白活性
实验方法的选定
• 实验方法按学科可分为生理学方法、生物化学方法、生物物理方法、 免疫学方法等；
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按性质可分为形态学方法、机能学方法
按范围可分为整体综合方法和局部分析方法 按水平分：整体水平、器官水平、细胞水平、亚细胞水平、分子水 平和量子水平等。
无论选用何种实验方法，均应保证以下几点: • • • 可靠性：即切实可行，稳定可靠，是大家公认的方法，也即是经典方 法。 优越性：指实验方法既具先进的一面，又便于与其它实验方法相互配 合，故也称先进性和协同性。 创造性：即实验方法的创新和改良。
3、创造性：指选题应具有自己独到之处，或提出新规律、新见解、 新技术、新方法，或是对旧有的规律、技术、方法有所修改、补充。
4、可行性：是指选题应切合研究者的学术水平、技术水平和实验 条件，还要结合研究者的工作基础，使实验能够顺利实施。
二、提出假说
• 假说是预先假定的答案或解释，亦既是实验的预期结果。对于动物 实验研究来说，假说是十分必要的。假说是实验研究设计的前提， 如果没有假说，实验和观察就失去目标。假说关系着实验研究的目 的性、计划性和预见性。 对假说既应努力加以验证，又应适时加以抛弃，重新建立新的假说， 再加以验证。这样才有可能使正确的假说上升为结论、原理和学说。 研究者开展动物实验前，应在熟悉有关实验动物理论知识和动物实 验技能的基础上，积极进行逻辑思维，结合实际条件，提出创新性 课题和大胆的假说。
六、预 实 验
是在动物实验前对正式实验进行初步实验。目的在于检查各项准备 工作是否完善，实验方法和步骤是否切实可行，测试指标是否稳定可靠， 初步了解实验结果与预期结果的距离，从而为正式实验提供补充、修正
的意见和经验，是动物实验必不可少的重要环节。预实验可用少量动物
进行，实验方法和观测指标应该和正式实验一样，但预实验的结果不能 归入正式实验的最后结果中一同分析。
4、若是从外地购入动物需长途运输时，还应考虑到途中各种因素对动物 的影响，如运输环境的温度，湿度、饮食。尤其注意途中污染和窒息死 亡以及应激反应等问题。应隔离检疫并提供3周左右的动物适应期。 5、若是购入或领取清洁级以上实验动物，应采用带有空气过滤膜的无菌 运输罐或带有滤帽的笼盒运输，严格检查其密封状况。 6、术前准备：术前3天单笼饲养，术前8－24小时禁食、禁水。
动物实验设计与实施
第一部分：动物实验设计和实施的基本过程
一、选择研究题目
1、广义的选择 2、狭义的选择 3、政府法规需要 正确选题应遵守的几个基本原则； 1、科学性：是指选题应建立在前人的科学理论和实验基础上，而 不是毫无根据的胡思乱想。 2、目的性：指选题应具有明确的理论意义和实践意义，要能解决 具体问题。
八、评估和报告
1、标题和实验者：包括所有参与实验研究的人员。
2、摘要：简要介绍实验研究的目的、实验设计、实验方法和结论。
3、导论：简单地介绍相关的背景知识、国内外类似研究现状，提出可能的 假设。如果假设不成立的话陈述一下预期的结果。
4、材料和方法：
• 实验动物：遗传背景、品种品系（近交系、封闭群或是其它特殊遗 传质量控制）和正确的命名、模型的制作、动物的年龄、性别、体 重、微生物控制等级等。
五、动物实验前的条件准备
主要内容：准备好实验仪器、药品、试剂和实验动物。
实验条件的准备要求是尽可能使实验手段和实验方法标准化。
• 实验仪器必须校准，必须事先熟悉仪器使用方法。a、还要和相关科室 联系，达到部分仪器共享使用的目的。同时注意某些学科不太常用的仪 器设备是否存在，是否会影响实验指标的检测；b、测定动物生理、生 化、生物电和器官功能指标的各种分析仪器和描记仪，如半导体测温计、 动物血压表、多导生理记录仪等设备。 药品的纯度应有明确要求，试剂的配制必须严格遵守操作规程，尤其是 麻醉剂的使用。 器械准备、实验场所消毒与器具配套等也要落实，特殊器械是否准备： 如显微外科或眼科手术器械。
七、实验的详尽方案和实施
1、需要准备一个动物实验的日程表，写上简单明了的实验方案，实 验过程应该描述清楚，注明对实验动物品种、品系的选择，动物的营 养、饲喂方式和时间的选择，样本的采集和安乐死的方式。 2、详细的草案还应该包括实验者、实验动物和实验技术等几个方面 的问题。实验技术如给药途径和方法、术式、麻醉方法和深度、复苏 和抢救措施等。 3、实验结束时收集所有的实验资料，进行各种后续指标的检测，包 括运用数学统计的方法分析处理实验数据。 4、分析结果是否证明了原来的假设。