生化技术名词解释

生化技术名词解释自我整理

1、酶活力：酶催化一定化学反应的能力。

2、酶活力单位：每分钟催化生成一微摩尔产生所需要的酶量为一个酶活力单位。

3、酶的比活力：每毫克酶蛋白所含有的酶活力单位娄，是酶制剂纯度的一个指标

4、回收率：纯化过程中酶活性的收率

5、纯化位数：指提纯后与提纯前酶比活力的比值

6、沉淀：是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程，可以有选择性的沉淀杂质或有效成分。

7、可逆性沉淀：在沉淀过程中，有效成分结构和性质都没发生变化，在适当的条件下，可以重新溶解形成溶液。

8、不可逆沉淀：在强烈沉淀条件下，不仅破坏了蛋白质胶体溶液的稳定性，而且也破坏了蛋白质的结构和性质，产生的蛋白质沉淀物不可能再重新溶解于水溶液。加热沉淀、强酸碱沉淀、重金属盐沉淀、生物碱沉淀。（沉淀物一般是杂质）

9、盐析：在溶液中加入中性盐使生物大分子沉淀析出的过程。

10、层析技术：亦称色谱技术，是一种物理的分离方法。是利用混合物中各组分的物理化学性质的差别，使各组分以不同程度分布在两个相中，其中一个相为固定的(称为固定相)，另一个相则流过此固定相(称为流动相)并使各组分以不同速度移动，从而达到分离。

11、色谱柱：装有固定相的管子（玻璃管或不锈钢管）称为色谱柱

12、固定相：层析的一个基质，可以是固体物质（如吸附剂，凝胶，离子交换剂等），也可以是液体物质（如固定在硅胶或纤维素上的溶液），这些基质能与待分离的化合物进行可逆的吸附，溶解，交换等作用。

13、流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或超临界体等。

14、层析:当流动相中样品混合物经过固定相时，就会与固定相发生作用，由于各组分在性质和结构上的差异，与固定相相互作用的类型、强弱也有差异，因此在同一推动力的作用下，不同组分在固定相滞留时间长短不同，从而按先后不同的次序从固定相中流出。

15、操作容量（交换容量）：在一定条件下，某种组分与基质（固定相）反应达到平衡时，存在于基质上的饱和容量。（数值越大，表明基质对该物质的亲合力越强。）

16、分配系数：在一定条件下，某种组分在固定相和流动相中含量（浓度）的比值。用K表示。

K=溶质在固定相中的浓度/ 溶质在流动相中的浓度= Cs / Cm

凝胶层析，分配系数实质上表示某个组分在内水体积和在外水体积中的浓度分配关系。

17、迁移率（比移值）：在一定条件下，在相同的时间内某一组分在固定相移动的距离与流动相本身移动的距离之比值。用Rf表示。K ↑ → Rf ↓

18、Vt＝Vo＋Vi＋Vg

Vo:外水体积，是指凝胶柱中凝胶颗粒周围空间的体积，也就是凝胶颗粒间液体流动相的体积。即柱床内凝胶颗粒外空隙之间的水相体积。可以通过测定完全排阻的大分子物质的洗脱体积来测定，比如蓝色葡聚糖-2000，分子量为200万，所有型号凝胶都会排阻

Vi：内水体积，是指凝胶颗粒中孔穴的体积，固定相体积就是指内水体积。即凝胶颗粒内部所含水相体积。可用硫酸铵、N-乙酰酪氨酸乙酯或其它与凝胶无吸附力的小分子物质测定。

Vg：基质体积，是指凝胶颗粒实际骨架体积。即凝胶本身的体积。

Vt：床体积，就是指凝胶柱所能容纳的总体积。πr2h。

Ve：洗脱体积是指将样品中某一组分洗脱下来所需洗脱液的体积，即自加入样品时到组分最大浓度峰出现时所流出的体积。

大分子先被洗脱出来，Ve值小，Kav值也小；而小分子后被洗脱出来，Ve值大，Kav值也大。对于完全排阻的大分子，Ve＝Vo，Kav＝0；而对于完全渗透的小分子，Ve＝Vt，Kav＝1。一般Kav值在0－1之间，如Kav值大于1，则表示还有些物质与凝胶有吸附作用，则Ve>Vt 。

19、塔板理论：

假定：

1）塔板之间不连续；

2）塔板之间无分子扩散；

3）组分在各塔板内两相间的分配瞬间达至平衡，达一次平衡所需柱长为理论塔板高度H；

4）某组分在所有塔板上的分配系数相同；

5）流动相以不连续方式加入，即以一个一个的塔板体积加入。

当塔板数n较少时，组分在柱内达分配平衡的次数较少，曲线呈峰形，但不对称；当塔板数n>50时，峰形接近正态分布。

理论塔板数：

可得理论塔板高度H 越小、理论塔板数n 越多、色谱峰越窄，则柱效越高。分离度也大，从而提高了柱效.

20、速率理论：

u 为流动相线速度；A，B，C为常数，其中

A—分别表示涡流扩散系数；

B—分子扩散系数；

C—传质阻力系数（包括液相和固相传质阻力系数）。

20、吸附柱层析：是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相，由于吸附剂对不同物质有不同的吸附力而使混合物分离的一种层析方法

21、薄层层析：以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相，按纸层析操作进行展层的一种层析方法

22、聚酰胺薄膜层析：聚酰胺对极性物质的吸附作用是由于它能和被分离物之间形成氢键。选择适当的展层剂使分离物在聚酰胺膜表面发生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程，就能导致分离物质达到分离目的。

23、疏水层析：是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立起来的层析技术。

24、离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法

25、交联度：每种交联剂在基质中占的百分数

26、吸水量或膨胀度：如葡聚糖凝胶Sephadex: G25，G后面的阿拉伯数字代表凝胶吸水量（毫升水/克干胶）乘以10。

27、交换容量：离子交换剂能提供交换离子的量，它反映离子交换剂与溶液中离子进行交换的能力。

28、凝胶过滤：利用某些化学惰性的多孔网状结构物质(多孔性凝胶填料)为介质,使预分离的混合物质按照分子量大小分别先后流出层析柱，而得以分离、纯化的方法。

29、分组分离是指将样品混合物按分子量大小分成两组，一组分子量较大，另一组分子量较小。例如蛋白样品的脱盐或蛋白、核酸溶液去除小分子杂质，以及一些注射剂去除大分子热源物质等等。

30、分级分离则是指将一组分子量比较接近的组分分开。

31、分配系数与各种体积

对于某一型号的凝胶，在一定的分子量范围内，各个组分的Kav与其分子量的对数成线性关系：Kav＝－b lg MW＋c （其中b、c为常数，MW表示物质的分子量。）Ve和Kav也成线性关系：Ve＝－b’lg MW＋c’（其中b’、c’为常数。）

32、排阻极限：指不能进入凝胶颗粒孔穴内部的最小分子的分子量。

例如Sephadex G-50的排阻极限为30,000，它表示分子量大于30,000的分子都将直接从凝胶颗粒之外被洗脱出来。

33、分级分离范围：表示一种凝胶适用的分离范围，对于分子量在这个范围内的分子，用这种凝胶可以得到较好的线性分离。

例如Sephadex G-75对球形蛋白的分级分离范围为3,000－70,000，它表示分子量在这个范围内的球形蛋白可以通过Sephadex G-75得到较好的分离。

34、吸水率是指1g干的凝胶吸收水的体积或者重量，但它不包括颗粒间吸附的水份。

35、床体积是指1g干的凝胶吸水后的最终体积。

36、亲和层析（affinity chromotography）：利用生物大分子和固定相表面存在某种特异性吸附而进行选择性分离的一种生物大分子分离的层析方法。

37、聚焦层析:在等电点聚焦方法的基础上发展起来的。它是根据蛋白质等电点的差异，结合离子交换技术的大容量色谱，能分离几百毫克蛋白质样品。这一方法既有聚焦作用的性能，又有浓缩样品和分辨率高等优点

38、聚焦效应：蛋白质按其等电点在pH梯度环境中进行排列的过程。

39、多缓冲交换剂：也是一种离子交换剂，带有多种电荷基团的配体载体偶联而制成的。

40、多缓冲剂：是一系列等电点既相异又相近的具有多胺基，多羧基的脂肪链化合物构

成的

41、气相色谱：以气体为流动相。待测物样品被转变为气体后进入到色谱分离柱顶部,以惰性气体（指不与待测物反应的气体，只起运载气化样品的作用，也称载气）将待测物样品（气体）带入柱内进行分离。

42、色谱流出曲线：由检测器输出的电信号强度对时间作图，所得曲线。

43、色谱峰：色谱流出曲线上的突起部分

44、死时间：不被固定相吸附或溶解的物质进入色谱柱时，从进样到出现极大值所需的时间。它正比于色谱柱的空隙体积。

流动相平均线速ū：ū= L/t0r

45、保留时间：试样从进样到柱后出现峰极大点所经过的时间。

46、校正保留时间：某组分的保留时间扣除死时间

tr´= tr - t0r

47、死体积：色谱柱在填充后，柱管内固定相颗粒间所剩留的空间、色谱仪中管路和连