现代色谱在中药中的运用

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现代色谱技术在中药中的应用

摘要:现代色谱技术在中药领域中的应用在近十多年来已取得了很大的进展。本文扼要地介绍了气相色谱、高效液相色谱的特性及功能,同时以大量的实例展示了它们在中药中的应用。

关键词现代色谱技术中药应用

Modern chromatography technology in the application of the traditional Chinese

medicine

Abstract: Modern chromatography technology application in the field of traditional Chinese medicine (TCM) in the past ten years has made great progress.This paper briefly introduces the characteristics and functions of gas chromatography, high performance liquid chromatography (HPLC), at the same time with a large number of examples show their applications in traditional Chinese medicine. Keywords:Modern chromatography technology Chinese medicine application

1.现代色谱技术

色谱法是一种高效能的物理分离技术,它利用混合物中的各组分在互不相容的两相(固定相和流动相)之间的分配差异而使混合物得到分离的一种方法。

从1903年Tswett发表了吸附色谱分离植物色素的论文至今,色谱技术已近百年的发展历史。特别是60年代现代液相色谱技术的问世,使其在生命科学、药物化学、食品卫生、环境化学等诸多领域得到了广泛的应用。经过30多年的发展,现代色谱技术得到了不断的完善和改进。近年来多种高新技术的引用,各类色谱仪器在性能、结构和技术参数等各方面都有了极大的提高。目前比较成熟的色谱仪器主要是气相色谱、高效液相色谱、超临界流体色谱。

色谱法主要包括薄层色谱、纸色谱法、气相色谱、液相色谱、、凝胶色谱、超临界流体色谱、高效毛细管电泳等。色谱法是以其高超的分离能力特点,具有分离效率高、应用范围广、样品用量少、灵敏度高、易于自动化。在中药材和中成药分析中已广泛应用,成为中药质量控制的基本方法。

1.1薄层色谱

薄层色谱法是将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层,待点样、展开后,与适宜的对照物按同法在同板上所得的色谱图作对比,并可用薄层扫描仪进行扫描。TLC 操作简单,具有分离、鉴定双重功能,是中药分析的常用手段。1.2纸色谱法

纸色谱法是一种分配色谱,可用于氨基酸、糖类等水溶性成

分的分析。

1.3气相色谱法(GC)

气相色谱法(GC)是以气体为流动相,分离效率高、样品用量少、分析速度快。适用于分离、鉴别和定量测定挥发性成分。对于挥发性成分的中药,多采用气相色谱法鉴别和测定含量,在大孔吸附树脂溶剂残留检测、中药中农药残留的检测也有大量的应用。

1.4高效液相色谱法(HPLC)

HPLC是在20世纪70年代在经典液相柱色谱的基础上结合气相色谱的理论与技术而发展起来的一种重要的分离分析方法。它具有高效、快速、高灵敏度、色谱柱可以反复使用、分离出的组分易收集、适用范围广等优点,是一种非常有效并普遍实用的中药分析方法,可用于高分子、极性、离子和热不稳定性化合物的分离分析。HPLC在药物的分析中的应用主要是鉴别、有关物质的检查、有效成分及含量的测定。在HPLC法中,药物组分的保留时间与其结构和性质有着直接的关系,不同的药物由于结构和性质的差异在色谱图上的出峰顺序不同,是定性的重要参数,可用于药物的鉴别。如在中国药典收载的药物利福平的鉴别项下规定:在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。由于HPLC分离效能及灵敏度高,在药物的杂质检查中被广泛应用,主要用于药物中有关物质的检查。“有关物质”是指药物中存在的合成原料,中间体,副产物,降解产物等物质,这些物质的结构和性质与药物相似,含量很低,只有采用色谱的方法才能将其分离并检测。

1.5超临界流体色谱

超临界流体可以用作色谱的流动相,使混合物质在色谱柱上

得到分离,这种分离方法被称为超临界流体色谱。超临界流体对物质的溶解能力比一般气体大的,,相当于有机溶剂,但比有机溶剂的扩散速度快、黏度低、表面张力小。超临界流体溶解能力的大小随其压力的变化而改变。由于超临界流体的黏度很低,SFC就可采用比高效液相色谱(HPLC)高的流速,因此具有分析/制备快的优点。SFC作为一种新的分离手段,对天然产物的分离纯化有较大优势,它既不破坏天然产物的活性,又可快速达到分离,是一种高效的分离和制备方法。

1.6高效毛细管电泳(HPCE)

高效毛细管电泳是以高压电场为驱动力,毛细管为分离通道,依据样品中各组分之间分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术,具有分离效率高、速度快、所需样品少、溶剂消耗少和抗污染能力强等特点。HPCE已经日益广泛地应用于中药生药化学成分的分离、鉴别和含量测定,分析成分主要包括生物碱、黄酮、苷类、酚类、有机酸、香豆素、醌类及其它成分。

1.7凝胶电泳

根据蛋白分子大小将其分离,经染色后通过谱带的颜色深浅和数目,作为不同中药材的鉴别依据。适合于肽类、核酸、多糖等大分子化合物的分析鉴定。

2.气相色谱法在中药中的应用

采用GC法对中药(尤其是含挥发性成分的中药)进行定性鉴别定量鉴别,并对其所含有的毒性成分和杂质成分进行分析,对中药的质量控制及安全用药等方面具有重大的实际意义。

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