显微镜的基本结构
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水平 焦平面
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4)场曲(Curvature of Field)
一个垂直于光轴的发光面,由于面上各 点到光轴的距离都不尽相同,即使是每 个都能产生一个清晰的像点,但整个像 面会构成一个曲面。这种像差称为像面 弯曲或场曲。
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5)畸变(Distortion)
畸变是由于透镜在成像过程中对较大的物 体各处的放大率不同而造成的像的形状改 变。
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(2)中倍物镜:由两组双胶合物 镜组成(称为李斯特物镜),放 大率为5~25X,数值孔径为 0.15~0.40,如图(b)。 (3)高倍物镜:由一个前片和两 组双胶合物镜组成(称为阿米 西物镜),放大率为25~65 X, 数值孔径为0.35~0.85,如图 (c)。
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(4)浸液(高倍)物镜:其结构 更为复杂,在高倍物镜的前 片镜和中组镜之间加了一个 正弯月形透镜。物镜使用时 前片必须浸在油或水里,放 大率为90~100X,数值孔径 为1.2~1.5, 如图(d)。
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六.滤光器(即滤色片)
1、使用滤色片的作用: 有利于提高像的衬度和鉴别率。 2、普通滤光片的材料: 普通的滤光片是用有色玻璃制作而成, 在彩色摄影中起色温转换或色彩补偿作用; 在黑白摄影时,使用反差滤光片可使标本色 调对比度增强或减弱。
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常用的配套滤光片有:
(1) 蓝色色温转换滤光片:用来把光源 的色温由3200K转换成日光型彩色底片 所需的5500K色温; (2) 绿色滤光片:用来增强相差观察 方法中成像的反差,或者以黑白底片 作显微照相时,可以提高片成像的反 差;
聚光镜应有与物镜相同或稍大的数值 孔径。 1)对小数值孔径的低倍物镜,可用 一块凹面镜作为聚光镜。 2)对物镜数值孔径较大时,聚光镜 需由多片透镜组成。
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3)在柯拉照明的高倍显微镜中, 应采用消色差聚光镜系统,其光 学结构几乎与高倍物镜一样,只 是焦距长一些,使光束能通过载 物玻璃照亮标本。当需要对视场 光阑成较好的像时,必须采用消 球差、消色差聚光器。
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2)彗差(broom aberration)
彗差的概念:轴外物点发出的宽 阔光束,经透镜成像后,不再交 于一点,而是形成一种状如彗星 的亮斑,称为彗形像差,简称彗 差。 彗差形成的原因:近光轴外的点 光源发出的光束,经过透镜的中 央和边缘部分后在垂直于光轴的 同一成像平面上也不能交于同一 个像点。离光轴越近的像会聚越 好,亮度越大,亮点越小。
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The 3 Classes of Objectives
Chromatic and Mono-Chromatic Corrections
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E.D. Salmon
2.物镜的识别
物镜的特征参数通常刻 于镜头的外壳面,如图 所示。图中,(a)为10倍 物镜,数值孔径为0.25, 机械筒长为160mm,所 用盖玻片为0.17mm;
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可变光栏又叫光圈或虹彩光栏,装于聚 光镜的下方,由十余块金属薄片组成, 中央的通光孔呈圆形,移动可变光栏的 把手,可以任意调节通光孔的大小。
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聚光器的主要参数:
聚光器的主要参数是数值孔径。但它的 数值孔径是可变的---受可变光栏控制。 当光栏孔开大时,数值孔径增大。反之, 则变小。通常刻在聚光器外壳上的数字 是它的数值孔径的最大值,可随光栏的 关小而任意变小,以便与不同数值孔径 的物镜相匹配。
彗差和球差往往混在一起,只有当轴上物点消除时, 才能明显地观察轴外物点的彗差。 18
轴
光轴
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3)像散(Astigmatism)
扭转透镜,使物光束在倾 斜度比较大的条件下入射, 则产生像散现象。 由于物点离主轴较远时, 发出的光束经透镜折射后, 不再交于一点,而是会聚 在与画面垂直方向的前后 两个位置上。 透镜像散随透镜形状、光 阑位置而异,可以用正、 负透镜适当组合而消除。
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3.柯拉照明
柯拉照明可以 解决临界照明 的缺点。利用 柯拉照明可使 标本A得到均 匀照明,如图 所示。
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柯拉照明的工作原理:
1)聚光镜K1将光源的光 会聚经光阑Jl及反射镜后 成像于孔径光阑J2的平面 上。 2)J2与聚光器透镜K2的 前焦点平面重合,从而 使K2射出的平行光照射 到标本A上,使标本得到 均匀照明。
3 E.D.Salmon
Leabharlann Baidu
显微镜的光学系统组成:
1、物镜 2、目镜 3、聚光镜 4、反光镜 5、照明光源 6、滤光片 7、载玻片和盖玻片
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显微镜的机械部件:
1、调焦系统 2、载物台 3、物镜转换器 4、底座 5、镜臂 6、镜筒
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附加装置
附加装置主要是为了满足专门用途的特 殊类型或高级显微镜性能的需要而设置 的。
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显微镜照明系统的基本要求是:
(1)光源的光谱分布最好近似于自然白光。 (2)对物体的照明需要均匀。 (3)被照明物体的照度要适中。光太强,物 体的细节不易分辨,还易损伤眼睛。光太 弱,会看不清细节。通常可通过调节电压 或可变孔径光阑的直径使物体得到适当的 照明。
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(4)光源的发热量不能过多地传递到镜头 和标本,以免造成损害。特别是观察活 标本时,过高的温度会造成活标本的死 亡。
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像差的类别:
根据像差产生的原因和条件,主要 分为: 1)球差 2)彗差 3)像散 4)场曲 5)畸变
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1)球差(Spherical Aberration )
当透镜孔径较大时,由光轴上一物点发出的光束经 球面折射后不再交于一点,这种现象叫做球面像差, 简称球差。 表示出单色平行光入射到大孔径凸透镜,经折射成 像不再会聚于一个像点,产生球差。 球差的改进:球差可以通过设置光阑而减小。
第二节、显微镜的基本结构
显微镜的基本结构包括三大部分: 1. 光学系统; 2. 机械部件; 3. 附加装置。
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显微镜基本结构如图所示:
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Modern microscope component identification
Prisms Used to Re-Direct Light In Imaging Path While Mirrors Are Used in Illumination Path
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(b) 为 100 倍 物 镜 , 数 值 孔 径 为 1.25 , 机械筒长和盖玻片 厚度分别为∞和 0.17mm,“油”表 示油浸物镜。对平 场、消色差或复消 色差等光学性能, 也用特定字符表示 于镜壳上。
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我国显微镜物镜系列技术参数
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Objective Specifications
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色差的类别:
1)轴向色差:同一物点不同颜色光线的 像点沿光轴的位置之差称为轴向色差又 叫做位置色差。
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色差的类别:
2)垂轴色差:由于不同色光成像大小不 一致而造成的成像缺陷称为垂轴色差, 又称为放大率色差。
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(1)消色差物镜(Achromatic objective):
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J2是可调光阑,它的像即光 阑的边界经聚光镜后成像于 标本平面上。当改变可变视 场光阑的大小时,物平面上 的照明范围立即跟着变化, 从而可用来修正聚光器孔径, 降低散射光通量并能提高图 像反差。这种照明方式使物 平面界限清晰、照明均匀, 效果比较满意。
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聚光镜与物镜的搭配:
为使物镜的数值孔径得到充分利用,
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(四)反光镜
反光镜又叫反射镜。安装在聚光器下 面的镜臂上,它有二个反射面:一为 平面,一为凹面。可在水平和垂直两 个方向上任意偏转。它的主要作用是 改变光线的前进方向(凹面镜也有一 定的聚光作用),使光源发出的光线 射向聚光器。
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(五)显微镜的照明系统:
为了使被观测的标本得到充分而均匀的 照明,显微镜备有照明系统,通常由光 源、滤光器、聚光镜、孔径光阑、视场 光阑、聚光器等组成。
特点: 1)外壳上常有“Ach” 字样; 2 )校正 了 轴上 点 的位 置色差(红,蓝二色)、 球 差( 黄 绿 光) 和 正 弦 差 , 保 持 了 齐 明 条 件。
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(2)复消色差物镜 (Apochromatic objective):
特点: 1)透镜采用了特种玻璃或萤石等材料制作 而成,物镜的外壳上标有“Apo”字样; 2)严格地校正轴上点的位置色差(红,蓝 二色)、球差(红,蓝二色)和正弦差, 同时要求校正二级光谱(再校正绿光的位 置色差)。
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物体的照明方式分为以下几种:
反射照明; 2. 临界照明; 3. 柯拉照明。
1.
物体的各种照明方式的特点:
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1 、反射照明
初级生物显微镜的 标本是用自然光经 反射镜后照明,反 射镜分为平面镜与 凹面镜两种,前者 用于配有聚光器的 显微镜,对没有聚 光器的初级生物显 微镜,则必须用凹 面反射镜。
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放大倍数
镜 口 率 盖 玻 片 厚 度
镜筒长度
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(二)目镜:
显微镜的目镜实质上是一 个放大镜,它用来观察被 物镜放大了的像(中间像)。 目镜的结构较物镜简单, 通常由2—6块透镜分两组 或三组组成,筒上端与眼 接触的称接目镜,下端靠 近视野的称会聚透镜或视 野透镜,有放大作用。
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(一)物镜:
物镜是显微镜的核心组成部件,它直接 决定或影响着显微镜的成像质量和光学 性能,人们常将它比喻成显微镜的心脏。
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1.物镜的种类
1)按物镜的放大倍数不同,可分 为以下几类: (1)低倍物镜:它通常由一组双胶 合透镜组成,放大率为3~6X, 数值孔径为0.04 ~ 0.15,如图(a)。
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(3)平场物镜(Plan objective ):
在系统中加入厚弯月形透 镜可校正像面弯曲,这类 物镜称为平场物镜。 与普通物镜相比,它的主 要优点是视场显著增大, 并且工作距离也有所增长。
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Objective Classes
Achromats: corrected for chromatic aberration for red, blue
光圈
反光镜
2.临界照明
如图所示,光源发出的光线经聚光器会聚 在物平面A处,直接照亮被观察的标本。
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但由于光源经聚光器透镜所成的像是和标 本所在平面近于重合, 若光源面亮度不 均匀则影响到物面照明也不均匀,并直接 反应到观察视场内,影响观察,这是临界 照明的缺点。其优点是结构简单,光能损 失少, 常用于普通显微镜。
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2)按物镜对像差和色差的 校正程度不同,分为:
(1)消色差物镜(ACH) (2)复消色差物镜(APO) (3)平场消色差物镜(PLAN ACH) (4)平场半复消色差物镜 (5)平场复消色差物镜( PLAN APO)
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像差和色差的概念:
物体经过透镜后,可望获得一个形状与 原物相似、颜色相同的清晰像。然而, 由于多种因素的影响,使像的形状与理 想的像总是有差别,这种差别,叫像差。 色差是指所成的像与原物在颜色上的差 别。
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在目镜的物方焦面处设置一视场光阑用 以限制物方视场大小,物镜的放大实像 就在这个光阑面上成像,光阑面上可以 安置目镜测微器或目镜指针。
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显微镜常用的目镜有:
惠更斯目镜、冉斯登目镜、补偿 目镜、平场目镜、平场补偿目镜、广 角目镜、摄影负目镜等。
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(三)聚光器
聚光器又叫集光器。安装在镜台下面, 它由聚光镜和可变光栏两个部件组成。 聚光器的作用:会聚光线,用于照亮标 本,其结构如图所示。
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(3) 浅灰色滤光片:是透光率为50%的中 性减光滤光片,可把视野的亮度减弱一 半; (4) 灰色滤光片:是透光率为25%的中性 减光滤光片,可把视野的亮度减弱75%; (5) 透光率仅为6%的中性减光滤光片, 可把视野的亮度变得相当暗,95%以上 的光都已被吸收掉。
Fluorites: chromatically corrected for red, blue; spherically corrected for 2 colors Apochromats: chromatically corrected for red, green & blue; spherically corrected for 2 colors Plan-: further corrected to provide flat field