各类鼻咽癌细胞株特性及来源

各类鼻咽癌细胞株特性及来源

CNE1为鼻咽高分化鳞状细胞癌细胞系;CNE2、HNE1、HNE2、HNE3、HONE1为鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系;5一8F为鼻咽低分化鳞状细胞癌,细胞系SUNE一1亚株,具有高转移、高成瘤能力;6- 10B为鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系SUNE-1亚株,具有高成瘤潜能,不转移特性。C666-1为长期携带EB病毒基因的低分化鼻咽癌细胞株;HK-1为携带EB病毒基因的高分化鼻咽癌细胞株.

NP69为永生化鼻咽上皮细胞系,于1XKsFM(keratinoeyte serum-free medium，KSFM)培养基中,37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养,呈现鳞状上皮样、贴壁生长,具有正常鼻咽上皮的特性。

CNE11

癌组织来源

病人王某某，女, 58 岁，, 籍贯吉林省,，中国医学科学院日坛医院住院号：2382248.1975年8月13日患者因头痛耳鸣、鼻衄等症状来院就诊。临床检查鼻咽部有菜花样肿物, 肿瘤已侵犯颅底和颅神经( Ⅲ, Ⅳ, ⅨⅫ) , 双颈淋巴结转移, 诊断为鼻咽癌。X 光诊断为鼻咽后壁软组织肿物符合鼻咽癌, 颅底象见左侧翼状突外板可疑骨质破坏,鼻咽部肿物作活检, 病理诊断为高分化鳞癌。

培养过程

在第12代时(培养后的6个月)，在上皮样细胞培养中发现有少量梭形细胞。在有的培养瓶中, 梭形细胞逐渐增加。在接种少量细胞的培养瓶中,有的全为上皮样细胞, 有的全为梭形

细胞。选择全为上皮样的细胞传代, 称CNE细胞株；全为梭形的细胞传代, 称CNF细胞株。CNE细胞株容易形成空泡，不传代的老细胞, 在显微镜下可见到有些细胞的胞浆突出, 然后脱落成死细胞, 还有多核巨细胞。在这二株细胞,特别是CNF细胞的单层或多层细胞上有很多圆形细胞, 核大,浆少。在培养液中也有大量圆的脱落细胞。将培养液中的悬浮细胞接种于培养瓶,细胞仍能贴瓶, 生长出原来的上皮样细胞或梭形细胞。将CNE , CNF细胞和这二株细胞的脱落细胞培养成单层后, 不传代, 每周换液二次, 继续培养7 个月,未能得到类淋巴

母细胞株，在培养过程中未见到肿瘤组织培养中常见到的成纤维细胞生长。

特性

CNE-22

组织来源和培养方法

组织取自鼻咽癌( Ⅳ期) 患者, 林XX,63岁, 男性, 广东籍, 活检组织病理检查为慢性鼻咽炎,但同时负压吸引的鼻咽脱落细胞为低分化鳞状细胞癌(图1).

病人血清的E B 病毒抗体和鼻咽脱落细胞的EBNA检测，病人血清的各种抗EB病毒抗体的滴度分别为: VCA/IgG 1: 320 , EA IgG 1: 160, VCA/IgA 1: 40, EA/IgA<1 : 5 , 抗EBNA抗体为1:160。鼻咽脱落细胞中发现成团的癌细胞呈EBNA阳性

细胞株的EB病毒抗原

用抗补体免疫荧光试验检查CNE- 2细胞中各种EB病毒抗原。体外培养第3代细胞可见EB NA阳性, 胞核呈颗粒状明亮的荧光,细胞传至第11代后进行多次检查, EBNA均呈阴性。经IudR或巴豆油、丁酸激活的细胞, 检查EA、VCA也呈阴性。将细胞与类淋巴母细胞株HK-1

共同培养, 观察EB病毒对上皮细胞的再感染,6天后上皮细胞的EBNA仍呈阴性。

HNE1、HNE2，HNE3和HONE13

组织细胞培养及建株肿瘤组织

取自4倒男性鼻咽癌初诊患者，分别命名为HNE1、HNE2，HNE3和HONE1，其中HNE1和HONE1为EBV阳性，HNE2和HNE3为EBV阴性。病理诊断均为低分化鳞癌。

EBV抗原及EBV基因组分析EBNA检测结果发现．HNE1和HONE1细胞30代以前均为EBNA阳性，HNE2和HNE3则为阴性。晚代HNE1和HONE1细胞的EBNA也逐渐转为阴性，而从HONE1第5代细胞中克隆出来的CL40亚株的EBNA则非常稳定，传至52代其EBNA阳性率仍高达85—90%，VCA结果示HNE1、HNE2、HNE3,均为EA／VCA 朗性．HONE细胞中只有0.1%为阳性。

1人体鼻咽癌上皮样细胞株和梭形细胞株的建立[J]. 中国科学,1978,01:113-118+121-124.

2谷淑燕,赵文平,曾毅,唐慰平,赵明伦,邓惠华,李昆. 从低分化鼻咽癌病人建立鼻咽癌上皮细胞株[J]. 癌症,1983,02:70-72+129-130.

3祝和成,姚开泰,李桂源等,4株鼻咽癌上皮细胞株建立及其生物学特性.湖南医科大学学报.1992,06,17(2),103-107.