病毒半数致死量、感染量(LD50、ELD50、ID50、EID50、TCID50)测定法
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－ 5 .64
/0.1 ml。表示该病毒悬液作 10
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稀释后，每孔（瓶）细胞接种 0.1 ml，
可以使 50％的细胞产生细胞病变（ CPE） 。
2010 年版兽药典三部增、修订品种
品名 中国兽药典(2010 年版三部)
半数保护量（PD50）测定法
将样品按适宜的倍数进行倍比稀释，取至少 3 个剂量组，按产品推荐的使用途径，每个剂 量组接种 1 组动物，同时设 1 组动物作为对照。接种一定时间后，连同对照动物，每头（只） 攻击一定剂量的强毒，观察一定时间。记录各组动物的发病情况，动物发病即判为不保护。计 算各剂量组免疫动物保护的百分率。对照动物的发病率应符合规定。按 Reed-Muench 法计算 PD50。 表 XX. 口蹄疫灭活疫苗的试验示例 疫苗接种 剂量 观察结果 发病数 0 2 4 保护数 5 3 1 距离比例= 保护比例 5/5 3/5 1/5 高于50%－50% 高于50%－低于50% 发病数 0 2 6 累计结果 保护数 9 4 1 保护率 （％） 100 67 14
病毒半数致死量、感染量（LD50、ELD50、ID50、EID50、TCID50）测 定法
将病毒悬液作 10 倍系列稀释，取适宜稀释度，定量接种实验动物、胚或细胞。由最高稀 病毒半数 ，观察记录实验动物、胚或细胞的 致死量、 释度开始接种，每个稀释度接种 4～6 只（枚、管、瓶、孔） 感 染 量 死亡数或病变情况，计算各稀释度死亡或出现病变的实验动物（胚、细胞）的百分率。按 。 （LD50、 Reed-Muench 法计算半数致死（感染）量（LD50、ELD50、ID50、EID50、TCID50） 计算公式为： ELD50 、 log TCID50=高于 50％的病毒稀释度的对数+距离比例稀释系数的对数 ID50 、 表 XX 试验示例（以 TCID50 为例，接种量为 0.1 ml） EID50 、 病毒稀释 观察结果 累计结果 TCID50） 度 CPE 数 无 CPE 数 CPE（％） CPE 数 无 CPE 数 CPE（％） 测定法 10 4 － 10 5 － 10 6 － 10 7
－
6 5 2 0
0 1 4 6
10பைடு நூலகம் 83 33 0
13 7 2 0
0 1 5 11
100 88 29 0
距离比例=
高于50%-50% 高于50%-低于50%
=
88%-50% 88%-29%
= 0.64
10 倍系列稀释的稀释系数的对数为－ 1。高于 50％感染时（上例中为 88％）病毒稀释度 － （ 10 5）的对数值为 － 5。 log TCID50= － 5+0.64（ － 1） = 5.64 则：TCID50=10
半数保护 量 （PD50） 测定法
1 头份 1/3 头份 1/9 头份
=
67%-50% 67%-14%
= 0.32
稀释系数（ 1/3）的对数为－ 0.48。高于 50％保护时（上例中为 67％）疫苗接种剂量（ 1/3 头份）的对数值为 –0.48。 log PD50 = － 0.48 + 0.32 （ － 0.48） = － 0.63 － 0.63 头份，即疫苗的一个 PD50 为 0.23 头份，表示该疫苗接种 0.23 头份可 则：PD50=10 以使 50％的动物获得保护。每头份疫苗合 4.3 PD50。
/0.1 ml。表示该病毒悬液作 10
－ 5 .64
稀释后，每孔（瓶）细胞接种 0.1 ml，
可以使 50％的细胞产生细胞病变（ CPE） 。
2010 年版兽药典三部增、修订品种
品名 中国兽药典(2010 年版三部)
半数保护量（PD50）测定法
将样品按适宜的倍数进行倍比稀释，取至少 3 个剂量组，按产品推荐的使用途径，每个剂 量组接种 1 组动物，同时设 1 组动物作为对照。接种一定时间后，连同对照动物，每头（只） 攻击一定剂量的强毒，观察一定时间。记录各组动物的发病情况，动物发病即判为不保护。计 算各剂量组免疫动物保护的百分率。对照动物的发病率应符合规定。按 Reed-Muench 法计算 PD50。 表 XX. 口蹄疫灭活疫苗的试验示例 疫苗接种 剂量 观察结果 发病数 0 2 4 保护数 5 3 1 距离比例= 保护比例 5/5 3/5 1/5 高于50%－50% 高于50%－低于50% 发病数 0 2 6 累计结果 保护数 9 4 1 保护率 （％） 100 67 14
病毒半数致死量、感染量（LD50、ELD50、ID50、EID50、TCID50）测 定法
将病毒悬液作 10 倍系列稀释，取适宜稀释度，定量接种实验动物、胚或细胞。由最高稀 病毒半数 ，观察记录实验动物、胚或细胞的 致死量、 释度开始接种，每个稀释度接种 4～6 只（枚、管、瓶、孔） 感 染 量 死亡数或病变情况，计算各稀释度死亡或出现病变的实验动物（胚、细胞）的百分率。按 。 （LD50、 Reed-Muench 法计算半数致死（感染）量（LD50、ELD50、ID50、EID50、TCID50） 计算公式为： ELD50 、 log TCID50=高于 50％的病毒稀释度的对数+距离比例稀释系数的对数 ID50 、 表 XX 试验示例（以 TCID50 为例，接种量为 0.1 ml） EID50 、 病毒稀释 观察结果 累计结果 TCID50） 度 CPE 数 无 CPE 数 CPE（％） CPE 数 无 CPE 数 CPE（％） 测定法 10 4 － 10 5 － 10 6 － 10 7
－
6 5 2 0
0 1 4 6
10பைடு நூலகம் 83 33 0
13 7 2 0
0 1 5 11
100 88 29 0
距离比例=
高于50%-50% 高于50%-低于50%
=
88%-50% 88%-29%
= 0.64
10 倍系列稀释的稀释系数的对数为－ 1。高于 50％感染时（上例中为 88％）病毒稀释度 － （ 10 5）的对数值为 － 5。 log TCID50= － 5+0.64（ － 1） = 5.64 则：TCID50=10
半数保护 量 （PD50） 测定法
1 头份 1/3 头份 1/9 头份
=
67%-50% 67%-14%
= 0.32
稀释系数（ 1/3）的对数为－ 0.48。高于 50％保护时（上例中为 67％）疫苗接种剂量（ 1/3 头份）的对数值为 –0.48。 log PD50 = － 0.48 + 0.32 （ － 0.48） = － 0.63 － 0.63 头份，即疫苗的一个 PD50 为 0.23 头份，表示该疫苗接种 0.23 头份可 则：PD50=10 以使 50％的动物获得保护。每头份疫苗合 4.3 PD50。