高效液相色谱法测定郁金饮片中姜黄素的含量_雷云霞
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
取温郁金粉末约 1.0g,精密称定,共 5 份,以下按含量测定方法进行测定,测得姜黄素的平均含 量分别为 0.0106mg/g,RSD 为 0.54%,说明本方法重复性良好。重复性试验结果见表 5。
测定次数
表 5 重复性试验结果 含量(mg/g) 平均含量(mg/g)
RSD(%)
0.010 1
0.0106
回收率(%)= 测得姜黄素的量-样品中姜黄素的量 加入姜黄素的量
×100%
试验结果表明,姜黄素平均回收率为 99.75%(n=5),RSD=1.20%。说明该测定方法测定结果准
确,测定结果见表 6。
185
中华中医药学会第五届中药炮制学术会议论文集
广东康美药业股份有限公司
样品含姜黄 次数 样品量(g) 素(ug)
1 仪器、试药和供试样品 1.1 仪器:Agilent 1100 Series 高效液相色谱仪(美国);Agilent 8453 紫外分光光度仪(美国);KQ3200 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);BECKMAN COULTER-AllegraTM6 centrifuge 台式高速离 心机;939 全自动薄层制板器(重庆南岸贝尔德仪器厂);METTLER TOLEDO 1/100000 天平(瑞士); MILLI-Q 超纯水纯化系统 。 1.2 试药:姜黄素对照品(中国药品生物制品检定所);甲醇(色谱纯,天津四友);水为超纯水,其 它试剂均为分析纯。 1.3 供试样品:安徽沪谯中药饮片厂自制郁金中试产品,批号:桂 04051601,桂 04051602,桂 04051603, 桂 04051604,桂 04051605,桂 04051606, 温 04051607,温 04051608,黄丝 04051609,黄丝 04051610。 2 色谱条件
175 150 125 100
75
50 25
0
0
2.5
5
7.5
10
12.5
15
17.5
20
min
附图 泽泻各炮制品以及标准品的 HPLC 图谱
高效液相色谱法测定郁金饮片中姜黄素的含量
雷云霞 1,孙立立 2,杨书斌 2,王娇 2
(1.济南市妇幼保健院;2.山东省中医药研究院)
[摘 要] 目的:建立高效液相色谱法测定郁金饮片中姜黄素含量的定量分析方法。方法:采用超声提取法, 选用色谱柱:Lichrospher ODS C18(4.6×150mm,5μm),流动相:乙腈-水(5%冰醋酸)(45:55),检测波长: 420 nm,流速:1ml/min,柱温:室温,进行高效液相色谱测定。结果: 在上述色谱条件下,姜黄素进样量在 0.4160-0.0208ug 范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r =0.9999),平均回收率为 99.75 %(n=5),RSD 为 1.20%(n=5);精密度试验对照品和供试品 RSD 分别为 1.28%,1.10%(n=5),;稳定性试验表明对照品和供试品 溶液 48 小时内稳定;重复性试验 RSD 为 0.54%(n=5)。结论:该测定方法简单可行,结果准确,重复性好, 可用于温郁金、黄丝郁金饮片中姜黄素的含量测定。 [关键词] 郁金饮片;姜黄素;高效液相色谱法;含量测定
色谱柱:Lichrospher ODS C18 柱(4.6×150mm,5um);流动相:乙腈:水(5%冰醋酸)(45:55);
183
中华中医药学会第五届中药炮制学术会议论文集
广东康美药业股份有限公司
流速 1.0ml/min;检测波长 420nm;柱温为室温。理论板数按姜黄素峰计算应不低于 2000。 3 试验方法与结果 3.1 检测波长的选择
取温郁金、桂郁金饮片粉末 1.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇 50ml,密塞,称定 重量,超声提取 30 分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,离心,取上清液,置旋 转蒸发仪低温回收甲醇,定容于 5ml 量瓶中,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,作为温郁金、桂郁 金供试品溶液。
郁金具有行气化瘀,清心解郁,利胆退黄的功效,临床常用于经闭痛经,胸腹涨痛、刺痛,热病 神昏,癫痫发狂,黄疸尿赤。中国药典 2000 年版[1]收载有 4 个入药品种,分别为姜科植物温郁金 Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling、姜黄 Curcuma longa L.、广西莪术 Cuecuma Kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang 或蓬莪术 Curcuma Phaeocaulis Val.的干燥块根。前两者分别习称“温郁金”和“黄丝郁金”,其 余按性状不同习称“桂郁金”或“绿丝郁金”。现代研究表明,郁金具有免疫抑制、降血脂、保肝、抗真 菌、抗氧化、抗肿瘤、中枢抑制等多种药理活性[2]。据文献检索,郁金中含有少量挥发油、姜黄素等 成分,其中姜黄素为其降血脂、抗氧化、抗炎的主要有效成分[3];其含量以黄丝郁金最高,比莪术高 近百倍,同一植物根茎含量高于块根[4]。本文选用反相高效液相色谱法建立了郁金饮片中姜黄素的含 量测定方法,测定了三种不同品种十批郁金饮片中姜黄素的含量,实验结果证明,该法简单易行、准 确、精密度及重现性俱佳,可作为制定黄丝郁金饮片质量标准的参考依据。
在上述色谱条件下,取姜黄素对照品适量,加甲醇稀释后作为样品溶液,以甲醇为参比,用紫外 分光光度计在 190~900nm 波长范围内扫描,测定姜黄素的最大吸收波长为 420nm,故选定检测波长为 420nm.检测波长选择见附图 1。 3.2 对照品溶液的制备
精密称取姜黄素对照品 5.20mg,置 25ml 量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取 5ml 置 50ml 量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,作为姜黄素对照品溶液储备液,浓度为 0.0208mg/ml。
供试液
表 1 不同提取方法测定结果
提取溶剂
提取方法
姜黄素(mg/g)
1
乙醚-甲醇
超声 0.5h
0.0107
2
乙醚-甲醇
超声 0.5h
0.0108
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
3
甲醇
超声 0.5h
0.0107
4
甲醇
超声 0.5h
0.0108
试验结果表明:上述两种提取方法测得的姜黄素含量相差无几,说明两种提取方法效果一致。为 简便,选用直接用甲醇超声提取 0.5h 作为本品的提取方法。 3.3.2 供试品溶液的制备
取黄丝郁金饮片粉末 0.1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇 50ml,密塞,称定重量, 超声提取 30 分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,离心,取上清液,置旋转蒸发 仪低温回收甲醇,定容于 25ml 量瓶中,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,作为黄丝郁金供试品溶 液。
101.0
5
0.5394
5.72
6.24
11.97
100.2
3.10 十批中试样品的测定 取 10 批中试郁金样品,各 0.1g(黄丝郁金)或 1.0g(温郁金、桂郁金),精密称定,照供试品溶液制
备项下分别操作,制成供试品溶液。在上述色谱条件下,精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 20ul, 分别注入液相色谱仪,测定,并计算各样品中姜黄素的含量,测定结果见表 7。
表 7 样品的测定结果
批号
含 量(mg/g)
X (mg/g)
桂 04051601
--
--
--
桂 04051602
--
--
--
桂 04051603
--
--
--
桂 04051604
--
--
--
桂 04051605
--
--
--
桂 04051606
--
--
--
温 04051606
在上述色谱条件下,精密吸取对照品溶液(浓度为 0.00208mg/ml)和温郁金供试品溶液各 20μl,分 别注入液相色谱仪,测定,然后每隔 6 小时测定一次,考察 12 小时,再于 24 和 48 小时各考察一次。 结果表明,对照品和温郁金供试品溶液至少在 48 小时内测定结果稳定,姜黄素对照品峰面积的 RSD 为 1.52%(n=5),温郁金供试品中姜黄素峰面积的 RSD 为 1.05%(n=5)。 3.8 重复性试验
184
热烈庆祝中国中医研究院中药研究所成立五十周年 中国中医研究院中药研究所炮制研究中心
3.4 系统适应性试验考察 在上述色谱条件下,分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 20ul,分别注入液相色谱仪,测定。
结果表明,分离度为 1.87 和 1.90,达到基线分离,且保留时间适中。对照品的保留时间和峰形与供试 品均一致。因此该分析条件可行。对照品和供试品高效液相色谱图见附图 2—6。 3.5 线性关系考察
0.0106 2
0.0106
0.0107
3
0.0106
0.54
0.0106
0.0105 4
0.0106
0.0106 5
0.0106 3.9 回收率试验
采用加样回收法试验。取已知姜黄素含量的温郁金(批号:04051607,姜黄素的含量为 0.0106mg/g) 粉末约 0.5g,精密称定,共称取 5 份,分别置 25ml 量瓶中,各分别加入一定量的姜黄素对照品,按供 试品制备方法制成供试品溶液,并按含量测定方法进行测定,按以下公式计算回收率。
精密吸取姜黃素对照品溶液储备液 10ml,8ml,6ml,4ml,2ml,1ml,0.5ml, 分别置 10ml 量瓶中,加甲 醇至刻度,摇匀,在上述色谱条件下重复进样两次,每次 20ul,测定峰面积,以姜黄素对照品进样量(μg) 为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程为 Y=15554.35X+15.61905,相关系数 r=0.9999。 结果表明,在上述色谱条件下,姜黄素进样量在 0.4160~0.0208μg 范围内与峰面积值呈良好的线性关 系。 3.6 精密度试验
表 6 回收率试验结果
加入姜黄素量 测得量
(ug)
(ug)
回收率 (%)
RSD
X (%) (%)
1
0.5439
5.76
6.24
11.87
97.83
2
0.5824
6.17
6.24
12.42
100.2
3
0.5491
5.82
6.24
12.03
99.52
99.75
1.20
4
0.6799
7.21
6.24
13.51
精密量取姜黄素对照品溶液储备液 5ml,置 50ml 量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为 姜黄素对照品溶液,浓度为 0.00208mg/ml。 3.3 供试品溶液的制备 3.3.1 供试品溶液提取条件的选择
参照文献报道:①乙醚脱脂后,加甲醇超声提取 0.5h ②直接用甲醇超声提取 0.5h,进行比较试验: 取温郁金饮片(批号:04051607)粉末 2 份各 1.0g,精密称定,按方法①分别置具塞三角烧瓶或圆底 烧瓶中,分别精密加入乙醚 50ml,进行超声提取 0.5h,过滤弃去乙醚液,药渣晾干,再精密加入甲醇 50ml,称定重量,超声提取 0.5h,取下放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,离心,取 上清液,于旋转蒸发仪低温回收甲醇,定容于 5ml 容量瓶中,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过;另 取 2 份按②直接精密加入 50ml 甲醇,称定重量,超声提取 0.5h,取下放冷,再称定重量,用甲醇补足 减失的重量,摇匀,离心,取上清液,于旋转蒸发仪低温回收甲醇,定容于 5ml 容量瓶中,摇匀,用 微孔滤膜(0.45μm)滤过,作为供试品液 1-4。在上述色谱条件下,精密吸取供试品溶液 1-4 各 20μl, 分别注入液相色谱仪测定,结果各提取方法姜黄素均能达到基线分离,测得的姜黄素峰面积基本一致。 测定结果见表 1。
热烈庆祝中国中医研究院中药研究所成立五十周年 中国中医研究院中药研究所炮制研究中心
樟帮盐炙法
标准品
VWD1 A, Wavelength=208 nm (ZX\ZX041005.D) mAU
80
60
40
22.761
20
0
0
2.5
5
7.5
10
12.5
15
17.5
20
22.5
min
VWD1 A, Wavelength=208 nm (D:\DQ2\ZX120017.D) mAU
在上述色谱条件下,精密吸取对照品溶液(浓度为 0.00208mg/ml)和温郁金供试品溶液各 20μl, 分别注入液相色谱仪,测定;对照品溶液和温郁金供试品溶液分别各测定 5 次,结果姜黄素对照品峰 面积的 RSD 为 1.28%,温郁金供试品姜黄素峰面积的 RSD 为 1.10%,表明精密度良好。 3.7 稳定性试验
测定次数
表 5 重复性试验结果 含量(mg/g) 平均含量(mg/g)
RSD(%)
0.010 1
0.0106
回收率(%)= 测得姜黄素的量-样品中姜黄素的量 加入姜黄素的量
×100%
试验结果表明,姜黄素平均回收率为 99.75%(n=5),RSD=1.20%。说明该测定方法测定结果准
确,测定结果见表 6。
185
中华中医药学会第五届中药炮制学术会议论文集
广东康美药业股份有限公司
样品含姜黄 次数 样品量(g) 素(ug)
1 仪器、试药和供试样品 1.1 仪器:Agilent 1100 Series 高效液相色谱仪(美国);Agilent 8453 紫外分光光度仪(美国);KQ3200 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);BECKMAN COULTER-AllegraTM6 centrifuge 台式高速离 心机;939 全自动薄层制板器(重庆南岸贝尔德仪器厂);METTLER TOLEDO 1/100000 天平(瑞士); MILLI-Q 超纯水纯化系统 。 1.2 试药:姜黄素对照品(中国药品生物制品检定所);甲醇(色谱纯,天津四友);水为超纯水,其 它试剂均为分析纯。 1.3 供试样品:安徽沪谯中药饮片厂自制郁金中试产品,批号:桂 04051601,桂 04051602,桂 04051603, 桂 04051604,桂 04051605,桂 04051606, 温 04051607,温 04051608,黄丝 04051609,黄丝 04051610。 2 色谱条件
175 150 125 100
75
50 25
0
0
2.5
5
7.5
10
12.5
15
17.5
20
min
附图 泽泻各炮制品以及标准品的 HPLC 图谱
高效液相色谱法测定郁金饮片中姜黄素的含量
雷云霞 1,孙立立 2,杨书斌 2,王娇 2
(1.济南市妇幼保健院;2.山东省中医药研究院)
[摘 要] 目的:建立高效液相色谱法测定郁金饮片中姜黄素含量的定量分析方法。方法:采用超声提取法, 选用色谱柱:Lichrospher ODS C18(4.6×150mm,5μm),流动相:乙腈-水(5%冰醋酸)(45:55),检测波长: 420 nm,流速:1ml/min,柱温:室温,进行高效液相色谱测定。结果: 在上述色谱条件下,姜黄素进样量在 0.4160-0.0208ug 范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r =0.9999),平均回收率为 99.75 %(n=5),RSD 为 1.20%(n=5);精密度试验对照品和供试品 RSD 分别为 1.28%,1.10%(n=5),;稳定性试验表明对照品和供试品 溶液 48 小时内稳定;重复性试验 RSD 为 0.54%(n=5)。结论:该测定方法简单可行,结果准确,重复性好, 可用于温郁金、黄丝郁金饮片中姜黄素的含量测定。 [关键词] 郁金饮片;姜黄素;高效液相色谱法;含量测定
色谱柱:Lichrospher ODS C18 柱(4.6×150mm,5um);流动相:乙腈:水(5%冰醋酸)(45:55);
183
中华中医药学会第五届中药炮制学术会议论文集
广东康美药业股份有限公司
流速 1.0ml/min;检测波长 420nm;柱温为室温。理论板数按姜黄素峰计算应不低于 2000。 3 试验方法与结果 3.1 检测波长的选择
取温郁金、桂郁金饮片粉末 1.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇 50ml,密塞,称定 重量,超声提取 30 分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,离心,取上清液,置旋 转蒸发仪低温回收甲醇,定容于 5ml 量瓶中,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,作为温郁金、桂郁 金供试品溶液。
郁金具有行气化瘀,清心解郁,利胆退黄的功效,临床常用于经闭痛经,胸腹涨痛、刺痛,热病 神昏,癫痫发狂,黄疸尿赤。中国药典 2000 年版[1]收载有 4 个入药品种,分别为姜科植物温郁金 Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling、姜黄 Curcuma longa L.、广西莪术 Cuecuma Kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang 或蓬莪术 Curcuma Phaeocaulis Val.的干燥块根。前两者分别习称“温郁金”和“黄丝郁金”,其 余按性状不同习称“桂郁金”或“绿丝郁金”。现代研究表明,郁金具有免疫抑制、降血脂、保肝、抗真 菌、抗氧化、抗肿瘤、中枢抑制等多种药理活性[2]。据文献检索,郁金中含有少量挥发油、姜黄素等 成分,其中姜黄素为其降血脂、抗氧化、抗炎的主要有效成分[3];其含量以黄丝郁金最高,比莪术高 近百倍,同一植物根茎含量高于块根[4]。本文选用反相高效液相色谱法建立了郁金饮片中姜黄素的含 量测定方法,测定了三种不同品种十批郁金饮片中姜黄素的含量,实验结果证明,该法简单易行、准 确、精密度及重现性俱佳,可作为制定黄丝郁金饮片质量标准的参考依据。
在上述色谱条件下,取姜黄素对照品适量,加甲醇稀释后作为样品溶液,以甲醇为参比,用紫外 分光光度计在 190~900nm 波长范围内扫描,测定姜黄素的最大吸收波长为 420nm,故选定检测波长为 420nm.检测波长选择见附图 1。 3.2 对照品溶液的制备
精密称取姜黄素对照品 5.20mg,置 25ml 量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取 5ml 置 50ml 量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,作为姜黄素对照品溶液储备液,浓度为 0.0208mg/ml。
供试液
表 1 不同提取方法测定结果
提取溶剂
提取方法
姜黄素(mg/g)
1
乙醚-甲醇
超声 0.5h
0.0107
2
乙醚-甲醇
超声 0.5h
0.0108
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
3
甲醇
超声 0.5h
0.0107
4
甲醇
超声 0.5h
0.0108
试验结果表明:上述两种提取方法测得的姜黄素含量相差无几,说明两种提取方法效果一致。为 简便,选用直接用甲醇超声提取 0.5h 作为本品的提取方法。 3.3.2 供试品溶液的制备
取黄丝郁金饮片粉末 0.1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇 50ml,密塞,称定重量, 超声提取 30 分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,离心,取上清液,置旋转蒸发 仪低温回收甲醇,定容于 25ml 量瓶中,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,作为黄丝郁金供试品溶 液。
101.0
5
0.5394
5.72
6.24
11.97
100.2
3.10 十批中试样品的测定 取 10 批中试郁金样品,各 0.1g(黄丝郁金)或 1.0g(温郁金、桂郁金),精密称定,照供试品溶液制
备项下分别操作,制成供试品溶液。在上述色谱条件下,精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 20ul, 分别注入液相色谱仪,测定,并计算各样品中姜黄素的含量,测定结果见表 7。
表 7 样品的测定结果
批号
含 量(mg/g)
X (mg/g)
桂 04051601
--
--
--
桂 04051602
--
--
--
桂 04051603
--
--
--
桂 04051604
--
--
--
桂 04051605
--
--
--
桂 04051606
--
--
--
温 04051606
在上述色谱条件下,精密吸取对照品溶液(浓度为 0.00208mg/ml)和温郁金供试品溶液各 20μl,分 别注入液相色谱仪,测定,然后每隔 6 小时测定一次,考察 12 小时,再于 24 和 48 小时各考察一次。 结果表明,对照品和温郁金供试品溶液至少在 48 小时内测定结果稳定,姜黄素对照品峰面积的 RSD 为 1.52%(n=5),温郁金供试品中姜黄素峰面积的 RSD 为 1.05%(n=5)。 3.8 重复性试验
184
热烈庆祝中国中医研究院中药研究所成立五十周年 中国中医研究院中药研究所炮制研究中心
3.4 系统适应性试验考察 在上述色谱条件下,分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 20ul,分别注入液相色谱仪,测定。
结果表明,分离度为 1.87 和 1.90,达到基线分离,且保留时间适中。对照品的保留时间和峰形与供试 品均一致。因此该分析条件可行。对照品和供试品高效液相色谱图见附图 2—6。 3.5 线性关系考察
0.0106 2
0.0106
0.0107
3
0.0106
0.54
0.0106
0.0105 4
0.0106
0.0106 5
0.0106 3.9 回收率试验
采用加样回收法试验。取已知姜黄素含量的温郁金(批号:04051607,姜黄素的含量为 0.0106mg/g) 粉末约 0.5g,精密称定,共称取 5 份,分别置 25ml 量瓶中,各分别加入一定量的姜黄素对照品,按供 试品制备方法制成供试品溶液,并按含量测定方法进行测定,按以下公式计算回收率。
精密吸取姜黃素对照品溶液储备液 10ml,8ml,6ml,4ml,2ml,1ml,0.5ml, 分别置 10ml 量瓶中,加甲 醇至刻度,摇匀,在上述色谱条件下重复进样两次,每次 20ul,测定峰面积,以姜黄素对照品进样量(μg) 为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程为 Y=15554.35X+15.61905,相关系数 r=0.9999。 结果表明,在上述色谱条件下,姜黄素进样量在 0.4160~0.0208μg 范围内与峰面积值呈良好的线性关 系。 3.6 精密度试验
表 6 回收率试验结果
加入姜黄素量 测得量
(ug)
(ug)
回收率 (%)
RSD
X (%) (%)
1
0.5439
5.76
6.24
11.87
97.83
2
0.5824
6.17
6.24
12.42
100.2
3
0.5491
5.82
6.24
12.03
99.52
99.75
1.20
4
0.6799
7.21
6.24
13.51
精密量取姜黄素对照品溶液储备液 5ml,置 50ml 量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为 姜黄素对照品溶液,浓度为 0.00208mg/ml。 3.3 供试品溶液的制备 3.3.1 供试品溶液提取条件的选择
参照文献报道:①乙醚脱脂后,加甲醇超声提取 0.5h ②直接用甲醇超声提取 0.5h,进行比较试验: 取温郁金饮片(批号:04051607)粉末 2 份各 1.0g,精密称定,按方法①分别置具塞三角烧瓶或圆底 烧瓶中,分别精密加入乙醚 50ml,进行超声提取 0.5h,过滤弃去乙醚液,药渣晾干,再精密加入甲醇 50ml,称定重量,超声提取 0.5h,取下放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,离心,取 上清液,于旋转蒸发仪低温回收甲醇,定容于 5ml 容量瓶中,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过;另 取 2 份按②直接精密加入 50ml 甲醇,称定重量,超声提取 0.5h,取下放冷,再称定重量,用甲醇补足 减失的重量,摇匀,离心,取上清液,于旋转蒸发仪低温回收甲醇,定容于 5ml 容量瓶中,摇匀,用 微孔滤膜(0.45μm)滤过,作为供试品液 1-4。在上述色谱条件下,精密吸取供试品溶液 1-4 各 20μl, 分别注入液相色谱仪测定,结果各提取方法姜黄素均能达到基线分离,测得的姜黄素峰面积基本一致。 测定结果见表 1。
热烈庆祝中国中医研究院中药研究所成立五十周年 中国中医研究院中药研究所炮制研究中心
樟帮盐炙法
标准品
VWD1 A, Wavelength=208 nm (ZX\ZX041005.D) mAU
80
60
40
22.761
20
0
0
2.5
5
7.5
10
12.5
15
17.5
20
22.5
min
VWD1 A, Wavelength=208 nm (D:\DQ2\ZX120017.D) mAU
在上述色谱条件下,精密吸取对照品溶液(浓度为 0.00208mg/ml)和温郁金供试品溶液各 20μl, 分别注入液相色谱仪,测定;对照品溶液和温郁金供试品溶液分别各测定 5 次,结果姜黄素对照品峰 面积的 RSD 为 1.28%,温郁金供试品姜黄素峰面积的 RSD 为 1.10%,表明精密度良好。 3.7 稳定性试验