中草药抗氧化文献综述

文献综述报告

（2012 届本科）

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2012年5 月

植物抗氧化活性研究

摘要天然的抗氧化活性物质能够清除自由基保障人体的健康，而植物更是天然抗氧化剂的天然丰富来源，植物中富含有的黄酮，多酚，生物碱，多糖，皂苷等等，都是非常好的天然抗氧化活性成分。具有良好的清除自由基和抗菌活性能力，植物抗氧化活性物质以其低廉的价格，高效，低毒的优点，越来越被广泛的研究和利用，通常植物抗氧化活性的测定是通过利用福林酚法，ABTS法，还原力测定法，DPPH法，铁离子螯合，FRAR，还原力测定等方法来研究。

关键字ABTS； DPPH ；黄酮；多酚；生物碱

1植物抗氧化成分研究

1.1 黄酮类

许多黄酮类化合物能较显示出明显的抗氧化活性，如、黄芩甙、水飞蓟素，银杏黄酮，三羟基查尔酮、槲皮素等。、山楂、菠菜、紫山西黑苦荞麸皮，葡萄皮，、茄子皮，甘薯叶和等提取物中都能分离的黄酮类物质，并且其都有较强的清除自由基能力。

黄酮类物质羟基位置上的羟基化程度是衡量黄酮抗氧化活性的一个重要方面，还原力最强的黄酮其B环上有邻二酚羟基。最新的研究还发现了，如果黄酮一个环上有邻二羟基与邻一个环上有对二羟基，那么就会产生很强的还原力。如果A环上面的5,7位增加羟基，那么黄酮的抗氧化能力就会提高。没食子酸，绿原酸，咖啡酸都是植物中通常含有的黄酮类物质，并且其都属于苯丙烷类化合物。都有苯环C-3碳骨架。其上面的羟基和羟基的数目会直接影响抗氧化的效果，因为羟基作为供氢体，能消除多种活性氧。由于黄酮类具有多样性和每种黄酮中具有抗氧化活性的有效酚羟基的种类和含量不同，因此每种黄酮的抗氧化活性也会有所差异，各不相同。

1.2 多糖类

所谓的多糖类是植物中含量较多，而且普遍的一类由10个以上的单糖通过糖苷键连接起来的聚糖。从植物中提取得到的多糖具有抗衰老，抗氧化等功效。其原因是因为多糖一方面在体内扮演着免疫调节剂的作用从而提高机体的免疫能力，另外一方面多糖能够清楚自由基达到抗氧化的目的。多糖在体内可以抑制脂质过氧化和蛋白氧化，防止过氧化歧化酶和含硫基蛋白的失活。研究表明五味子多糖，灵芝多糖，螺旋藻多糖，褐藻多糖，以及猕猴桃多糖都是具有相当强的抗氧化活性。

例如灵芝硒多糖可以提高血液中硒的含量，并且可以有效能降低脂质过氧化产物的含量，清除掉多余的过氧化氢，清除自由基，保护细胞膜不受损害，抑制体内过氧化物的产生，使细胞敏感分子不受到损害，因此能有效提高机体器官的机能。现在我国对于多糖的研究停留在其分离纯化，生物

活性，化学组成的方面，而没有对其进行构效关系的研究。所以多糖类天然抗氧化成分将会是一个相当热门，并且前景广阔的研究。

1.3 多酚类物质

多酚类物质其结构式中苯环与羟基连接，与苯环连接的羟基上的氢不稳定，通常是非常好的氢或电子的供体。由于所形成酚类游离基中间体不容易被分子氧进攻。所以要发生新的游离基或链式反应而被氧化的情况是不可能的。因此这几点证明了多酚类物质是非常好的抗氧化活性物质。

一般而言，酚类物质是植物中产生的一类次级代谢物。水果中的酚类要比蔬菜中多。酚类物质在植物中也有很大的结构上和分子量上的差别。。Velioglu等人研究了28种植物的多酚量，得出结论是总酚量与植物的抗氧化性表现出显著关系。但也有人认为植物的抗氧化活性与总酚量并非有关系。理由是因为Bocco等人对柑橘及其种子提取物进行含酚量的测定与抗氧化活性的研究后。认为两者无明显的联系。造成这样的争论原因是因为植物中具有抗氧化活性的酚类其结构和含量有所不一样。并且有些植物的抗氧化活性成分还有少许非酚类物质。Hagerman 等人证明了多元酚的抗氧化活性能力是单酚的15到20倍。

1.4 生物碱类

研究表明双子叶的植物中分布有较广的生物碱类。生物艰难扮演的角色是活性氧的猝灭剂。能够影响其抗氧化活性的主要是由于电位因素和立体结构的因素。氮原子在杂环中充分裸露能够与活性氧更好的接触，并且反应，其抗氧化效果就越好。一些提供给氮原子电子的基团越多，其抗氧化性也越好。

2 抗氧化活性研究的方法

2.1 DPPH法

2.1．1 实验原理

DPPH清除率的检测是一种快速，简单，高效的实验室抗氧化检测方法，在天然植物提取物体外抗氧化测定中应用广泛。其原理是用到二笨代苦味酰基（有毒），DPPH. 它是种在有机溶剂中比较稳定的氮自由基，其分子结构有三个苯环，一个氮上有孤对电子，在517纳米处有最强吸收峰。若有抗氧化物质存在时，DPPH上的孤对电子被配对从而使其颜色发生变化，成为浅红紫色，用分光光度计分析DPPH含量的变化。利用DPPH配对的电子数与颜色深浅有直接的联系，因此可用于实验室样品的抗氧化活性检测。

2.1.2 实验过程

A DPPH标准液配制称取DPPH2.5mg,甲醇定容到100ml,配成浓度为0.025mg/ml的标准液。放置

在冰箱中保存。

B 标准曲线绘制分别取0,2,4,6,8,10ml标准溶液，用甲醇定容到10ml最终浓度分别为0,5,10,15,25ug/ml分别取上诉标准液，并且在515纳米处测吸光度的值，绘制标准曲线。

C 样品曲线的绘制以甲醇为溶剂，配制不同浓度的样品溶液，取0.1ml的样液，并且加入3.9毫升的质量浓度为25mg/mlDPPH标准液，以甲醇代替样液做空白试验，混合液摇匀，在515纳米处测吸光值。

D VC参照曲线的绘制配制不同浓度的VC溶液，取0.1ml的样液，并且加入3.9毫升的质量浓度为25mg/mlDPPH标准液，以甲醇代替样液做空白试验，混合液摇匀，在515纳米处测吸光值。

2.1.3 试验结果分析

根据标准曲线可以换成DPPH的质量浓度，从而计算出DPPH的残留率。根据残留率和相应的样品添加量，可以绘制出DPPH的清除曲线。清除率(%)=[1－(Ai－Aj)/Ac]×100 %，其中Ac表示甲醇代替样液的吸光度值，Ai表示样品的吸光度值，Aj表示甲醇代替DPPH的吸光度值。

2.2 福林酚法

2.2.1 实验原理：

多酚类物质是植物抗氧化的主要成分之一，忍冬藤中就含有丰富的多酚类物质，其能与福林试剂，在碳酸钠溶液下生成蓝色，多酚类物质含量越高，其在770纳米处的吸光度越高，抗氧化活性越强。通过标准没食子酸标准曲线的绘制，从而确定样品的含酚量

2.2.2 实验过程：

A 福林试剂配制称取钨酸钠40g, 和85%磷酸20mL,磷钼酸8g 溶于200mL蒸馏水, 煮沸加热回流两小时, 冷却, 稀释至300mL,并且置于黑暗处避光保存。

B 标准曲线的绘制：称取0.025g没食子酸，定容至500ml,配成浓度为100mg/l的标准液，精密移取0，0.5，1,1.5,2,2.5ml没食子酸标准液于6个比色管中（避光）定容至25ml,加5ml水，2ml福林试剂，4ml碳酸钠。30度90分钟，在770纳米处测吸光度，绘制标准曲线。

C 样品的的测定，取1ml的不同浓度浓度样品于比色管中，加5ml水，2ml福林试剂，4ml 10%碳酸钠，30度90分钟后，770纳米处测定吸光度，绘制其吸光度曲线

2.2.3 结果分析

根据样品的吸光度与标准浓度没食子酸吸光度的比较，得出样品的多酚含量，结果用每ml样品含有没食子酸的当量表示总酚量也可用总酚量=G*100/w 其中G表示样品根据吸光度得出的酚的总量mg W表示样品的干重。