Fortebio 分子相互作用仪

合集下载
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
Octet Biosensors Standards
Binding (nm)
Test Samples
• 利用标准品在不同浓度时结合速率的 差异来定量样品的浓度
• 15-30分钟可以分析各样品 • 标准曲线可以重复使用 • 病毒颗粒等其他样品也可定量
Binding Rate
Time (sec)
120
Concentration
实时检测,非标记的 生物分子互作检测平台
Octet 可分析多种生物分子间的相互作用
Size
1000 nm
Cells
MW
200 nm 75 nm
Bacteria Virus IgM
1,000,000
IgA
7 nm
IgG, IgD, IgE
100,000
Antibody Fragments
Proteins
96, 96 HA
80 µL per well
0.1 mM to 0.1 nM
Octet QKe
Octet QK384 Octet RED96
> 5000 D 0.3 Hz or 0.6 Hz
1 1-8
1 Yes No
96, 96 HA
> 5000 D
0.3 Hz or 0.6 Hz 2
1 - 16 2 Yes Yes
Biosensors • 浸入样品即检测,1至16个样品可以同时检测 • 10种传感器可供选择,分析不同种类的样品 • 传感器为抛弃式设计,既可以检测共价键结合的样品 也可以再生使用
Software and computer • 常用实验方法已经预制在模板中 • 不需要单独购买软件
Validation options • 经过验证, 提供IQOQ服务, 符合美国FDA CFR Part 11 标准
军事医学科学院 2台 Novo Nordisc中国研发中心 中国生物制品药品检定所 神州细胞工程有限公司 中科院武汉病毒所 厦门大学 天津商业大学 上海药明康德新药开发有限公司 GSK中国研发中心 Novartis中国研发中心 上海旭华生物科技有限公司 江苏太平洋美诺克生物药业有限公司 江苏泰康生物医药有限公司
Non-linear curve fit of data
Y = Y0 + A (1 - e-kobs*t)
Y=Y0+Ae-kd*t
ka=
kobs – kd
[Conc Ag (M)]
KD =
kd ka
Octet 系统测定动力学的工作流程
Octet Biosensors
Buffer Ligand-Biotin Protein of Interest
ADA ID Mab #2 Mab #2 Mab #2 Mab #2 Mab #2 Mab #2 Mab #2 Mab #2 Mab #2 Mab #2
Cycle # 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
nm Shift 0.7049 0.7435 0.7431 0.7822 0.7702 0.6712 0.7221 0.7654 0.7515 0.7729
biosensor tray, sample and reagent plates for robot • Octet software has automation hooks enabled to interact with robot software
Octet “96” 系统的内部
▪ 自动化的传感器移动 ▪样品一直保留在微孔板内,是不破坏样品的检测 ▪ “浸入”式检测,检测快 ▪8通道同时检测,一次可检测多个样品
Regeneration
Yes Yes Yes Yes
Yes Yes Yes Yes Yes
No No
可以根据用户的应用设计传感器
为目前种类最多的供应商
传感器可再生使用
Regeneration solution = 1mM HCl
Avg. nm Shift StDev %CV
0.7427 0.0346 4.7%
4° C above ambient to 40° C
Available as option for all systems
96 HA 384 TW
96 well microplate with half-area well size ForteBio 384 tilted-well microplate
• 更低使用和维护的成本
• 相对其他的非标记检测系统,耗材的成本低 • 系统稳定,未来的使用和维护成本也低
传感器种类12种
Application Quantitation Kinetics
Kits
Sensor Type
Anti-Human IgG Fc Anti-Murine IgG (Fab’)2 Protein A/G/L Streptavidin (SA) Anti-Penta-HIS (HIS)
Octet RED384
> 150 D 2, 5, or 10 Hz
16 1 - 16
2 Yes Yes 96 / 96HA 384 / 384TW
40 µL per well
1 mM to 10 pM
Octet 384 系统的优点
兼容96孔板和384孔板 • 更高的通量,更少的样品消耗 • 最小体积只要40ul
Peptides
Nucleotides (DNA) 1,000
1 nm
Small Molecules 150
0.1 nm
Atoms
1
Bacteria Virus
Antibody - Antigen Receptor - Ligand
DNA - DNA DNA - Protein Antibody Fragment - Antigen Antigen – Fusion Protein Antibody - Peptide Multiple Antibody Pairings Antibody - Small Molecule Protein - Small Molecule
Octet System Specifications
Molecular Weight Range Data Acquisition Rate # Spectrometers # Channels per Read Microplate Positions Biosensor Reracking Robot Compatible
Current Octet assays within blue area
Octet系统可提供的数据
亲和力测定
• Binding KD • On and off rates • Rank order
结合特异性
• Yes / No kinetic screening • Epitope binning / mapping
96 / 96HA 384 / 384TW
> 150 D 2, 5, or 10 Hz
8 1-8
1 Yes No
96
80 µL per well 40 µL per well 180 µL per well
0.1 mM to
0.1 mM to
1 mM to
0.1 nM
0.1 nM
10 pM
Non-destructive and recoverable
Octet 软件
• 可灵活输出各种格式, Excel表,JEPG格式等 • 动力学分析直接得到ka, kd and KD 结果 • 浓度分析直接得到,ug/ml, ng/ml等浓度计算
Binding (nm)
Baseline
Baseline
Loading
Association Dissociation
Time
• 8-16 个样品可以被同时平行检测 • 检测数据被事实记录 • 实验方法可根据用户的要求来设计 • 动力学和亲和力由软件分析得到
Octet RED进行蛋白质浓度测定的工作流程
当生物分子结合到传感器表面就形成了一层生物膜 生物膜对透过传感器的光的波形造成干涉现象 干涉现象以相位移动的方式被检测,从而可以检测结合
到传感器分子数量的变化
生物分子结合动力学
For simple 1:1 binding:
Ab + Ag ka kd
Complex
ka = rate of association or “on-rate” kd = rate of disassociation or “off-rate”
• 操作简单
• 适应多用户的情况,经过半天的培训就可以操作和使用 • 不需要特别优化实验条件,传感器是抛弃式的
• 更宽的应用范围
• 直接检测粗制的样品,甚至是样品中存在不溶解的成分 • 耐受各种溶液环境,只有结合到传感器表面的分子才会被检测 • 病毒颗粒等大分子样品也能得到动力学结果 • 检测共价键结合的样品
– SDi 2010 Market Report survey – 成长最快速的非标记技术公司
• 公司发展的远景:成为每个实验室都能拥有的分子互作 系统
专业的服务
•在中国有2名硬件工程师,3名应用工程师 •除了提供批量生产的生物传感器以外,
还可以为用户定制传感器 •提供实验方法开发和优化服务
国内用户名单
蛋白质浓度定量(混合物)
• Picogram ຫໍສະໝຸດ Baiduo milligram dynamic range • Contaminant testing
Octet 系统和特点
Octet 系统的优点
• 更高的通量, 更快的实验流程
• 8-16个样品同时检测,是非标记技术中通量最高的 • 15-30分钟可以完成96个样品的分析 • 没有溶液控制系统,不需要清洗和维护流路,直接开始读取数据
Octet生物分子相互作用系统
ForteBio Inc.
• 2004年由华人物理学家创立, 2009年开始在中国销售 • 专利的生物膜干涉 Bio-Layer Interferometry (BLI)技术 • 总部在美国硅谷 • 全球超过350个用户,中国14个用户 • 全球第二的专业非标记技术厂商
Streptavidin (SA) Super Streptavidin (SSA) Amine Reactive (AR) Aminopropylsilane (APS) Anti-hIgG Fc Capture Surface (AHC) Anti-mouse Capture Surface
Dip and Read Immunogenicity Kit Dip and Read Residual Protein A Detection Kit
Octet 384 系统的内部
两个微孔板的位置,一次可连续分 析更多的样品
每个微孔板独立使用,即可以是96 孔板,也可以是384孔板。即可 以同时使用一块96孔板+384孔 板
根据实验步骤设定将传感器在样品板的 不同位置移动
生物膜光干涉技术Bio-Layer Interferometry (BLI)
16通道同时检测,让所需 实验时间更短 两个样品板位置
• 更多的实验方案 • 一次连续分析更多样品 全自动化解决方案 • 可与多种液体工作站连接
Octet 全自动功能
• Automated door and plate stage • Works with articulated arm and
track-style robotic systems • Plate stage presents the
Microplate Formats
Minimum Sample Volume
Affinity range (approximate) Sample Usage Temperature Control 21 CFR Part 11 Compliance
Octet QK
> 10,000 D 0.6 Hz 1 1-8 1 No No
Octet 产品简介
Octet Instruments • 5种型号 - Octet QK, Octet Qke, Octet RED, Octet QK384, Octet RED 384 • 使用通用的样品板(96 and 384 well) • 没有流路系统 • 样品经过检测后,仍然留在原处,可以回收再使用
Streptavidin (SA) sensor 表面固定了生物素化的蛋白质药物 10%的猴血清样品,含有抗该药物的抗体
可同时平行优化8种传感器再生条件 每个传感器表面结合抗体以后进行再生,如此反复10次 由于8个传感器上的数据可以同时检测,因此3分钟内就可以得到8个数据 最终每个样品的检测成本仅为4元人民币
相关文档
最新文档