壳寡糖席夫碱对烟草花叶病毒的诱导抗性

１ 材 料 与 方 法 Hale Waihona Puke Baidu
１ １ 材 料 ．
限公 司 ； ５一硝 基 水 杨 醛 、 ５一溴 水 杨 醛 、 ５一氯 水 杨 醛 和 ３ ５一二氯水杨醛 ， ， 工业 级 ， 海海 曲化工 有限公 司 （ 上 用前重 结晶） 氢氧化钠 ， 析纯 ， ； 分 天津市德恩化 学试剂有 限公 司 ； 无 水乙醇 ， 分析纯 ， 天津市恒兴化学试剂 制造有限公 司（ 用前做 绝对无水处理 ） 对照药剂 为 ２ 宁南 霉素水剂 ， ； ％ 黑龙 江强尔
生化技术开发有限公司 。
１２ ． 方 法
心叶烟（ ｇ ｔ ｏａ ， Ｎ．ｌ ｉ ｓ） 购买 于 中 国农 业 科 学 院 烟 草 研 ｕｎ
究所 。
郑州杜 甫仪器厂 Ｓ Ｂ一 Ｈ ３型循环 水多用 真空泵 ； 上海 亚 荣生化仪器厂 Ｒ ５ Ａ Ｅ一 ２ Ａ旋转蒸发器 ； ｉ ｌ １ Ｎｃ ｅ Ｉ ０傅立 叶红 ｏ ｔＳ
壳寡糖是植物识别病原真 菌入侵 的非特异性 信号 ， 对许 多植
物 显 示强 烈 的免 疫诱 导 活性 可 以激 发植 物 的抗 病 基 因 表 达 ， 产生与植物抗病相关 的甲壳素酶 、 聚糖 酶 、 壳 植保素 和
免疫蛋 白质 。席夫碱是指含有活性羰基和氨基 的 ２类物质
Ｈ ＨＣ Ｏ ２ Ｈ Ｈｑ Ｏ ２ ＨＨ Ｏ￣ ＿ Ｏ
５３ ） 、７ ．０± ．１ ％ 。 ．３ ％ （ １ ５ ７ ２ ）
关键词 ：壳寡糖席夫碱 ；烟草花叶病毒 ； 导抗 性 诱 中图分类号 ：￥３ ．２ ４５ ７ 文献标志码 ：Ａ 文章编号 ：０ ２—１０ （０ １ ０ ０ ３ — ３ １０ ３ ２ ２ １ ）５— １ １ ０
Ａｌ 等发现壳聚糖具有广谱抑菌性 ， ｌｎ ａ 有关壳寡糖 的抑菌
作用在 医药 、 品、 食 农业等行业 受到科技工 作者 的重视 ， 并开
通过缩水形成的含亚 氨基 或烷亚氨 基的一类有机 化合物 ， 由 于席夫碱中 Ｃ＝ ＝Ｎ键的存在 ， 其杂化轨道上的 Ｎ原子具有孤 对电子 ， 席夫碱衍生物及其金 属络合物不仅是 一种重要 的化 学分析试剂 和有机合成 中间体 ， 而且还具有抗菌、 灭菌等生物
ＮＯ ａ Ｈ，无水乙醇
加热 回流
（ ） １ 壳寡糖
Ｒ （） ２ 水杨醛
（） ３ 壳寡 糖席夫碱 （ ａ）：Ｒｌ￣－４； ｆ ｂ）：ＲｌＲ ＝ Ｉ （ ｃ ３ ＝ － Ｉ ３ ＝ ２Ｃ ； ３ ）：Ｒ＝ Ｉ ２ １ （ ｄ）：Ｒ＝ Ｒ２Ｂｒ （ ｅ）：Ｒ ＿ ， ＝ ｌＨ， ； ３ Ｒ １Ｈ， ＝ ； ３ ｌＨ Ｒ２ＮＯ２ 图１ 目标化合物的合成
活性 。宋宝安等研究 ５ ０ｍ （ Ｈ）一喹唑啉酮类席夫 ０ ＃Ｌ４ ３ 碱对抗 烟草花 叶病毒活性测定 发现 ， 不同 的取代基 具有不 同
展了一些研 究
。壳寡 糖 （ｈｏｌｏ ｃｈｒ ｅ） ｃｉｏｇｓ ｅａｄｓ 也称几 丁 ｔｉ ａ ｉ
寡糖 ， 以壳聚糖为原料 ， 是 经生物技术降解而成的相对分子质 量较低 、 聚合度为 ２～ ０的低聚 Ｂ一（ ， ）一 脱 氧 一 ２ １４ ２一 ２一氨 基 葡萄糖 ， 具有水 溶性 好 、 功能 作用 强、 生物 活性 高等 特点 。
收稿 日期 ：０ ０—１ ２１ ０—２ ７ 基金项 目： 国家烟草专卖局重大科技攻关（ 编号 ：１２ ００ ０ ４ 。 １０ ０４ １０ ）
１２ １ 壳 寡糖 席 夫 碱 的 制备 ．．
将 ０ ０２ ｔ ｌ 寡糖 在 ． ０ ｏ 壳 ｏ
２ Ｌ ５ｍ 绝对无水 乙醇溶剂 中浸泡溶胀后 ， 加人 ０ ０ ２ｍ ｌ ．０ ｏ 水杨
醛或取代水杨醛和 ０５ｇ ａ Ｈ 调节溶液 ｐ 为弱碱性 ） ． Ｏ （ Ｎ Ｈ值 ，
加热 回流反应 ２ 。反应结束后 ， ０ｈ 抽滤干燥 ， 用无水 乙醇索 并 氏提取产物 ， 以除去产 品 中多余水 杨醛或取代水 杨醛。产品 在低于 ５ ０℃下真空干燥 后进行灭 菌处理。试验共制备 ５种
。
＋
的抗 烟草花 叶病毒活 性 。取代基 为 ２一 一５一硝 基时抗 氯
花 叶病毒活性最强 。笔者以壳寡糖 与 ５种水杨醛合成 了 ５种
壳寡糖席夫碱 ， 并对其诱 导植物抗 Ｔ Ｖ进行 了初 步探讨 ， Ｍ 旨
在合成新 的防治 Ｔ ＭＶ药物。 目标 化合物 的合成路径见 图 １ 。
Ｒ２ 。
（． １河南农业大学 烟草学院 ， 河南郑州 ４ Ｏ ０ ； ． ５ ｏ２ ２ 河南农业大学 理学院 ， 河南郑州 ４ ０ ０ ） ５ ０ ２
摘要 ： 以壳寡糖与不 同取代基 的水杨醛为原料合成 ５种壳寡糖席夫碱 ， 其结构经紫外 、 红外光谱确认 ， ５ 、０ 、 以 ０ １０
２０￣／ Ｌ３ ０ ｇｍ 个浓度梯度处理心 叶烟 。结果显 示 ，５ 药剂 对烟 草花 叶病毒 具有显 著 的抑制 效应 ， 中 １０ ｇｍ １种 其 ０ ／ Ｌ ３５一 ， 二氯水杨 醛壳 寡糖 席 夫 碱 和 ２ ０ ｂ ／ ０ Ｌ ｍＬ５一氯 水 杨 醛壳 寡 糖 席 夫 碱 的 效 果 最好 ， 制 率 分别 为 （ ３ ２ ｇ 抑 ７ ． ９±
外光谱仪 Ｆ Ｉ２０ 赛默 飞世尔是高科技仪 器公 司） 双光 Ｔ— Ｒ ０ （ ； 束紫外可见分光 光度计 （ 北京 普析 通用 仪器 有 限责任公 司，
Ｔ Ｕ一１０ ） 壳寡糖 ， ９１； 分子量 ＜ ０ 脱 乙酰度 ＞ ０ ， ３０ ０， ９ ％ 山东奥 康 生物科技 有限公司 ； 水杨醛 ， 化学纯 ， 国药集 团化学试剂有
江苏农 业科学
２１ ０ １年第 ３ ９卷第 ５期
赵龙杰 ， 徐翠莲 ， 富根 ， 韩 等．壳寡糖席夫碱对烟 草花 叶病毒的诱 导抗 性［］ Ｊ．江苏农业科 学， １ ， （ ）１１ １４ ２ １３ ５ ： — ３ ０ ９ ３
壳寡糖席夫 碱对烟草花 叶病毒 的诱 导抗 性
赵龙杰 徐翠莲 韩富根 李钠钾 张丰收 薛 刚 ， ， ， ， ， ， 杜林洳