猪支原体肺炎灭活疫苗

猪支原体肺炎灭活疫苗（P-5722-3株）

本品系用猪肺炎支原体P-5722-3株（NL1042株）接种适宜培养基培养，收获培养物，经BEI灭活后，与矿物油佐剂混合乳化制成。用于预防猪支原体肺炎。

[处方]

[制法]

[性状]乳白色乳剂。

[鉴别]

[检查]

[含量测定]

[功能与主治]/[作用与用途]

[用法与用量]/[用法与判定]

[注意事项]

[规格]（1）50头份（100ml）/瓶（2）250头份（500ml）/瓶（3）500头份（1000ml）/瓶

[贮藏]2～8℃保存，有效期为24个月。

[制剂]

附注：猪支原体肺炎灭活疫苗效力检验方法采用固相ELISA法测定疫苗中所含抗原的相对效力单位。

1 材料1.1 设备1.1.1 96孔微量反应板1.1.

2 酶联读数仪1.1.

3 超声波裂解器1.1.

4 离心机 1.1.

5 14×89mm离心管 1.1.

6 25×89mm离心管 1.1.

7 加样器及配套吸头 1.1.

8 酶联洗板机 1.1.

9 温箱 1.1.10 pH计 1.1.11 混合器

1.1.12 试剂贮存管1.1.13 微量板震荡器1.1.14 RELPOT软件包（3.1或更新版本）1.1.15 吸水纸 1.2 缓冲液 1.

2.1 0.01mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）氯化钠8.0g 氯化钾0.2g 磷酸二氢钾0.2g 磷酸氢二钠 1.15g 纯水加至 1 L 将各种盐按比例溶解于水中，调至pH 7.2 0.1。在室温下保存，如不打开，可使用6个月，打开后，可使用3个月。1.2.2 PBS-吐温20 （PBST）取0.5ml 吐温20，加到1L PBS中。在室温下保存，如不打开，可使用6个月，打开后，可使用3个月。1.2.3 1% PV A/PBS 取10g聚乙烯醇（PV A，88%水解物），加到1L PBS中，稍加热，使其溶解。滤过。在室温下保存，可使用3个月。

1.3 试剂 1.3.1 猪肺炎支原体单克隆抗体Norden杂交瘤1-2'腹水单抗。在-10～-25℃下保存。经Western Blot试验证实，该单抗识别猪肺炎支原体上的40kD蛋白质。1.3.2 参考疫苗1.3.3 阴性对照品含5% Amphigen的生理盐水乳剂。在-65℃下保存。 1.3.4 阳性对照品 1.3.5 酶结合物通过亲和层析方法纯化的羊抗鼠IgG（H+L）过氧化物酶结合物，每瓶1.0mg。冻干的酶结合物在2～8℃下保存，使用时，用1% PV A/PBS稀释至终浓度为0.5mg/ml。稀释后的酶结合物在-10～-25℃下可保存1年。 1.3.6 底物ABTS。 2 待检疫苗、参考疫苗、阳性对照品、阴性对照品的处理

2.1 将各种样品（待检疫苗、参考疫苗、阳性对照品和阴性对照品）至少14ml在65℃以下冷冻至少24小时。2.2 将待检疫苗、参考疫苗、阳性对照品和阴性对照品在37 2℃下融化20分钟。 2.3 将上述样品分别分成2等份（各7ml），分别加入离心管中，超声处理55～65秒（脉冲，50%功率循环，输出功率=4），并用循环水进行冷却。2.4 将上述每种超声处理过的样品混合，分别倒入超速离心管中（每种样品约12.0～12.5ml），在2～8℃下以30000r/min离心6小时。2.5 离

心后，小心弃去油层和上清液，用Kimwipe对离心管进行干燥，直到除去离心管内壁上残留的油层。分别将待检疫苗、参考疫苗、阳性对照品和阴性对照品的离心沉淀物溶解在1.2ml PBS中，用封口膜封口，置2～8℃过夜。2.6 次日，通过振动和反复吹吸使猪肺炎支原体细胞沉淀物充分溶解。3 抗原包被3.1 抗原稀释 3.1.1 参考疫苗抗原进行2倍系列稀释，直至1:128。3.1.2 待检疫苗抗原和阳性对照品稀释到参考疫苗工作曲线范围内。3.1.3 阴性对照品稀释至1:16（取62.5ul阴性对照品样品加到937.5ul PBS中）。3.1.4 空白对照PBS。 3.2 包被取一96孔板，每份抗原一式3孔，每孔加100ul。加盖，置37 2℃60～65分钟。用PBS手动洗涤一次。 4 封闭每孔中各加入1% PV A/PBS 250ul，加盖，置37 2℃30～35分钟，倒去液体，拍干。5 加入指示抗体用1% PVA/PBS将腹水单抗稀释成1:1000，每孔加100ul，加盖，置37 2℃60～65分钟。用PBST洗板3次。6 加入酶标抗体用1% PV A/PBS 将羊抗鼠IgG（H+L）过氧化物酶结合物稀释成1:4500，每孔加入刚稀释好的酶标抗体溶液100ul，加盖，置37 2℃60～65分钟。用PBST洗板3次。7 加入底物每孔中加入新制备的ABTS 100ul，加盖，置室温下30分钟。振荡反应板后，在酶联读数仪上读取波长405nm下的OD值。8 数据处理用RELPOT软件包（3.1或更新版本）进行数据处理。8.1 将"最小OD值"设置为0.05，将"最小斜度"设置为0.15，将超出这些范围的数据自动剔除。8.2 将每孔OD值减去空白孔OD值的平均值。8.3 输入参考疫苗校正后的OD值和稀释度。8.4 输入阳性对照品和待检疫苗校正后的OD值和稀释度。8.5 将输入的数据进行处理，并打印结果。8.6 根据打印结果中的最高数值选择阳性对照品和待检疫苗的最高RP值。9 结果判定每批疫苗出厂时的RP值应

不低于6.33，在整个有效期内的RP值应不低于5.06。9.1 "无结果"是指：缺乏有效的参考疫苗或其他样品的线（在有效的参考疫苗或样品线中，每个参考疫苗应至少有3个点，每个阳性对照品或待检疫苗应至少有3个点）；阴性对照品的OD 值大于参考疫苗的最小OD值；根据有效的平行线得到的对照样品的效力，超出了2个标准差范围。如发生上述情况，可以重检至多2次。如在某批产品的检验过程中，由于相同原因出现3次"无结果"，则应停止对该批疫苗的检验，直到查清原因并使问题得到解决为止。在问题得到解决后，可对该批产品进行重检。9.2 "结果可疑"是指：可以获得有效的参考疫苗线和待检疫苗线，但二者不平行。由于不能确定产品的效力是否合格，因此该批产品不能出厂。如果第1次检验结果为"结果可疑"，可以重检3次。根据表1中的重检情况确定产品的效力检验结果。若不重检，则判该批疫苗不合格。9.3 "不合格"是指：在第1次检验中产生了有效的平行线，但疫苗效力低于最低标准。至少应进行2次重检，但不超过3次。根据表2中的重检情况确定产品的效力检验结果。若不重检，则判该批疫苗不合格。

《进口兽药质量标准》

猪支原体肺炎治疗方法.doc

猪支原体肺炎治疗方法概述：猪支原体肺炎也可称为猪霉形体肺炎、猪地方流行性肺炎，属于慢性呼吸道病的一种，主要是由支原体科支原体属的猪肺炎支原体引起。本病致死率并不是很高，但会使猪群的生长受到严重影响，降低饲料利用率，增大料肉比;如果继发感染其他疾病也具有较高的死亡率。猪支原体肺炎的症状急性型：病猪采食较少，甚至完全停止，精神萎靡，咳嗽，尤其是在剧烈运动、清晨、夜间和喂食后咳嗽更加明显。随着病情的发展，导致气喘和呼吸困难，一般呈腹式呼吸，即呈犬坐姿势，并张口喘气，有泡沫从口鼻流出。病猪通常会有窒息而发生死亡，能够耐过的病猪则变成慢性型。此外，病猪体温基本正常，约37.5℃，精神萎靡，呼吸次数每分钟大约130次，由于出现气喘而无法咽下食物，体质消瘦，发育较慢，被毛粗乱失去光泽。慢性型：病猪长时间咳嗽，开始时是干咳，严重时会出现连续痉挛性咳嗽，且随着病情恶化，会出现难以呼吸和喘气的现象，腹式呼吸非常明显，夜间能够清晰的听到哮喘声。病猪可视黏膜发绀，往往会流鼻液，但体温及食欲基本没有明显变化，严重时才会减少采食或者停止采食，最终由于体质衰弱而发生死亡。猪支原体肺炎紧急治疗方案

猪支原体肺炎的西药紧急治疗方案: 方法1，林可霉素进行肌肉注射，持续5天以上，或在饲料中添加林可霉素，进行喂食。方法2，盐酸霉素，硼酸溶液进行肌肉注射，一天一次，持续用药5天以上。猪支原体肺炎的中药紧急治疗方案: 方法1，杏、白果、麻黄、甘草、苏叶、黄芪、石膏，熬汤冠服。方法2，炒白芍、桔梗、党参、桂枝花粉、甘草、金银花、柴胡、五味子、葶苈子、杏、山药、连翘，熬汤灌服。方案3，皂角、醉鱼草跟、石菖蒲、臭牡丹、苦参、甘草，熬药灌服。猪支原体肺炎治疗方法发现病猪后要立即将其与群猪进行隔离，并对其污染的环境进行消毒，可喷洒2%～3%氢氧化钠溶液进行消毒。对于病猪所在猪群的同群猪只也要采取隔离观察，并在饲料中添加土霉素拌料，一般每千克饲料中添加60～80mg，采取预防性治疗，每天饲喂1次，1个疗程是5～7天，需要连续用药3个疗程，如果经过2月后没有可疑病

猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较

目录猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较1 猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较1 目录2 猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较3 1 目的3 2 材料与方法3

2.1 材料3 2.2方法4 2.2.1动物分组说明4 2.2.2动物分组与试验操作概表5 2.2.3免疫6 2.2.4疫苗免疫后临床症状观察记录7 2.2.5疫苗免疫后血清抗体及分型检测7 2.2.6疫苗免疫后细胞免疫指标检测7 2.2.7疫苗免疫后黏膜免疫指标检测7 2.2.8攻毒7 附录1 攻毒保护率计算9 附录2 猪支原体肺炎发病猪临床症状评判标准10 附录3 动物分组记录表11 附录4 动物免疫记录表12 附录5免疫后异常临床症状观察记录表13 附录6 抗体检测记录表14 附录7 淋巴细胞增殖试验结果16 附录8 血象分析17 附录9 T淋巴细胞分类计数18 附录10 黏膜抗体检测记录表19 附录11攻毒记录单20 附录12特殊情况记录表21 附录13 攻毒后临床症状观察记录表22 附录14日增重记录24 附录15 攻毒后肺部剖检记录26 附录16攻毒后剖检记录28 附录17 攻毒后肺部病理损伤记录30 附录18 攻毒后肺部猪肺炎支原体抗原定量检测32 猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较 1 目的猪支原体肺炎活疫苗AN306菌株与原168菌株的肺内注射免疫效果比较；猪支原体肺炎疫苗（天邦、吉林正业、辉瑞）免疫效果比较； 2 材料与方法 2.1 材料 2.1.1待试的疫苗产品与试剂 2.1.1.1 疫苗 A.猪支原体肺炎活疫苗AN306株F321，由江苏省农业科学院兽医所研制，规格为2×107CCU/瓶（2ml冻干），批号为20140325。有效期：______。PCR鉴定:Mhp_____，Mhr_______。 B.猪支原体肺炎活疫苗（168株），由南京天邦生物科技有限公司提供，规格为50头

支原体肺炎的病因及诊断

支原体肺炎的病因及诊断支原体肺炎是由什么原因引起的？肺炎支原体是介于细菌与病毒之间，能独立生活的最小微生物，大小为200nm.无细胞壁，仅有由3层膜组成的细胞膜，常与细菌的L 型相混淆，两者的菌落相似，可在无细胞的培养基上生长与分裂繁殖，含有RNA和DNA，经代谢产生能量，对抗生素敏感。支原体为动物多种疾病的致病体，目前已发现8种类型，医学教育`网搜集整理其中只有肺炎支原体肯定对人致病，主要是呼吸系统疾病。在20%马血清和酵母的琼脂培养基上生长良好，初次培养于显微镜下可见典型的呈圆屋顶形桑椹状菌落，多次传代后转呈煎蛋形状。支原体发酵葡萄糖，具有血吸附作用，溶解豚鼠、羊的红细胞，对美蓝、醋酸铊、青霉素等具抵抗力。最后尚须作血清鉴定。它由口、鼻分泌物经空气传播，引起散发和小流行的呼吸道感染，主要见于儿童和青少年，现在发现在成人中亦非少见，秋冬季较多。呼吸道感染有咽炎和支气管炎，少数累及肺。支原体肺炎约占非细菌性肺炎的1/3以上，或各种肺炎的10%. 肺炎支原体在发病前2～3天直至病愈数周，皆可在呼吸道分泌物中发现。它通过接触感染，长在纤毛上皮之间，不侵入肺实质，其细胞膜上有神经氨酸受体，可吸附于宿主的呼吸道上皮细胞表面，抑制纤毛活动和破坏上皮细胞，同时产生过氧化氢进一步引起局部组织损伤。医学教育`网搜集整理其致病性可能与患者对病原体或其代谢

产物的过敏反应有关。感染后引起体液免疫，大多成年人血清中都已存在抗体，所以很少发病。衣原体肺炎有哪些表现及如何诊断？ 1、沙眼衣原体肺炎 1975年有人开始报告新生儿衣原体肺炎，继发于包涵体脓性卡他之后。本病多由受感染的母亲传染可眼部感染经鼻泪管传入呼吸道。症状多在出生后2～12周出现，起病缓慢，可先有上呼吸道感染表现，多不发热或偶有低热，然后出现咳嗽和气促，吸气时常有细湿啰音或捻发音，少有呼气性喘鸣。胸片显示双侧广泛间质和肺泡浸润，过度充气征比较常见，偶见大叶实变。周围血白细胞计数一般正常，嗜酸性粒细胞增多。从鼻咽拭子一定要刮取到上皮细胞。也可用直接荧光抗体试验（DFA）、酶免疫试验（EIA）检测鼻咽标本沙眼衣原体抗原。血清学检查特异性抗体诊断标准为双分血清抗体滴度4倍以上升高，或IgM＞1：32，IgG＞1：512.也可应用PCR 技术直接检测衣原体DNA. 2、鹦鹉热衣原体肺炎来源于家禽接触或受染于鸟粪，是禽类饲养、贩卖和屠宰者的职业病。人与人的感染少见。病原体自分泌物及排泄物排出，可带菌很久。鹦鹉热衣原体通过呼吸道进入人体，在单核细胞内繁殖并释放毒素，经血流播散至肺及全身组织，引起肺音质及血管周围细胞浸润，肺门淋巴结肿大。潜伏期6～14d，发病呈感冒样症状，医学教育`网搜集整理常有38～40.5℃的发热，咳嗽初期为干咳，以后有痰，呼吸困难或轻或重。有相对缓脉、肌痛、胸痛、

猪支原体肺炎(喘气病)的防治策略

猪支原体肺炎（喘气病）的防治策略喘气病，又称猪地方性流行性肺炎、支原体肺炎，是由猪肺炎支原体直接引起的猪呼吸道疾病，其特点是病猪咳嗽、生长不良、发病率高而死亡率低。临床症状最常见于6-12周龄的猪，支原体感染常常诱发生长肥育猪13-15周龄、18-20周龄时比较严重的呼吸道疾病综合症，使得育肥期猪只生长速度变慢，死亡率升高。病猪的临床症状通常至少持续三周，最重要的是使得断奶体重相同的猪逐渐变得体重参差不齐，上市时间推迟。有资料表明，受支原体感染的影响，8kg-85kg的猪的生长率下降15.9%，10kg-85kg的猪的生长率下降13.8%，饲料利用率损失22%。由于支原体的感染，生长肥育猪每增重1千克体重比健康猪多消耗 0.09-0.2千克饲料。而且屠宰猪30%-80%的肺病变与肺炎支原体感染有关。 1、支原体的普遍存在性支原体是养殖环境中普遍存在的病原体，支原体感染也是一个全球关注的养殖疾病问题。而且猪只一旦感染支原体，就很难根除，带菌猪通常表现为亚临床状态。当外界感染压力大，或动物应激时，支原体将会诱发综合性呼吸道综合症，如猪PRDC。 2、支原体的传染方式带菌猪( 病猪和隐性感染猪)是猪支原体肺炎感染的主要传染源。病原体随带菌猪的咳嗽和喘气排出体外后，易感猪通过与带菌猪的呼吸道分泌物直接接触或经由空气流动接触而感染。一旦猪群中有几头猪被感染，就会在同圈猪之间传播，特别是在断奶时将猪只混养以后更是这样。在连续生产系统中，猪肺炎支原体可以由母猪传给仔猪，由大猪传给小猪，但直到仔猪 6周或更大日龄时才能见到明显的症状。其严重程度常因管理水平、季节、通风条件、猪的密度以及其它环境因素改变而有很大差异。 3、支原体的危害呼吸系统有三道防线用以保障呼吸通畅，防御疾病。第一道防线是鼻腔，第二道防线是气管和支气管，第三道防线是肺泡防御。肺炎支原体感染后，首先聚集在纤毛上皮细胞上，然后逐渐引起感染细胞发生病变、死亡，导致气管发炎、纤毛脱落或蠕动减弱；由于肺炎支原体感染引起纤毛变短变少，纤毛正常的摆动功能显著的下降，消除灰尘、病原菌及分泌杀菌(病毒)粘液的功能降低，增强对其它呼吸道疾病的易感性，为继发性感染大开方便之门。 4、支原体与各种疾病的关系 4.1支原体与猪呼吸道综合症目前，呼吸道综合症是严重影响猪场经济效益的疾病之一。猪呼吸道疾病综合症是一种多因素引起的呼吸道疾病的总称，它是由病毒、细菌、环境应激和猪体免疫力低下相互作用造成的。由于猪场的感染压力大，从断奶开始，一直到肥育期均可发生呼吸道综合症。该病除了造成直接的死亡之外，更为严重的是使猪增重缓慢(5-25%)，饲料利用率减少5-25%，出栏时间推迟15-20天；2－4月龄成活率下降2%。而肺炎支原体是在呼吸道综合症（PRDC）中扮演着始作俑者和疾病第一感染的角色。肺炎支原体感染后，是呼吸系统的抗病能力降低，增强对其它呼吸道疾病的易感性，导致继发感染其他细菌、病毒（如链球菌，APP, HPS, PRRSV, PCV），从而诱发呼吸道综合症（PRDC），严重的可以导致猪只死亡，造成巨大经济损失。有统计表明，呼吸道综合症可带来如下的经济损失： 4.1.1料肉比下降0.1：即：正常商品肉猪全程料肉比2.8：1，而由于呼吸道病影响成了2.9：1 按100kg体重出栏计算：无病猪耗料280公斤，而有此病的猪耗料为290公斤，多耗料10公斤，约14元/头损失。 4.1.2晚出栏15天：

普泰克支原体说明书-猪支原体肺炎灭活疫苗(P株)

猪支原体肺炎灭活疫苗（P株）说明书【兽药名称】通用名猪支原体肺炎灭活疫苗（P株）商品名无英文名Swine Mycoplasma Hyopneumoniae Vaccine，Inactivated（Strain P）汉语拼音Zhu Zhiyuantifeiyan Miehuoyimiao（P Zhu）【主要成分与含量】本品含灭活的猪肺炎支原体P株抗原至少60μg/头份。【性状】上层为无色澄明液体，下层为乳白色沉淀，振摇后呈均匀混悬液。【作用与用途】用于预防猪支原体肺炎。【用法与用量】肌肉注射。用于2周龄或2周龄以上猪，每头1头份（1ml）。两次接种，间隔至少2周。首次注射应在10周龄前进行。建议首次接种在2周龄时进行，4周龄时进行第二次接种。如需将其它处购买的、未免疫的猪与免疫过的猪混养时，应在2～3周内向未免疫的猪进行两次免疫接种。【不良反应】一般无可见的不良反应。如出现过敏反应，可用阿托品之类药物脱敏治疗。【注意事项】（1）仅用于接种健康猪。（2）疫苗切勿冻结或长时间暴露在高温环境。（3）使用前充分摇匀，并将疫苗恢复室温。（4）开瓶后，应一次用完。（5）使用洁净注射器材。（6）不可与其它疫苗混合使用。（7）未用完的疫苗和使用后的疫苗瓶应销毁。（8）屠宰前21日内禁止使用。【规格】（1）100头份（100ml）/瓶（2）250头份（250 ml）/瓶【包装】（1）12瓶/盒（2）50瓶/盒（3）100瓶/盒【贮藏与有效期】2～8℃保存，有效期为24个月。【《进口兽药注册证书》证号】【生产企业】美国普泰克国际有限公司（Prota Tek International, Inc）地址：ProtaTek International, Inc. 2635 University Ave W. Suite 140，St Paul, MN 55114 USA 仅在兽医指导下使用

治疗猪喘气病的有效药物和方法

猪喘气病又名猪支原体肺炎、猪霉形体肺炎、猪地方流行性肺炎，是由猪肺炎支原体感染而发生的一种接触性慢性呼吸道传染病，临床上呈慢性经过，主要症状为咳嗽和气喘。现将治疗该病有较好疗效的药物及方法荟萃于猪喘气病又名猪支原体肺炎、猪霉形体肺炎、猪地方流行性肺炎，是由猪肺炎支原体感染而发生的一种接触性慢性呼吸道传染病，临床上呈慢性经过，主要症状为咳嗽和气喘。病变的特征是肺的尖叶、心叶、中间叶和膈叶前缘呈“肉样”或“虾肉”样实变。现将治疗该病有较好疗效的药物及方法荟萃于后，供读者参考。１盐酸土霉素日用量300mg/kg体重（第一次用量加倍），用0.25％普鲁卡因或5％的葡萄糖生理盐水稀释后肌肉注射，每日1次，连续注射5天为一个疗程。重症者可适当延长一个疗程。按6mg/kg体重作气管内注射效果较好。 2 恩诺沙星用量2.5mg/kg体重，每日2次，肌注。 3 泰妙菌素泰妙菌素的商品名为“支原净”，是一种白色结晶粉末，以拌入饲料内给药为主。对猪喘气病预防剂量为每天50mg/kg体重拌料，口服连续2周。治疗期间有明显的疗效，但部分治疗猪仍会复发。被治疗猪在治疗后6天，剖杀做病原分离，部分猪仍会带菌。从实践来看，泰妙菌素仅能使有食欲的健康猪拌料作预防猪喘气病使用，对较轻有食欲的喘气病猪治疗有效，对明显减食或废食病重的病猪疗效不理想。如果用泰妙菌素和磺胺嘧啶钠按每千克体重分别添加20mg拌入饲料，连喂10天，对该病预防效果好。

4 卡那霉素硫酸卡那霉素药效较高，一般病猪2.5万IU/kg肌肉注射，可作为延缓疾病急性症状发作的有效药物。此药治疗喘气病疗效快，但是复发率较高，一般治愈率仅占50％左右。如用卡那霉素与土霉素交替使用，其疗效会提高。 5 泰乐菌素泰乐菌素注射液，按4-9ml/kg体重肌肉注射，1次/天，连用3天。 6 氟苯尼考猪早期喘气病用此药疗效很好，按0。2ml/kg体重肌肉注射或肺内注射，每天1次，连用3天。如在饲料中添加氟苯尼考治疗效果也不错。 7 林可霉素又称洁霉素，对猪喘气病有特效。按50mg/kg体重给药，5天一个疗程，杂交猪2周治愈率可达88.67％，但对二花脸猪疗效差。如在饲料中添加，按每吨饲料加入200ｇ，连续喂3周，疗效较好，休药期为宰前1天。 8 丁胺卡那霉素 50IU～100IU，在右侧苏气穴注射，每天1次，连用3天，疗效很好。

1医学检验毕业论文 (三种肺炎支原体检测法的临床应用分析)

毕业论文题目：三种肺炎支原体检测法的临床应用分析地市: 学校: 准考证号: 考生姓名: 王莹指导老师: 二〇一八年八月十四日

三种肺炎支原体检测法的临床应用分析摘要目的探讨肺炎支原体（MP）咽拭子快速液体培养法、咽拭子聚合酶链反应（PCR）法和血清MP被动凝集法（MP-Ab）等方法在儿童MP感染诊断治疗过程中的敏感性方法采用3MP检测法对362例临床拟诊呼吸道（非细菌性）感染的患儿的咽拭子和血清标本进行配对研究，每患儿取咽拭子做快速培养和PCR，同时取血清做MP-Ab检测，对3种方法的检测结果与临床诊断治疗病例进行回顾性分析。结果回顾临床病例诊断MP感染患儿152例。MP快速培养法检出阳性78例，阳性率为51.3%，病程为（4.5±2.6）天；PCR法检测出阳性103例，阳性率为67.8%，病程为（6.2±3.5）天；MP-Ab法检测出阳性127例，阳性率83.5%，病程（8.1±4.5）天。结论 3种MP检测法的敏感性与病程有相关性，临床医生应根据患儿病程选取检测方法，以提高阳性检出率和敏感性。关键词肺炎支原体，快速培养法，咽拭子聚合酶链反应，血清抗体，配对研究

目录前言 (4) 第一章文献综述 (5) §1.1 肺炎支原体的定义 (5) §1.2 肺炎支原体的发病机制 (5) §1.3 肺炎支原体的分类 (5) §1.4 肺炎支原体的临床表现 (5) §1.5 肺炎支原体的临床诊断 (5) §1.6 肺炎支原体的实验室检查 (6) 第二章材料和方法 (7) §2.1 样本 (7) §2.2方法概述 (7) §2.3临床诊断MP感染的诊断标准 (7) §2.4实验方法 (7) §2.5统计学方法 .................................................................... .. (8) 第三章结果 (9) 第四章讨论 (10) 结论 (11) 参考文献 (11) 附录 (12) 错误！未定义书签。

猪支原体肺炎的鉴别诊断和预防

猪支原体肺炎的鉴别诊断和预防猪支原体肺炎（猪气喘病）是由猪肺炎支原体引起的一种慢性、接触性呼吸道疾病，表现咳嗽、气喘和生长迟缓，感染率高、死亡率低。感染猪的呼吸道纤毛屏障被破坏，使其它疾病（如猪蓝耳病、圆环病毒、胸膜肺炎、副猪嗜血杆菌病等）混合感染的几率大大增加，肺脏病变加重，呼吸功能和饲料转化率下降，经济损失巨大。该病是一种原发性呼吸道疾病，也是呼吸道病复合体（PRDC）最重要的病原之一，多与其它病原混合感染，使临床表现和剖检症状变得复杂。本文通过对猪支原体肺炎的流行病学、临床评价和检测方法的分析，为其鉴别诊断和防治提供依据。 1 猪支原体肺炎的流行病学和发病机制目前，商品猪场几乎100%感染猪肺炎支原体，带菌散毒猪群普遍存在。仔猪出生后两周内，一般不会自然感染猪支原体肺炎。随着日龄增加，应激增大、抵抗力降低，感染几率随之提升。感染猪肺炎支原体后的潜伏期为3周左右，所以咳嗽症状多出现在7周龄之后，10周龄为发病和抗体转阳高峰，被称之谓“十周龄墙”。猪肺炎支原体通过空气中的气溶胶，经呼吸道感染，首先黏附在猪呼吸道纤毛顶端，进而繁殖并释放代谢中间产物，使纤毛脱落、黏膜受损，呼吸道屏障系统被破坏。吸入空气中的异物、黏膜分泌物和脱落的纤毛，沉降到肺泡中，导致连续干咳和气喘的发生，并逐渐形成肺脏肉变或胰样变。肺脏功能遭到破坏，生长受阻、饲料转化率下降；同时呼吸道纤毛脱落，失去过滤异物、清除病原的能力，增加了其它病原混合感染可能。猪肺炎支原体能长期定居于猪呼吸系统，且具有免疫逃避的特性，难以通过药物或免疫清除，经常反复发病。而纤毛脱落和肺部实变，均是不可逆的，一旦发生终生受其影响，严重的可变成僵猪。 2 猪支原体肺炎的临床症状与咳嗽指数感染猪肺炎支原体后的猪群，体温和食欲无明显变化。发病初期多表现连续性的干咳，后期出现气喘、呼吸困难（猪呈腹式呼吸），部分严重的极度消瘦。若继发感染其它细菌和病毒，则体温升高，死亡率增加。临床上为了与其他因素引起的咳嗽症状进行区分，现将不同因素引发的疾病与咳嗽类型和所对应的临床表现总结如下：猪传染性胸膜肺炎表现为咳嗽、体温高且口鼻流有泡沫或带血黏液、可视粘膜发绀等；猪肺疫表现为连续咳嗽、时有喘鸣声、咽喉部肿胀导致呼

猪支原体肺炎的诊断及防治

猪支原体肺炎的诊断与防治（代刚1 1.奇峰畜牧兽医站）摘要：猪支原体肺炎是养猪业中常遇到的疾病，该病广泛流行于世界各养猪国家和地区，已成为世界性问题。单独地发生本病对猪致死率不高，但它使感染、发病猪的生产性能、抵抗力下降，易导致猪爆发其他传染性疾病，并且猪场一旦发生此病常常难以根治，是危害养猪业健康发展的一个大病老病，在养猪业中需要引起重视。本文就该病的病原、发病机理、临床症状及诊断、预防措施等进行讨论，以期为养猪业避免或减少本病发生，健康发展提供参考。关键词：猪支原体肺炎诊断防治猪衣原体肺炎（mycoplasmal pneumonia of swine，MPS），又称猪地方流行性肺炎（swine enzootic pneumonia）,俗称猪气喘病，是由猪肺炎支原体引起的猪的一种慢性呼吸道传染病[1]。主要临床症状为咳嗽和气喘，病理变化特征是肺的尖叶、心叶、中间叶和膈叶前缘成肉样或虾肉样实变。本病不同年龄、品种的猪，一年四季均可发病，尤其在寒冷多雨潮湿或气候骤变时多发[2]。单独地发生本病对猪致死率虽然不高，但它使感染、发病猪的生产性能、抵抗力下降，易导致猪爆发其他传染性疾病，是危害养猪业健康发展的一个大病老病，一直以来在养猪业中都极为重视。 1.病原本病病原为猪肺炎支原体（Mycoplasmal hyopneumonia），又称为霉形体，是一类能在无生命培养基上生长繁殖的最小原核细胞型微生物,缺乏细胞壁,不能维持固定的形态,呈球形、短杆形、分支丝状等多形态性,最常呈分支丝状[3]。其革兰氏染色阴性，但着色不佳，吉

姆萨或瑞士染色良好。本菌在无细胞人工培养基上培养条件苛刻。液体培养基由水解乳蛋白的组织缓冲液、酵母浸液和猪血清组成。细胞培养可选用猪肺埋块、猪肾和猪睾丸细胞继代培养。病料接种乳兔，经连续传代600多代，对猪的致病力减弱，并仍保持较好的免疫原性，也可在鸡胚中生长。猪肺炎支原体对自然环境抵抗力不强，圈舍、用具上的支原体，一般在2-3d失活，病料悬液中支原体在15-20℃放置36℃即丧失致病力。对青霉素、链霉素、红霉素和磺胺类药物不敏感，对放线菌素D、丝裂菌素C最敏感，对壮观霉素、土霉素、卡那霉素、泰乐菌素、林可霉素、螺旋霉素敏感。常用的化学消毒剂均能达到消毒目的。 2.流行病学自然条件下，仅感染猪，不同年龄段、品种猪均能感染，但乳猪和断乳仔猪易感性最高，发病率和死亡率较高，其次是怀孕后期和哺乳期的母猪，育肥猪发病较少，病情也较轻。母猪和成年猪多呈慢性和隐性。本病一年四季均可发生，但在寒冷、多雨、潮湿或气候骤变时较为多见。饲养管理和卫生条件是影响本病发病率和死亡率的重要因素，尤其在饲料质量、猪舍潮湿和拥挤、通风不良等影响较大。如继发或并发其他疾病，常引起临诊症状加剧和死亡率升高。本病传染源是病猪和带病猪，主要通过接触或飞沫经呼吸道传染，皮下、静脉、肌注或胃管接种病原体都不致病。 3.发病机理支原体聚集并粘连在支气管、细致器官及器官上皮细胞上，首先

支原体肺炎

1、肺炎支原体肺炎的特点不包括 C A．咳嗽重 B．肺部体征不明显 C．青霉素治疗有效 D．血清冷凝集试验阳性 E．多见于年长儿 2、肺炎支原体肺炎临床特点，恰当的是 C A．多无发热 B．小婴儿多见 C．剧烈咳嗽突出 D．肺部体征明显 E．头孢菌素治疗 3、治疗肺炎支原体肺炎的首选药物是 E A．氨基糖苷类 B．耐青霉素酶的部分合成青霉素或头孢菌素C．青霉素G D．氟喹诺酮类 E．大环内酯类 4、治疗支原体肺炎，首选的抗菌药物为：（c）

A．青霉素 B．磺胺类 C．红霉素 D．庆大霉素 E．链霉素 5、支原体肺炎自行消散的时间为：（B） A．7～10天 B．3～4周 C．11～20天 D．2～3天 E．3～5天 6、诊断支原体肺炎的主要依据不包括 B A．临床表现 B．肺功能检查 C．X线表现 D．血清冷凝集试验 E．培养、分离支原体 7、肺炎支原体肺炎最突出的临床症状是 E

A．年长儿多见 B．全身中毒症状不重 C．肺部体征不明显 D．高热 E．频繁、剧烈的咳嗽 8、支原体肺炎最常见的胸部X线表现是 A A．早期为下叶间质性改变，肺实变后为边缘模糊的斑片状阴影 B．肺叶和小叶实变，叶间隙呈弧形下坠，多发性蜂窝状脓肿形成 C．肺叶或肺段实变，呈多发性、周围性肺浸润，可伴气囊肿 D．呈叶、段分布的炎性实变阴影，在实变阴影中可见支气管气道征 E．病变多在肺上部，呈大片浓密阴影，密度不均，历久不消散，可形成空洞9、支原体肺炎应用抗生素的疗程应是(D )。 A．体温正常后停药 B．症状基本消失后 C．1周 D．2～3周 E．4～6周 10、支原体肺炎的好发年龄 C A.小婴儿 B.幼儿

猪支原体肺炎的病原、症状与防治

猪支原体肺炎的病原、症状与防治猪支原体肺炎，又称猪地方流行性肺炎，俗称猪气喘病，是由猪肺炎支原体引起的一种慢性呼吸道传染病。本病广泛分布于世界各地，一般发病率在50%～80%，在国内部分猪场检查，阳性率30%～50%。急性病例以肺水肿和肺气肿为主，亚急性和慢性病例患猪生长缓慢或停止，饲料转化率低，育肥期延长。 1病原介绍猪肺炎支原体是支原体科、支原体属成员。猪肺炎支原体又称猪肺炎霉形体，因无细胞壁，故呈多种形态，有环状、球状、点状、新月状、杆状和两极状；革兰氏染色阴性，但着色不佳；吉姆萨染色或瑞氏染色效果良好。猪肺炎支原体能在无细胞人工培养基上生长，生长条件要求较严格。液体培养基由含有水解乳蛋白的组织缓冲液、酵母浸液和猪血清组成。在液体培养基生长时，首先观察到的是pH 值改变，但产酸的速度与接种量、培养基新鲜度及不同菌株有关，而产酸程度又与菌体毒力和数量有关。在固体培养基上生长缓慢，接种后经7～10d肉眼可见针尖或露珠状菌落，低倍显微镜下菌落呈煎荷包蛋状。猪肺炎支原体对自然环境抵抗力不强，圈舍、用具上的支原体，一般在2～3d即可失活，病料悬液中的支原体在15～20℃放置36h即丧失致病力。对青霉素、链霉素、红霉素和磺胺类药物不敏感，对放线菌素D、丝裂菌素C最敏感，对大观霉素、土霉素、卡那霉素、泰乐菌素、林可霉素、螺旋霉素敏感。常用的化学消毒剂均能达到消毒目的。 2临床症状该病潜伏期一般为11～16天，最短的潜伏期为3～5天，最长可达1个月以上。主要症状

为咳嗽和气喘，根据发病经过可分为急性、慢性和隐性。急性常见于新疫区和新感染猪群，尤以妊娠后期至临产前的母猪及断奶仔猪多见。发病初期精神不振，头下垂，站立一隅或趴伏在地，呼吸次数剧增，每分钟达60～120次。病猪呼吸困难，严重者张口喘气，发出啸鸣声，似拉风箱，呈明显腹式呼吸。咳嗽次数少而低沉，有时也会发生痉挛性阵咳。体温一般正常，如有继发感染则可升至40℃以上，鼻流浆液性液体，食欲大减甚至废绝，饮水量减少。由于饲养管理和卫生条件的不同，疾病的严重程度及病死率差异很大，病程一般为1～2周，病死率较高。慢性型多由急性转变而来，也有部分病猪开始时就取慢性经过，常见于老疫区架子猪、育肥猪和后备母猪。主要症状为咳嗽，清晨和傍晚气温低时或赶猪喂食和剧烈运动时，咳嗽最明显。咳嗽时四肢叉开、站立不动、拱背、颈伸直、头下垂，用力咳嗽多次，声音粗厉、深沉、洪亮，严重时呈连续的痉挛性咳嗽。常出现不同程度的呼吸困难，呼吸次数增加和腹式呼吸。上述症状时而明显、时而缓和。食欲变化不大，但病势严重时食欲减少或废绝。病程较长的仔猪，身体消瘦而衰弱，生长发育停滞。病程可拖延2～3个月，甚至长达半年以上。病程和预后视饲养管理和卫生条件的好坏而相差很大。条件好则病程较短、症状较轻、病死率低；条件差则抵抗力弱、病程长、并发症多、病死率升高。隐性型可由急性或慢性转变而来。有的猪只在较好的饲养管理条件下，感染后不表现临床症状，但其体内存在不同程度的肺炎病灶，这些隐性患猪外表不见明显变化，无明显的临床症状，如加强饲养管理，则肺炎病理变化可逐步吸收消化而康复。反之，饲养管理恶劣，则病情恶化而出现急性或慢性临床症状，甚至引起死亡。 3防治措施疫苗的免疫保护力有限，预防、消灭此病主要在于坚持采取综合性防治措施。支原体肺炎是一种多因子病，除支原体外，猪胸膜肺炎放线杆菌、伪狂犬病病毒、副猪嗜血杆菌、猪多杀

猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较分析

猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较1猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较1目录1

猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较3 1 目的3 2 材料与方法3 2.1 材料3 2.2方法4 2.2.1动物分组说明4 2.2.2动物分组与试验操作概表5 2.2.3免疫6 2.2.4 疫苗免疫后临床症状观察记录7 2.2.5 疫苗免疫后血清抗体及分型检测7 2.2.6 疫苗免疫后细胞免疫指标检测7 2.2.7 疫苗免疫后黏膜免疫指标检测7 2.2.8攻毒7 附录1 攻毒保护率计算9 附录2 猪支原体肺炎发病猪临床症状评判标准10附录3 动物分组记录表10 附录4 动物免疫记录表12 附录5免疫后异常临床症状观察记录表12 附录6 抗体检测记录表13 附录7 淋巴细胞增殖试验结果15 附录8 血象分析15 附录9 T淋巴细胞分类计数15 附录10 黏膜抗体检测记录表15

附录11攻毒记录单15 附录12特殊情况记录表16 附录13 攻毒后临床症状观察记录表17 附录14日增重记录18 附录15 攻毒后肺部剖检记录20 附录16攻毒后剖检记录22 附录17 攻毒后肺部病理损伤记录24 附录18 攻毒后肺部猪肺炎支原体抗原定量检测26 猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较 1 目的猪支原体肺炎活疫苗AN306菌株与原168菌株的肺注射免疫效果比较；猪支原体肺炎疫苗（天邦、正业、辉瑞）免疫效果比较； 2 材料与方法 2.1 材料 2.1.1待试的疫苗产品与试剂 2.1.1.1 疫苗 A.猪支原体肺炎活疫苗AN306株F321，由省农业科学院兽医所研制，规格为2×107CCU/瓶（2ml冻干），批号为20140325。有效期：______。PCR鉴定:Mhp_____，Mhr_______。 B.猪支原体肺炎活疫苗（168株），由天邦生物科技提供，规格为50头份/瓶，批号为139078-1。有效期：______。PCR鉴定:Mhp_____，Mhr_______。 C.猪支原体肺炎活疫苗（乳兔继代株），由正业生物科技提供，规格为4头份/瓶，批号为2014002。有效期：_20150110__ D.猪支原体肺炎灭活疫苗（P-5722-3株，Suvaxyn RespiFend MH），由硕腾（辉瑞）提供，规格为50头份/瓶，批号为1302777A。有效期：15/11/16_ 2.1.1.2 试剂 A．猪支原体肺炎活疫苗（乳兔继代株）稀释液,批号：2014002；有效期：20170115 B．猪支原体肺炎雾化活疫苗稀释液 C．猪支原体肺炎肌注活疫苗佐剂G-1-1

猪支原体肺炎的流行特点及防治措施(一)

猪支原体肺炎的流行特点及防治措施(一) 摘要对猪支原体肺炎的流行特点、临床症状、发病机理进行分析,提出防治措施,以期为该病的防治提供参考。关键词猪支原体肺炎;流行特点;临床症状;防治措施猪支原体肺炎,又称猪地方性流行性肺炎,是由猪肺炎支原体引起的猪的一种慢性呼吸道传染病1]。猪支原体肺炎流行广泛,虽然死亡率不大,但发病率很高。病猪生长发育不良,特别是幼猪,造成大量饲料和人力的浪费。新疫区此病常以暴发形式出现,大小猪均可发生,死亡率高,并影响优良种猪的推广,造成巨大经济的损失。 1流行特点病猪和带菌猪是本病的传染源。病猪与健康猪直接接触,或通过飞沫经呼吸道感染。不同年龄、性别和品种的猪都可感染,但以哺乳仔猪和幼龄猪易感性最高。在哺乳期,该病通过母猪传给小猪,小猪在6周龄时可能才出现临床症状。妊娠后期母猪经常急性发作,死亡率较高。本病呈地方性流行,根据病程可分为急性、慢性和隐性3个类型。通常是在短时期内有较多的猪发病。发病时病情急、病程短、死亡率高,经过一段时间后转为慢性,母猪和成年猪多呈慢性和隐性。慢性症状不明显,死亡率低。本病一旦传入后,如不采取严密措施,很难彻底扑灭。本病终年均可发生,但在气候骤变、猪舍阴冷潮湿、肮脏、猪群拥挤、饲养管理以及卫生条件不好时,可促使该病的发生。在饲料质量差、缺乏维生素或是突然更换饲料,圈舍阴暗潮湿寒冷、拥挤、通风不良、长途运输、寄生虫病等,可促进病情加重。在自然感染的病例中,常继发巴氏杆菌病、沙门氏杆菌病、胸膜肺炎等,可促使病情复杂化,死亡率明显增加。 2临床症状本病的潜伏期一般为11～16d,短的为3～5d,长的可达1个月以上。2009年6—8月在林街乡一养猪场突然发生,临床主要症状是咳嗽和气喘。病初表现为咳嗽,尤其是早晚吃食和运动后最为明显,连续咳3～4声,多至20多声。随着病情严重,咳嗽次数增多,时间增长,声音嘶哑无力,甚至咳不出声。咳嗽时,病猪呆立不动,背拱,颈伸直,头下垂。呼吸次数增多,可达80～120次/min或者更多,并伴有明显的喘气表现。喘气多发生于病的中后期,呈明显的腹式呼吸。严重的还出现张口呼吸。病猪常呈犬坐姿势,将嘴支于地面喘息,咳嗽次数少而沉弱,似有分泌物堵塞但难于咳出,听诊肺部有干性或湿性罗音。病猪精神萎顿,逐渐消瘦,衰弱,生长发育停滞2]。经观察,此次患病病猪多数体温正常,食欲一般变化不大,但在病情严重时也会出现不食或少食的情况。 3发病机理本病是猪肺炎支原体随空气侵入肺部后,支原体聚集并粘连在支气管、细支气管及气管上皮细胞上。先引起支气管炎,随着向附近的肺组织扩散,侵入肺泡,引起支气管炎。肺炎面积逐渐扩大,炎性渗出液随之增多。发展为支气管炎,部分肺泡失去呼吸机能。肺活量随之降低,严重影响肺的正常功能。引起呼吸和血液循环,系统机能障碍,出现呼吸次数增多,喘气和心跳加快,当缺氧严重时,可引起心力衰竭和窒息而死亡。

肺炎支原体肺炎病情的临床诊断

肺炎支原体肺炎病情的临床诊断发表时间：2013-08-15T16:51:17.607Z 来源：《中外健康文摘》2013年第27期供稿作者：曲红艳[导读] 发病后10～14日，血清中可检出特异性抗体(补体结合试验阳性)。如条件允许，取患者痰、鼻咽拭子标本做支原体培养。曲红艳 (大庆油田总医院集团五官医院 163000）【中图分类号】R563.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）27-0421-02 【摘要】目的对肺炎支原体肺炎病情的研究。方法真对感染的患者进行研究，采用间接免疫荧光法进行肺炎的治疗，观察病情的状况。结论肺炎支原体肺炎病情是呼吸道感染的重要病原体，这对呼吸道感染造成了严重的危害。【关键词】肺炎肺炎支原体肺炎病情研究引言肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae，MP)肺炎是肺炎支原体引起的急性呼吸道感染伴肺炎，过去曾称为Eaton因子性肺炎、冷凝集素肺炎。肺炎支原体感染人体后，经过2~3周的潜伏期，继而出现临床表现，约1/3的病例也可无症状。 1 流行病学肺炎支原体是介于病毒和细菌之间的一种微生物，含DNA和RNA，没有细胞壁。肺炎支原体感染流行周期为4～7年，流行时发病增加3～5倍。肺炎支原体感染可在任何年龄发生，但其下呼吸道感染主要发生在学龄儿童和年轻人，尤其以5～20岁多见。肺炎支原体通过飞沫以气溶胶微粒的形式传播，传染性较小，需要长时间密切接触才能发病，因此易在家庭成员中相互传染。肺炎支原体潜伏期为16～32日，潜伏期即具传染性；症状出现1周内呼吸道含菌量最高，至症状缓解数周仍具传染性；患者痊愈后，肺炎支原体仍可在咽部存留1～5个月。 2 并发症本病常见肺外并发症，最常见的是神经病变。呼吸道症状出现后的几日或消失后的2周均可见神经症状，其机制可能涉及感染和感染后2种。高达50％的患者就诊时可无呼吸道症状。神经症状多见于儿童(支原体感染占儿童脑炎的10％～15％)，其脑脊液的典型改变是有少量淋巴细胞(50～100/m1)，蛋白质轻度升高或正常，偶有糖降低。脑炎可表现为昏迷或精神异常，以及局灶症状，如卒中、共济失调、舞蹈病。目前已有感染后脑白质炎的相关报道。患者还可有脑膜炎或多种类型的脊髓炎(包括横断型脊髓炎、类脊髓灰质炎综合征)的表现，以及外周神经和颅神经的病变。5％的格林-巴利综合征(Guillain-Barre syndrome)由肺炎支原体引起。本病的神经后遗症依次为精神发育迟滞、运动失调和癫痫。 10％～20 %的患者有皮疹，多数为斑丘疹，但也可为水泡、瘀点或荨麻疹；多见于躯干和肢端，脸、臀部、生殖器及手足也可出现，但不常见；可出现在疾病的急性期、发病前或病后。多数患者有明显的呼吸道症状，有的还伴有结膜炎或鼻咽部黏膜疹。其他与肺炎支原体感染有关的皮疹还有玫瑰糠疹、毒性上皮坏死溶解、结节性红斑、多形性红斑或渗出性多形性红斑(Stevens-Johnsonsyndrome)。血液并发症是支原体感染的突出特征。贫血、溶血性贫血、血小板减少、弥散性血管内凝血、血栓栓塞、血栓性血小板减少性紫癜、Pelger-Huet异常(多形核白细胞具有单叶或双叶表现)和嗜血细胞综合征均有报道，但最常见的血液学异常是冷凝集素形成。此外，患者还有游走性关节炎，可累及中等大小关节，有时像类风湿性关节炎。眼科并发症有巩膜炎、结膜炎、视神经炎并视神经萎缩，有时可见视网膜出血和渗出。本病还可有其他多个系统受累，如大疱性鼓膜炎、肾小球肾炎、肝炎、胰腺炎、脾肿大、多发性肌炎和雷诺现象(Raynaud's phenomenon)。 3 诊断 3.1 诊断标准之一 3.1.1急性肺炎衣原体感染：急性期和恢复期的2次血清标本抗体滴度相差4倍，或单次血清标本的IgM抗体滴度≥1：16和(或)单次血清标本的IgG抗体滴度≥1：512。 3.1.2既往有肺炎衣原体感染：IgM滴度<1：16，并且1：16

猪支原体肺炎灭活疫苗

猪支原体肺炎灭活疫苗（P-5722-3株）本品系用猪肺炎支原体P-5722-3株（NL1042株）接种适宜培养基培养，收获培养物，经BEI灭活后，与矿物油佐剂混合乳化制成。用于预防猪支原体肺炎。 [处方] [制法] [性状]乳白色乳剂。 [鉴别] [检查] [含量测定] [功能与主治]/[作用与用途] [用法与用量]/[用法与判定] [注意事项] [规格]（1）50头份（100ml）/瓶（2）250头份（500ml）/瓶（3）500头份（1000ml）/瓶 [贮藏]2～8℃保存，有效期为24个月。 [制剂] 附注：猪支原体肺炎灭活疫苗效力检验方法采用固相ELISA法测定疫苗中所含抗原的相对效力单位。 1 材料1.1 设备1.1.1 96孔微量反应板1.1. 2 酶联读数仪1.1. 3 超声波裂解器1.1. 4 离心机 1.1. 5 14×89mm离心管 1.1. 6 25×89mm离心管 1.1. 7 加样器及配套吸头 1.1. 8 酶联洗板机 1.1. 9 温箱 1.1.10 pH计 1.1.11 混合器

1.1.12 试剂贮存管1.1.13 微量板震荡器1.1.14 RELPOT软件包（3.1或更新版本）1.1.15 吸水纸 1.2 缓冲液 1. 2.1 0.01mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）氯化钠8.0g 氯化钾0.2g 磷酸二氢钾0.2g 磷酸氢二钠 1.15g 纯水加至 1 L 将各种盐按比例溶解于水中，调至pH 7.2 0.1。在室温下保存，如不打开，可使用6个月，打开后，可使用3个月。1.2.2 PBS-吐温20 （PBST）取0.5ml 吐温20，加到1L PBS中。在室温下保存，如不打开，可使用6个月，打开后，可使用3个月。1.2.3 1% PV A/PBS 取10g聚乙烯醇（PV A，88%水解物），加到1L PBS中，稍加热，使其溶解。滤过。在室温下保存，可使用3个月。 1.3 试剂 1.3.1 猪肺炎支原体单克隆抗体Norden杂交瘤1-2'腹水单抗。在-10～-25℃下保存。经Western Blot试验证实，该单抗识别猪肺炎支原体上的40kD蛋白质。1.3.2 参考疫苗1.3.3 阴性对照品含5% Amphigen的生理盐水乳剂。在-65℃下保存。 1.3.4 阳性对照品 1.3.5 酶结合物通过亲和层析方法纯化的羊抗鼠IgG（H+L）过氧化物酶结合物，每瓶1.0mg。冻干的酶结合物在2～8℃下保存，使用时，用1% PV A/PBS稀释至终浓度为0.5mg/ml。稀释后的酶结合物在-10～-25℃下可保存1年。 1.3.6 底物ABTS。 2 待检疫苗、参考疫苗、阳性对照品、阴性对照品的处理 2.1 将各种样品（待检疫苗、参考疫苗、阳性对照品和阴性对照品）至少14ml在65℃以下冷冻至少24小时。2.2 将待检疫苗、参考疫苗、阳性对照品和阴性对照品在37 2℃下融化20分钟。 2.3 将上述样品分别分成2等份（各7ml），分别加入离心管中，超声处理55～65秒（脉冲，50%功率循环，输出功率=4），并用循环水进行冷却。2.4 将上述每种超声处理过的样品混合，分别倒入超速离心管中（每种样品约12.0～12.5ml），在2～8℃下以30000r/min离心6小时。2.5 离

肺炎支原体肺炎的诊断

肺炎支原体肺炎的诊断空军总医院刘春灵支原体是介于细菌和病毒之间的一类缺乏细胞壁、呈高度多型性、能通过滤菌器、可在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物。迄今分离到的支原体已达150余种，已确定与人类疾病关系最大的有3种，肺炎支原体（mycoplasma pneumonia, MP）是其中的一种。MP在国内外都是儿童和成人呼吸道感染的重要病原体之一，主要导致肺炎，所有肺炎的15-20%，约50%的儿童和青少年肺炎是由MP引起的.因此MP肺炎（MP pneumonia,MPP）是常见病和多发病。但迄今为止，MPP仍缺乏快速、可靠的诊断试验，因而临床确诊困难。 MPP的诊断包含两个层面：临床诊断（经验性）和结合了实验室病原学检测的确定诊断。一、MPP临床诊断：根据流行病学、临床症状、体征、实验室辅助检查等特点经验性综合判断而出。MPP有着不同于一般感染性疾病的的特点：一般肺炎多发于冬季，MPP一年四季均可发病，但多发生于夏秋季节；临床症状大多只有发热和咳嗽；外周血白细胞总数大多不高；疾病早期X线检查即可出现肺炎，约10%-20%的病例会出现肺不张；因MP无细胞壁，临床常用的、作用于细胞壁的、安全性高的治疗肺炎的药物如β-内酰胺类的青霉素类、头孢类抗生素对其无作用；因此易被误诊为病毒性肺炎。综合上述特点，可作出初步的经验性临床诊断。二、实验室病原学诊断：包括直接病原体检测和血清学检测。下面介绍几种常用或经典的MP实验室诊断方法。（一）直接病原体检测：主要有MP分离培养和聚合酶链反应（PCR）法检测MP-DNA。检测用标本可取自可疑患者呼吸道的痰、咽拭子、鼻咽吸出物、支气管肺泡灌洗液、胸水等。 1、MP分离培养与鉴定： MP很挑剔，培养基的营养要求比一般细菌高，生长速度慢，较一般细菌难培养；分离培养需要10-14天，而通常需要2-5周才能生长成肉眼可见的菌落。通过生化反应和免疫学方法进行鉴定。还有其它影响因素，如MPP无细胞壁，对环境的影响更为敏感，易被灭活；标本采集后接种到培养基的过程也是培养可能失败的一个环节。由于其费时、费力、阳性率低，实际临床已经弃用此方法，目前主要用于研究性项目。