实验型高血压
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注：方法来源于复旦大学硕士学位论文
总结：1、从以上实验也可以看出动物造模是实验室研究药
物作用的基础，造模的成功与否以及造模类型直接影响到 实验的成功与否。 2、通过以上两个实验的研究方法，首先，我们可以 发现高血压药物在实验室的研究多以动物实验为主，通过 药物与阳性对照药的药物作用比较得出结论，其次，实验 者多是通过宏观现象来判断药物是否有效，再通过微观物 质的鉴定，以及对肾脏组织的鉴定和对血液的检测来判断 其作用机理。
肾外包扎性高血压模型操作步骤：
150— 200g 大 鼠 ， 用 安 定 5mg/kg 和 氯 胺 酮 50mg/kg，ip麻醉，仰卧位固定，剪去腹部手术野毛， 皮肤消毒后于剑下1.5cm沿腹中线切开皮肤及肌层，找 到肾脏，将肾脏轻轻挤出，小心的将肾与周围组织剥 离，将自制的双层乳胶薄膜剪成“X”形，绕开肾门 交叉包扎，同法对右肾进行包扎，缝合手术切口，皮 下注射2万单位青霉素，约20天即可约有70%以上大鼠 出现持续性高血压，收缩压一般可升高50%以上。
（四）、遗传性高血压模型
１、选择性近亲繁殖高血压模型 遗传性高血压大鼠有多种品系，如： 遗传性高血压大鼠（GH） 自发性高血压大鼠（SHR） Dahl 盐敏感大鼠（DS） 里昂株高血压大鼠（LH） 蒙特斯种高血压大鼠（SHM） 米兰种高血压大鼠（MHS） 其中具有使用价值，应用较广泛的是日本学者培育的突变系自发性高血压大鼠（SHR）及其亚系，它们是目前国际上公 认的最接近人类原发性高血压的动物模型。
（一）、辛伐他汀对高血压大鼠的作用研究 方法
1、实验材料
（1）实验动物：8周龄健康雄性wistar大鼠40只，体重 180—220g （2）试验药物：辛伐他汀：40mg/片 卡托普利：12.5mg/片
2、主要试剂及仪器
血管紧张素II 放射免疫分析试剂盒、NO含量检测试剂 盒、 羟脯氨酸含量检测试剂盒、8-iso-PGF2a检测试剂盒、 TC、TG、LDL-C检测试剂盒，MD100-1电子分析 、 BX51 型光显微镜、HX-II型为套式小动物血压测量仪、分光光度 计、 -4到-70摄氏度冰箱
3、结果
（1）一般情况：体重、肾功能及肾脏组织学检测、 尾动脉收缩压、钠摄入量、血钠浓度、24H尿量 （UV）及尿钠排泄 （2）改变盐负荷后UV的每日变化情况 （3）改变盐负荷后尿钠每日变化情况 （4）不同COX的分布于表达（cox-1、cox-2、肾 脏髓质COX-2） （5）血、24h尿醛固酮的变化
09中药（1）班
第二组
一、高血压动物建模方法分类
1、肾性高血压模型 2、内分泌性高血压模型 3、神经原性高血压模型 4、遗传性高血压模型 5、环境型高血压模型
（一）、肾性高血压模型
1、肾血管性高血压模型（肾动脉狭窄性高血压模型）
分类： （1）两肾一夹型（两侧肾完好，一侧肾动脉狭窄） （2）一肾一夹型（一侧肾切除，另一侧肾动脉狭窄） （3）两肾两夹型 (两肾均完好，两侧肾动脉狭窄）
（五）、环境性高血压模型
研究发现正常大鼠暴露于5℃ 的环境中3周即可形 成高血压并且伴有心肌肥厚。如果暴露7 周，去除冷 环境后4周内其血压都不会恢复正常。故推测，暴露时 间更长将会形成不可逆转的高血压动物模型。
二、高血压药物的研究方法
1、辛伐他汀对高血压大鼠的作用研究方法 2、阻断环氧化没-2对高血压大鼠的作用研究方法
(3) 给药： a、卡托普利组：25mg卡托普利溶于3.75ml双蒸水内， 一天一次，每次1.5ml/100g。药物剂量100mg/kg.d。 b、辛伐他汀组：8mg辛伐他汀溶于60ml双蒸水中， 一天一次，每次1.5ml/100g。药物剂量2mg/kg.d c、卡托普利+辛伐他汀组：辛伐他汀2mg和卡托普利 100mg溶于16ml双蒸水内，一天一次，每次1.5ml/100g, 药物剂量：辛伐2mg/kg.d、卡托普利：100mg/kg.d。 d、 假手术组与高血压组在ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ样的时间内每日同一时 间灌双蒸馏水一次，每次1.5ml/kg.d （4）血压测量：用HX-II型尾套是小动物血压测量计测 定大鼠血压，并且应当在一定时间内，完成所有操作， 一般固定于每天上午的8点至12点。血压测定重复测定3 次，求三次的均值作为测压结果。
2、肾外包扎性高血压模型（肾外压迫性高血压模型) 分类： （1）两肾一扎型（两侧肾完好，一侧肾包扎） （2）一肾一扎型（一侧肾切除，另一侧肾包扎） （3）两肾两扎型（两侧肾完整，两侧肾包扎）
原理：肾外异物包扎，可致肾周围炎在肾外形成纤
维素性鞘膜，压迫肾实质，造成肾组织缺血，使肾素 形成增加，进而是血管紧张素含量增多，血压升高。
3、实验方法
（1）建模： 建立两肾一夹肾性高血压大鼠模型。并选用 收缩压超过150mmHg, 并且在原来基础上升20mmHg以 上者位高血压大鼠建模成功，备用。 （2）分组：选用健康雄性8周龄的wistar大鼠40只，体重 180-220g，适应性喂养1周后，随机取7只作为假手术组， 其余33只进行两肾一夹手术造模。造模组及假手术组均 喂养4周，选取造模成功的大鼠并重新分组：高血压组 （H组，n=6）、辛伐他汀治疗组（S组，n=8）、卡托普 利组（C组，n=6)、合用组（C+S组，n=8）。另设假手 术组为对照组（sh组，n=6）。一组一笼，每笼的大鼠 用苦味酸标记，以便饲养，观察和记录数据。
原理：狭窄肾动脉可以造成肾脏缺血，导致肾脏内肾
素合成和分泌增多，进而增高血管紧张素的含量，使血 压升高。
肾血管性高血压模型的操作步骤：
肾血管性高血压大鼠的制备：150—200g大鼠，用安定 5mg/kg和氯胺酮50mg/kg，麻醉，仰卧位固定，剪去 腹部手术野毛，皮肤消毒后于剑下1.5cm沿腹中线切开 皮肤及肌层，找到肾脏，将肾脏轻轻挤出，用眼科镊 分离肾动脉，在近主动脉端用U形银夹套上，然后缝 合切口。随后血压将逐渐升高，4—5周后70%的大鼠 形成持续性高压，收缩压>160mmhg。
（二）、内分泌性高血压模型
1、DOC盐性高血压模型
原理：去氧皮质酮（DOC）为盐皮质激素，具有
明显的水钠潴留作用，使细胞外液增加，血压升高。 大鼠一侧肾切除后皮下注射DOC和附加饮用1%氯化钠 溶液可形成持续高血压。
DOC盐性高血压模型制作步骤：
大鼠100—150g，用安定5mg/kg和氯胺酮50mg/kg ip麻醉，腹部正中切口进行左肾切除。术后大鼠用醋 酸去氧皮质酮（DOCA）50mg/kg，sc，qd，每周给药 5天，共五周，同时饮用1%氯化钠溶液，停药后改饮普 通水。给药一周后约50%大鼠血压升高，给药五周停 药后70%大鼠形成持久性高血压，收缩压>21.3kpa 者用作实验。
（5）相关数据的采集 检测NO和血脂含量、血浆和心肌AngII的测定、血浆8异前列素F2a 的测定 （6）相关结构及生理变化的检测 左室质量指数的测定、心肌组织羟脯氨酸龙都的测定 （7）统计学分析
注：方法来源于山西医科大学硕士论文
（二）、阻断环氧化没-2对高血压影响的 研究方法
1、实验动物的来源于分组：
1973 年Jannetta 在手术观察基础上提出脑干左侧 Ⅸ，Ⅹ颅神经根入脑区（REZ）被血管压迫是原发性 高血压的原因，即“神经源性高血压”假说。在此基 础上，许多学者从临床及实验研究证实了Jannetta 的 假说。最初采用脉动球囊法，即有大小两个橄榄球囊， 中间细管相连，内充液体，大囊置于主动脉内，小囊 置于延髓左侧来建立高血压动物模型。
（1）实验动物的来源：8周龄雄性大鼠10只 （2）药物来源与分组：COX-2选择性抑制剂塞来昔 布胶囊，增加盐负荷的效果，本研究选择低盐饮食 与高盐饮食进行对比。大鼠随机分组（n=5）：低 盐饮食组、高盐饮食组。
2、实验方法：
实验前大鼠置于大鼠笼中饲养3天，所有大鼠给予低盐 饮食（含0.04%NaCl）同时给予celecoxib（25mg/kg.d) 灌胃5天。第6天开始，低盐实验组给予celecoxib灌胃 及低盐饮食，高盐饮食组改为给予celecoxib灌胃及高 盐饲料（含8%NaCl），连续三天。实验过程中称量每 日投放量及回收量，计算每日盐摄入量
2、肾上腺素再生性高血压模型 幼年大鼠左侧肾和肾上腺素切除，右侧肾上腺包 膜用小刀切一小口，用弯头无头眼科镊轻压肾上腺将 髓质和大部分皮质剔除。术后饮用1%氯化钠溶液。术 后两周动物血压和血浆DOC含量明显升高，术后7—14 周血浆DOC下降到正常水平，但血压仍维持高血压水 平。
（三）、神经原性高血压模型
2、基因工程高血压模型 1990 年德国科学家首先将一个高血压候选基因 （小鼠DBA/2JR-2 肾素基，Ren-2）转入大鼠的生殖细 胞而制备携带该候选基因的转基因大鼠（TGR），由 此而建立了一种新的高血压大鼠模型：TGR，该模型4 周龄时血压升高，9周时达199.5～259.4 mmHg （对照 组119.7～129.7 mmHg）。血浆活性肾素（PRA）和血 管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平正常或降低，肾脏的肾素 合成明显受抑，但肾上腺等肾外组织的肾素合成却显 著增强。
总结：1、从以上实验也可以看出动物造模是实验室研究药
物作用的基础，造模的成功与否以及造模类型直接影响到 实验的成功与否。 2、通过以上两个实验的研究方法，首先，我们可以 发现高血压药物在实验室的研究多以动物实验为主，通过 药物与阳性对照药的药物作用比较得出结论，其次，实验 者多是通过宏观现象来判断药物是否有效，再通过微观物 质的鉴定，以及对肾脏组织的鉴定和对血液的检测来判断 其作用机理。
肾外包扎性高血压模型操作步骤：
150— 200g 大 鼠 ， 用 安 定 5mg/kg 和 氯 胺 酮 50mg/kg，ip麻醉，仰卧位固定，剪去腹部手术野毛， 皮肤消毒后于剑下1.5cm沿腹中线切开皮肤及肌层，找 到肾脏，将肾脏轻轻挤出，小心的将肾与周围组织剥 离，将自制的双层乳胶薄膜剪成“X”形，绕开肾门 交叉包扎，同法对右肾进行包扎，缝合手术切口，皮 下注射2万单位青霉素，约20天即可约有70%以上大鼠 出现持续性高血压，收缩压一般可升高50%以上。
（四）、遗传性高血压模型
１、选择性近亲繁殖高血压模型 遗传性高血压大鼠有多种品系，如： 遗传性高血压大鼠（GH） 自发性高血压大鼠（SHR） Dahl 盐敏感大鼠（DS） 里昂株高血压大鼠（LH） 蒙特斯种高血压大鼠（SHM） 米兰种高血压大鼠（MHS） 其中具有使用价值，应用较广泛的是日本学者培育的突变系自发性高血压大鼠（SHR）及其亚系，它们是目前国际上公 认的最接近人类原发性高血压的动物模型。
（一）、辛伐他汀对高血压大鼠的作用研究 方法
1、实验材料
（1）实验动物：8周龄健康雄性wistar大鼠40只，体重 180—220g （2）试验药物：辛伐他汀：40mg/片 卡托普利：12.5mg/片
2、主要试剂及仪器
血管紧张素II 放射免疫分析试剂盒、NO含量检测试剂 盒、 羟脯氨酸含量检测试剂盒、8-iso-PGF2a检测试剂盒、 TC、TG、LDL-C检测试剂盒，MD100-1电子分析 、 BX51 型光显微镜、HX-II型为套式小动物血压测量仪、分光光度 计、 -4到-70摄氏度冰箱
3、结果
（1）一般情况：体重、肾功能及肾脏组织学检测、 尾动脉收缩压、钠摄入量、血钠浓度、24H尿量 （UV）及尿钠排泄 （2）改变盐负荷后UV的每日变化情况 （3）改变盐负荷后尿钠每日变化情况 （4）不同COX的分布于表达（cox-1、cox-2、肾 脏髓质COX-2） （5）血、24h尿醛固酮的变化
09中药（1）班
第二组
一、高血压动物建模方法分类
1、肾性高血压模型 2、内分泌性高血压模型 3、神经原性高血压模型 4、遗传性高血压模型 5、环境型高血压模型
（一）、肾性高血压模型
1、肾血管性高血压模型（肾动脉狭窄性高血压模型）
分类： （1）两肾一夹型（两侧肾完好，一侧肾动脉狭窄） （2）一肾一夹型（一侧肾切除，另一侧肾动脉狭窄） （3）两肾两夹型 (两肾均完好，两侧肾动脉狭窄）
（五）、环境性高血压模型
研究发现正常大鼠暴露于5℃ 的环境中3周即可形 成高血压并且伴有心肌肥厚。如果暴露7 周，去除冷 环境后4周内其血压都不会恢复正常。故推测，暴露时 间更长将会形成不可逆转的高血压动物模型。
二、高血压药物的研究方法
1、辛伐他汀对高血压大鼠的作用研究方法 2、阻断环氧化没-2对高血压大鼠的作用研究方法
(3) 给药： a、卡托普利组：25mg卡托普利溶于3.75ml双蒸水内， 一天一次，每次1.5ml/100g。药物剂量100mg/kg.d。 b、辛伐他汀组：8mg辛伐他汀溶于60ml双蒸水中， 一天一次，每次1.5ml/100g。药物剂量2mg/kg.d c、卡托普利+辛伐他汀组：辛伐他汀2mg和卡托普利 100mg溶于16ml双蒸水内，一天一次，每次1.5ml/100g, 药物剂量：辛伐2mg/kg.d、卡托普利：100mg/kg.d。 d、 假手术组与高血压组在ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ样的时间内每日同一时 间灌双蒸馏水一次，每次1.5ml/kg.d （4）血压测量：用HX-II型尾套是小动物血压测量计测 定大鼠血压，并且应当在一定时间内，完成所有操作， 一般固定于每天上午的8点至12点。血压测定重复测定3 次，求三次的均值作为测压结果。
2、肾外包扎性高血压模型（肾外压迫性高血压模型) 分类： （1）两肾一扎型（两侧肾完好，一侧肾包扎） （2）一肾一扎型（一侧肾切除，另一侧肾包扎） （3）两肾两扎型（两侧肾完整，两侧肾包扎）
原理：肾外异物包扎，可致肾周围炎在肾外形成纤
维素性鞘膜，压迫肾实质，造成肾组织缺血，使肾素 形成增加，进而是血管紧张素含量增多，血压升高。
3、实验方法
（1）建模： 建立两肾一夹肾性高血压大鼠模型。并选用 收缩压超过150mmHg, 并且在原来基础上升20mmHg以 上者位高血压大鼠建模成功，备用。 （2）分组：选用健康雄性8周龄的wistar大鼠40只，体重 180-220g，适应性喂养1周后，随机取7只作为假手术组， 其余33只进行两肾一夹手术造模。造模组及假手术组均 喂养4周，选取造模成功的大鼠并重新分组：高血压组 （H组，n=6）、辛伐他汀治疗组（S组，n=8）、卡托普 利组（C组，n=6)、合用组（C+S组，n=8）。另设假手 术组为对照组（sh组，n=6）。一组一笼，每笼的大鼠 用苦味酸标记，以便饲养，观察和记录数据。
原理：狭窄肾动脉可以造成肾脏缺血，导致肾脏内肾
素合成和分泌增多，进而增高血管紧张素的含量，使血 压升高。
肾血管性高血压模型的操作步骤：
肾血管性高血压大鼠的制备：150—200g大鼠，用安定 5mg/kg和氯胺酮50mg/kg，麻醉，仰卧位固定，剪去 腹部手术野毛，皮肤消毒后于剑下1.5cm沿腹中线切开 皮肤及肌层，找到肾脏，将肾脏轻轻挤出，用眼科镊 分离肾动脉，在近主动脉端用U形银夹套上，然后缝 合切口。随后血压将逐渐升高，4—5周后70%的大鼠 形成持续性高压，收缩压>160mmhg。
（二）、内分泌性高血压模型
1、DOC盐性高血压模型
原理：去氧皮质酮（DOC）为盐皮质激素，具有
明显的水钠潴留作用，使细胞外液增加，血压升高。 大鼠一侧肾切除后皮下注射DOC和附加饮用1%氯化钠 溶液可形成持续高血压。
DOC盐性高血压模型制作步骤：
大鼠100—150g，用安定5mg/kg和氯胺酮50mg/kg ip麻醉，腹部正中切口进行左肾切除。术后大鼠用醋 酸去氧皮质酮（DOCA）50mg/kg，sc，qd，每周给药 5天，共五周，同时饮用1%氯化钠溶液，停药后改饮普 通水。给药一周后约50%大鼠血压升高，给药五周停 药后70%大鼠形成持久性高血压，收缩压>21.3kpa 者用作实验。
（5）相关数据的采集 检测NO和血脂含量、血浆和心肌AngII的测定、血浆8异前列素F2a 的测定 （6）相关结构及生理变化的检测 左室质量指数的测定、心肌组织羟脯氨酸龙都的测定 （7）统计学分析
注：方法来源于山西医科大学硕士论文
（二）、阻断环氧化没-2对高血压影响的 研究方法
1、实验动物的来源于分组：
1973 年Jannetta 在手术观察基础上提出脑干左侧 Ⅸ，Ⅹ颅神经根入脑区（REZ）被血管压迫是原发性 高血压的原因，即“神经源性高血压”假说。在此基 础上，许多学者从临床及实验研究证实了Jannetta 的 假说。最初采用脉动球囊法，即有大小两个橄榄球囊， 中间细管相连，内充液体，大囊置于主动脉内，小囊 置于延髓左侧来建立高血压动物模型。
（1）实验动物的来源：8周龄雄性大鼠10只 （2）药物来源与分组：COX-2选择性抑制剂塞来昔 布胶囊，增加盐负荷的效果，本研究选择低盐饮食 与高盐饮食进行对比。大鼠随机分组（n=5）：低 盐饮食组、高盐饮食组。
2、实验方法：
实验前大鼠置于大鼠笼中饲养3天，所有大鼠给予低盐 饮食（含0.04%NaCl）同时给予celecoxib（25mg/kg.d) 灌胃5天。第6天开始，低盐实验组给予celecoxib灌胃 及低盐饮食，高盐饮食组改为给予celecoxib灌胃及高 盐饲料（含8%NaCl），连续三天。实验过程中称量每 日投放量及回收量，计算每日盐摄入量
2、肾上腺素再生性高血压模型 幼年大鼠左侧肾和肾上腺素切除，右侧肾上腺包 膜用小刀切一小口，用弯头无头眼科镊轻压肾上腺将 髓质和大部分皮质剔除。术后饮用1%氯化钠溶液。术 后两周动物血压和血浆DOC含量明显升高，术后7—14 周血浆DOC下降到正常水平，但血压仍维持高血压水 平。
（三）、神经原性高血压模型
2、基因工程高血压模型 1990 年德国科学家首先将一个高血压候选基因 （小鼠DBA/2JR-2 肾素基，Ren-2）转入大鼠的生殖细 胞而制备携带该候选基因的转基因大鼠（TGR），由 此而建立了一种新的高血压大鼠模型：TGR，该模型4 周龄时血压升高，9周时达199.5～259.4 mmHg （对照 组119.7～129.7 mmHg）。血浆活性肾素（PRA）和血 管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平正常或降低，肾脏的肾素 合成明显受抑，但肾上腺等肾外组织的肾素合成却显 著增强。