中科院分子生物学试题库题库3

中科院分子生物学试题库题库3

1．阐述原核生物的转录终止。

(1)转录终止的两种要紧的机制是什么?

(2)描述翻译如何样能调剂转录终止。

(3)什么缘故在细菌转录终止中专门少涉及到Pho因子?

(4)如何样能阻止转录的终止?

2．复制DNA的聚合酶(DNA依靠的DNA聚合酶)也有校正功能，讲明什么缘故RNA聚合酶没有这种功能。

3．讨论原核生物基因表达的聚合作用反应定向的重要性。如果核糖体从3’端到5’端读它的模板mRNA的话，那么将会发生什么情形?

4．概括细菌细胞内的转录过程。

5. 概括典型原核生物启动子的结构和功能，并讲明什么是保守序列。

6．转录如何在基因或基因组末端终止?

7．(1)如何区分由启动子起始转录的RNA片段与5’端被加工过的RN A片段;

(2)证明多肽是从氨基端到羧基端方向合成的。

8．比较E．coli rRNA和tRNA的转录和加工。

9．区不可诱导和可阻遏的基因调控。

10．衰减作用如何调控E. coli中色氨酸操纵子的表达?

11．比较并指出细菌和真核生物RNA 翻译机理的异同。

12．什么是摇摆假讲?

13．指出E.coli和真核生物翻译起始的不同。

14．S．N Cohen于1973年构建了三个重组体，pSC102，pSC105，pSC109请讲明这三个重组体是如何获得的?各讲明了什么?

15．基因克隆是如何使含有单个基因的DNA片段得到纯化的?

16．什么是细菌的限制—修饰系统(restriction-modificaton system, R-M system)

17．细菌的限制—修饰系统有什么意义?

18．讲明限制性内切核酸酶的命名原则要点。

19．Ⅰ类限制酶具有哪些特点?在基因工程中有什么作用?

20．Ⅲ类限制酶有哪些特点?

21．何谓限制性内切核酸酶的切割频率?

22．什么是限制性内切核酸酶的星号活性?受哪些因素阻碍?

23．双酶消化法(double digests)绘制限制性内切核酸酶酶谱的原理。

24．什么是 DNA 多态性(DNA polymorphism)?

25．限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism ，RFLP)。

26．运算下列三种酶各悠闲某染色体 DNA 序列上识不位点间的平均距离：

Alu Ⅰ：5’AGCT 3” EcoR Ⅰ: 5’GAATTC 3’

3 TCGA 5’ 3’CTTAGG 5’

Acy Ⅰ:5’GPuCGPyC 3’

3’CPyGCPu5’

(注： Py=任何一种嘧啶； Pu=任何一种嘌呤)

27．在细菌质粒 pBP1的四环素抗性基因 tetR 的中间有一个Hind Ⅱ的切点。用Hind Ⅲ 切割果蝇基因组 DNA ，以 pBP1为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆15带有果蝇的目的基因。用Hind Ⅲ和EcoRV 对克隆15

进行

了酶

切分

析，电

泳结

果如

图15.

1(用

酶切的

p

BP1质粒DNA作对比)，旁边标出了片段的大小。

(1)绘制含有插入片段和不含插入片段时的pBPl的限制性图谱，并标明四环素抗性基因的位置—;

(2)如果用克隆在另一个与pBP1完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针，进行Southern印迹杂交，推测上述电泳图会显现什么样的杂交带?

(3)如果用克隆15的果蝇DNA片段作为探针进行Southem印迹杂交，放射自显影的结果又是如何?

28．什么缘故大多数内切酶被称为“限制”酶。

29．据Science杂志报道:一种重要的遗传疾病可由导致DNA中碱基替换的诱变剂在体外进行人工诱导。设计一种快速用以鉴定疾病基因型的检测方法。

30．为了绘制长为3.0kb BamH Ⅰ限制性片段的限制性图谱，分不用E

coR ArrayⅠ、H

pa Ⅱ

Ec

oR

Ⅰ十

Hpa

Ⅱ消

化这

一片

段的三个样品，然后通过凝胶电泳分离DNA片段，溴化乙锭染色后观看DNA 带型(图15.2)。请按照这些结果，绘制一个限制性图谱，要标明E.coR Ⅰ和

HpaⅡ识不位点间的相对位置，以及它们之间的距离(kb)。

31．1967年，有5个实验室几乎同时独立发觉了DNA 连接酶，每个实验室的实验有什么特点?

32．简述DNA和RNA连接酶的催化反应机制。

33. 阻碍DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些?

34．什么是Klenow酶?有哪些活性?在基因工程中有什么作用?

35. 如何利用T4 DNA聚合酶制备3’隐含末端或双链平末端?

36. 如何利用T4 DNA聚合酶进行双链DNA的3’末端标记?

37．如何利用T4 DNA聚合酶制备平末端?

38．反转录酶有两种类型，一是来源于禽类骨髓母细胞瘤病毒(AMY, aviam myeloblastosis virus)，另一种来源于鼠类莫洛尼氏白血病毒(M—ML V，Moloney murine leukemia virus)，它们之间有什么不同?

39．与E.coli RNA聚合酶相比，细菌噬菌体的SP6RNA聚合酶、T7 RNA聚合酶和T3 RNA聚合酶具有哪些优越性?

40．什么是多核苷酸激酶的向前反应和交换反应?

41．细菌碱性磷酸酯酶和小牛肠碱性磷酸酯酶有什么不同?在基因工程中有什么用途?

42．λ外切核酸酶(lambda exonuclease)差不多活性是什么?在基因工程中有什么应用?

43．Mn2+、Mg2+对DNase Ⅰ(deoxyribonuclease Ⅰ)的活性有什么阻碍? DNase Ⅰ在基因工程中有什么作用?

44．比较S1-Mapping和Footprinting在原理上、方法上、应用上有何不同?

45．什么是复制子(replicon)?

46．什么是质粒的相容性?什么是不相容群?机制是什么?

47．什么是质粒的带动转移?

48．讲明变性定位法和限制性内切核酸酶定位法研究质粒复制起点的原理。

49．Co1El衍生质粒拷贝数调剂机理的机理是什么?

50．R1质粒拷贝数受到如何样的调剂操纵?