第二章(10)植物花药(花粉)培养

第二章（10）植物花药（花粉）培养

1花药培养

是将花粉发育至一定阶段的花药接种到人工培养基上进行培养，以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的技术。

2花粉培养

是将花粉从花药中分离出来，接种到人工培养基上进行培养，以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的过程。

3花药培养过程

3.1预处理

低温冷藏是最常用的方法。烟草7〜9C , 7〜14d ;黑麦1〜3 C , 7〜14d。

3.2表面消毒

用70%酒精喷洒或擦拭花器或包被着麦穗的叶鞘表面，即可以达到灭菌的要求。

3.3接种

在无菌的条件下把雄蕊上的花药从花丝上摘下，水平地放在培养基上进行培养。

不要使花药受到损伤，否则会刺激花药壁形成二倍体愈伤组织。接种的“密度效应”，要有一个合理的群体数量。

3.4培养形成花粉植株。

花粉--- 愈伤组织 --- 苗；花粉 --- 胚状体 --- 苗。

培养方式：①琼脂固化培养基表面培养；②30%Ficoll的液体培养基表面漂浮培养;

③固 - 液双层培养。

4花药培养脱毒

1974 年日本：花药培养可以脱除草莓病毒；

4.1花药采取时期单核期：花蕾4〜6mm花药1mm.

4.2花药诱导愈伤组织培养基

MS+IAA4mg/L+BA2mg/L+KT2mg/L蔗糖 30g+琼脂 7g/L

4.3增殖分化培养基

MS+GA1mg/L+IBA0.2mg/L+BA1mg/L蔗糖 30g+琼脂 7g/L

4.4生根培养基

1/2MS+IBA0.2mg/L+ 活性炭 3g/L+ 蔗糖 20g+琼脂 7g/L

5单倍体植株染色体加倍的方法

5.1自然加倍

花粉细胞核有丝分裂或核融合，染色体可自然加倍，获得纯合二倍体。

5.2人工加倍

用秋水仙素处理单倍体植物，可使染色体加倍（溶液浸苗、处理愈伤组织和用含秋水仙

0.4% 素的羊毛脂涂抹单倍体植株的顶芽、腋芽，可得到能结实的二倍体植株）

5.3将单倍体植株诱导的愈伤组织反复继代培养，再分化可得到二倍体植株。

6花药和花粉培养的应用

6.1克服后代分离，缩短育种周期；

6.2有利于筛选隐性突变体，选择效率高 ;

6.3有利于隐性基因控制性状的选择 ;

6.4快速获得自交系的超雄株

本节小结：在单倍体细胞中只有 1 个染色体组，表现型和基因型是一致的，一旦发生突变，无

论是显性还是隐性，在当代都可以表现出来，因此单倍体是体细胞遗传研究和突变育种的理想材料。通过本节的学习，我们要掌握花药培养的过程，还有单倍体加倍技术。

在品种间杂交育种程序中，通过 F1 代花药培养得到的单倍体植株后，经染色体加倍后成为纯和二倍体，从杂交到获得不分离的杂种后代单株只需要 2 个世代，和常规育种方法相比，显著缩短了育种年限。

思考题：

1 花药培养的过程是什么 ?

2 单倍体加倍的方法有哪些？