流式细胞术的临床应用

见细胞核形态完整 ， 细胞碎 片少 ， 荧光核型与间接荧光抗体试 验（Ｆ 近似 。 Ｃ ＩＡ） Ｆ Ｍ检侧结果为 阳性 ４ 例 ， ０ 阴性 ２ 例 ， ５ 其中 ２ 例 ＩＡ阳性 的标本 Ｆ Ｍ检测结果为阴性（ １ Ｆ Ｃ 有 例是胞质 型 ） ， １ ＩＡ阴性的标本 Ｆ Ｍ检 测结果为 阳性 ， 例 Ｆ Ｃ ２种方 法具有 高
血清 的磷ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ盐 缓冲液 （ Ｂ ） Ｐ Ｓ 充分洗 涤 ， 加人 异硫氰 酸荧光 素
标记的兔抗人抗体 ，室温避光反应 ２ ｉ ，Ｂ ０ｒ ｎ Ｐ Ｓ洗涤 １ ， ａ 次 取
免疫反应后 的细胞核涂片 ， Ｏｙ ｕ－ Ｂ ５ 型荧光显微 镜 用 ｌ ｍｐ ｓ Ｘ １
Ｄ Ａ含量 ，还可根据 Ｄ Ａ分布组方 图直 观反 映细胞周期 的 Ｎ Ｎ 分布状态 ， 对癌 前病变 细胞 的增殖 能力进 行动态 观察 ， 可作
度 的 一 致性 （ ０ １ 。 火 ． ） ０
倍体分析 ， 中 ２ 其 ９例异倍体的癌前病变有 随访 结果 ，２例在 ２
随访 期 间 已 由病 理 诊 断 证 实 为 癌 变 ， 例 未 发 生 癌 变 ； 究 者 ７ 研
还对 ３ ０例二倍 体的 Ⅲ级不典 型增生病变 进行 了随访 ，在随 访期 间无 一例癌变。 由此可见 ，Ｃ 能对 癌前 病变 盼眭质和 ＦＭ 发展趋势作 出评价 ， 有助于癌 变的早期诊 断。
蛋 白反 应试验 （ Ｒ） 免疫珠 试验 （Ｂ ） 固相 酶染 色法 、 ＭＡ 、 ＩＴ 、 浅
盘 凝 集 试 验 （ Ａ 、 联 免 疫 吸 附 试 验 （ ＬＳ 法 、Ｃ 法 Ｔ Ｔ）酶 Ｅ ＩＡ） Ｆ Ｍ
邢 艳等［ ９ １ 收集经 间接免疫 荧光 法 （Ｆ 检 测 的阴性血 清 ＩＡ）
２例， ６ 阳性血清 ３ 例作 为检测对象 。 ９ 体外培养人宫颈癌细胞 系 Ｈｌ ｅ ａ细胞 ， 收集对 数生长期 的细胞 ， 用细胞核 抽提液提 取 Ｈ ｌ 细胞 核 ，％多聚 甲醛 固定 ２ ｉ ， ｅａ ４ Ｏｍ ｎ后 采用皂 素对核膜打
２ Ｃ 用 于 交叉 配 型 （ Ｃ Ｆ Ｍ Ｆ ＸＭ ）
５ 用于抗精子抗体（ Ａｂ 的检测 Ａｓ ） 血清中ＡＡ ｓ ｂ主要为 Ｉ ｇ Ｇ和 ＩＭ 型 Ａ Ａ ， ｇ ｓ ｂ 而精 浆 中主要 为 Ｉ 型， 亦可 见 ＩＧ和 Ｉ 型㈣。 ｓ ｂ可通 过妨碍精子正常 ｇ ＡＡ 发生 、 干扰精 子获能 和顶 体反应 、 凝集 和制动精子 、 影响精卵 结合 、干扰胚胎着床和影 响胚 胎存 活等多种 机制使男性生育 力 下降。 ｓ ｂ的检测方法包括试管一 ＡＡ 玻片凝集试验 、 混合抗球
医技杂志 ２ １ 年 １ 月第 １ 卷第 ｌ 期 ００ ２ ７ ２
Ｊ ｒａ ｏ ａｔ ａ Ｍｅｉ ｌ ｅｈ ｉ ｅ ， ｅｅ ｂ ｒ ０ ０ Ｖ １ １ ， ｏ １ ｏ ｎｌ ｆ ｒ ｉ ｌ ｄ ａ Ｔ ｃ ｎ ｕ ｓ Ｄ ｃｍ ｅ ２ １ ， ｏ． ７ Ｎ ． ２ ｕ Ｐ ｃｃ ｃ ｑ
细胞集落 刺激 因子 （ Ｃ Ｆ 动员 的外周 血 （ Ｐ ） Ｇ Ｓ） Ｍ Ｂ 造血 干细胞
（Ｓ ） Ｈ Ｃ 作细胞周期分 析。 ｉｅ 等脚 １例同种异体骨髓移植 Ｈｅｇｒ 的 ｔ
患 者 ， 后用 Ｆ Ｍ测 定 Ｃ ４细胞／Ｄ ５Ｒ ＋ 胞 （ 术 Ｃ Ｄ＋ Ｃ ４ Ａ 细 代表 重建 的幼稚 Ｔ辅助细胞 ）移植 后 ２ ， ４个月时 的比值为 ０１ 。 ．１
４ 应用 Ｆ ＣＭ 检 测抗 核 抗 体
析等方面的 日益完善 ，Ｃ 已广泛用于细胞生物学 、 ＦＭ 免疫 学 、
肿瘤学 、 遗传学 、 理学 及临床检验各领域 。 病 现将 Ｆ Ｍ在 临床 Ｃ
上 的 研 究应 用 归纳 如 下 。 １ 用 于 检 测 癌 前 病 变 和 协 助 肿 瘤 早 期 诊 断
酸盐 缓冲液（ Ｂ — ｚ洗 ２遍 ， Ｐ ＳＡ ） 加入 ２ ｌ ５ 用异 硫氰酸荧光 素
（ ＩＣ） ＦＴ 标记 的羊抗 人免 疫球 蛋 白抗体 ［ｇ （ｂ ：， ４℃ ＩＧ Ｆ ａ ）］置
３ ｉ（ 光 ）洗 ２遍 后 用 Ｐ Ｓ Ａ ０ｍ ｎ 避 ， Ｂ — ｚ复 悬 至 ２０ Ｉ ， 流 式 ０ ｌ用 ｘ
孔 ， 人 １１０的 稀 释 血 清 ，７℃孵 育 ６ ， 含 １ 加 ：０ ３ ０ｎ ｎ 用 ｉ ％胎 牛
当人体发生癌变及一些具有恶性潜能 的癌前病变 ，在其 发生 、发展 的过程 中可伴 随细胞 Ｄ Ａ含 量 的异 常 改变 ， Ｎ 而 Ｆ Ｍ可精确检测 Ｄ Ａ含量 的改变 ，不但 可以定量 癌前细胞 Ｃ Ｎ
为诊 断癌前病变 的一个有 价值 的标 志。齐凤英等 … 经病理 对 诊断证实癌前 病变 （ 不典 型增生 ） 的石 蜡包埋 组织进 行 Ｄ Ａ Ｎ
观察细胞形 态核着色情 况 ， 然后用 Ｆ Ｍ测定 ， Ｃ 将荧 光强度 大
于 所 设 门 内 细胞 总 数 的 ５ ％的标 本 定 为 阳性 。 显 微 镜 下 观 察
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流式细胞术 的临床应用
江 苏省 扬 州 东方 医 院（ ２ ０ ０ ２５０ ） 刘定 山
流式细胞术 （ ｏ ｖｏ ｅｒ，Ｃ 是 近代细胞生物学 、 ｉ ｒ ｗｃｔｍ ｔ Ｆ Ｍ） ｙ 分 子生物 学 、 分子免疫 学单 克隆抗 体技术 与激光 技术 、 电子计 算机技术等高度结合 和发展 的结 晶 。它不仅 快速 、 灵敏和准 确， 而且还具有客观 、 直接和同时进行多参 数检测的优点。随 着新的荧光物质不 断发现及计算 机功能在数 据存储 、 显示分
Ｇ ｒｖｖ 【 １ ａｉ 『 ａｏｏ 等 ｗ ｋ 等 ３ 和 ｌ 建立本 法后 ， 不断 完善 ， 经 已被 广泛 采用。 目前 常规步骤 是 ：分离 供者 的淋 巴细胞 （ ｘ ０ ３ １５
个 ）加 入 受 者 血 清 ５ ｌ３ 保 温 ３ ｎ 用 含 叠 氮钠 的 磷 ， Ｏ ，７ ０ｍｉ，