早期胚胎培养 课

（时期：MII中期 ）
获能的精子
体外ຫໍສະໝຸດ Baidu精
（试剂）
（培养条件、目的阶段） 早期胚胎培养 胚胎移植 受体牛
试管动物和克隆动物
试管动物 克隆动物
生殖方式
技术
有性生殖
体外受精 胚胎移植
无性生殖
核移植技术、
胚胎移植
遗传物质 遗传规律
来自2个亲本 主要来自供核亲本 遵循 不遵循
下图是培育能产生凝血因子牛的过程示意图，回答相关问题：
• 引进一头良种成年奶牛需要3万－5万元；
• 牛的生育率低，一头牛一胎只生一只，一生只能 生育四五次。
• 牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当 的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数 多1000倍左右；
• 公牛产生的精子数目就更多了。
试管动物技术过程：
第一步：体外受精 第二步：胚胎的早期培养 第三步：胚胎移植
3.受精
获能的精子和
培养成熟的卵子， 一般情况下在
或
获能溶液
专用受精溶液 中完成受精。
离心的 目的是 什么？
将精子从精液中分离出来，提高精子浓度
获能液
或 受 精 液
发育培养液
三、胚胎的早期培养
发育培养液：水、无机盐、有机盐、维 生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等
胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向 受体移植或冷冻保存。
牛卵巢
B超活采仪
B超引导法：
借助超声波探头和屏
幕的引导，从活母畜卵巢
采集卵母细胞。操作员先
将带有超声波探头和采卵 针的采卵器通过进入子宫， 同时通过将卵巢贴在探头 上。根据B超屏幕所显示的
卵泡位置，利用采卵针穿
刺卵泡并同时抽吸卵母细 胞。
检查卵母细胞
活 体 采 集 的 牛 卵 母 细 胞
1、卵母细胞的采集和培养
采集方法： ①促性腺激素处理，输卵管冲卵子
（小型动物，如鼠、兔、羊等）
②直接从卵巢中采集卵母细胞。 （大型动物，如牛） （屠宰的卵巢取卵；活体取卵） 采集的卵母细胞，都要体外人工培养成熟 （MⅡ中期）后，才能与精子结合受精。
大型动物，如牛：
从屠宰场已屠宰母畜的 卵巢中采集卵母细 内窥镜 或 胞，也可以借助 超声波(B超)探测仪 、 腹腔镜等工具确定卵泡位置，直接从活体动物 中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出，在体外 进行人工培养，使其成熟。
胚胎移植
试管动物技术：
通过 人工操作使卵子和精子在 体外条件下成熟和受精，并通过培 养发育成 早期胚胎后，再经移植产
生后代的技术。
目的： 快速繁殖动物优良品种 体外受精和早期胚胎培养
技术：
胚胎移植技术
一、从试管牛说起
• 国产奶牛：年均产奶量3000公斤左右
• 国际良种奶牛：年均产奶量10000公斤左右
1978年7月25日世界首例试管婴儿
1988年3月10日我国首例试管婴儿
1992年我国首例三胞胎试管婴儿
据资料回答： 1.资料上用到了哪些生物技术？ 试管婴儿技术（包括体外受精、胚胎体外 培养）和胚胎移植技术。 2.试管婴儿和母亲正常怀孕，生产的过程有何 异同？ 相同：有性生殖,母体子宫发育成胎儿 不同：体外受精，体外发育成早期胚胎，
二、体外受精
概念：采取雌性动
物的 卵细胞 和雄 性动物的 精子，使 其在 试管中受精。
注：发育的主要场
所是母体子宫
主要包括 卵细胞的采集 、 精子的获取 和 受精等几个主要步骤 。
一、体外受精
阅读P69~71思考以下问题：
• 卵子的采集有哪些方法？ • 精子的采集有哪些方法？ • 体外受精需要哪些前处理？
不同动物胚胎移植时间不同
牛、羊：桑椹胚或囊胚 小鼠、家兔：卵裂期 试管婴儿：8个或16个细胞
注：胚胎发育的主要场所是母体
保存剩余的卵子和精子的方法是什么？
小 结
采集卵母细胞
1）超数排卵（试剂） 方法 2）活体取卵（仪器） 3）从屠宰的卵巢取卵
采集精子
方法①②③
体外培养 成熟的卵子
体外获能
（方法，试剂）
（1）为能从良种母牛体内一次取得多枚卵子，可以采用 注射促性腺激素 的方法。据报道，这种技术已经被滥用于人类生育中， 从而出现许多人工“多胞胎”，这种技术带来的危害之一是 影响胎儿的健康发育、对孕妇的身体不利等 。 如透明带反应等，其意义是 防止多精入卵 术是 胚胎移植。 。过程⑥涉及的技
（2）在过程③中，当一个精子进入卵细胞后会激发卵子发生反应，
卵母细胞的成熟培养：CO2培养箱
CO2培养箱模拟生物环境(PH), 保证卵母细胞成活发育
培养箱
2.精子的收集和获能
收集精子的方法：
假阴道法 手握法 电刺激法
2. 精子的收集和获能
1)收集的方法: 假阴道法、手握法和电刺激等 2)获能方法: 培养法：精子放入获能液培养 （啮齿动物、家兔和猪） 化学诱导法：精子放入适宜浓度肝素 或钙离子载体A23187溶液诱导 （牛、羊等家畜）