超氧化物歧化酶

超氧化物歧化酶

性质：超氧化物歧化酶是催化超氧阴离子自由基（O

2）转变为H

2

O

2

和O

2

的歧化反应（2O

2

+2H+

→H

2O

2

+O

2

）的生物催化剂，对细胞和生物起保护作用。按其酶分子内所含金属离子不同在自

然界有三种类型，即含Cu2+和Zn2+者称Cu，Zn-SOD；含Mn2+者称Mn-SOD；含Fe2+者称Fe-SOD。前者大量存在于哺乳动物的红细胞上，Mn-SOD存在于哺乳动物的线粒体中。人的Mn-SOD的结构基因定位于第6号染色体、长臂、二区、五带，即6q25，它在长达12 858bp的人Mn-SOD 基因组DNA结构中。在染色体的这一部位恰是胶质细胞瘤、淋巴瘤、黑色素瘤、卵巢癌等多种肿瘤染色体畸变的频发部位。人的Mn-SOD基因的转录有长约1kb和4kb的两种mRNA，主要是不同组织或细胞来源的Mn-SOD基因在3′一端非翻译区在长度和碱基序列上存在明显差异。该基因除了表达成Mn-SOD，以除去过剩的超氧自由基外，而基因本身又属于肿瘤抑制基因。

超氧化物歧化酶(SOD)的检测方法-南京建成

SOD检测试剂盒！(A001)

发布日期:2006-03-20

一：产品简介：

1 、测定意义：超氧化物歧化酶（SOD ）对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用，此酶能清除超氧阴离子

自由基（O 2 －·）保护细胞免受损伤。

2、测定原理：通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子自由基（O 2 －·）, 后者氧化羟胺形成亚硝

酸盐，在显色剂的作用下呈现紫红色，用可见光分光光度计测其吸光度。当被测样品中含SOD 时，则对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用，使形成的亚硝酸盐减少，比色时测定管的吸光度值低于对照管的吸光度值，通过公式计算可求出被测样品中的SOD 活力。高等动物细胞内只有二种SOD 即铜锌- SOD （Cu Zn -SOD ）与锰-

SOD(Mn-SOD), 二者相加等于总SOD(T-SOD) 。采用我所研制的抽提法处理后的样本，Mn-SOD 活力丧失，而CuZn-SOD 活力不变，再用T-SOD 活力减去CuZn-SOD 活力，即为Mn-SOD 活力。

3、简便快速：整个操作过程约50 分钟，在这期间可测100 例以上样本。这种短时间测定大批量样本的测试方法，

很受广大科研人员的欢迎。

4、取样量极微：本法取手指或耳垂等末梢血20 μl ～50 μl 即可测红细胞中的SOD ，只需2ml 静脉血可测白细

胞中的SOD 及血小板中SOD ，只需6mg 组织就可测组织匀浆、胞浆、0.2g 组织可测线粒体及微粒体中的

SOD 。

5、灵敏度高：ID50=0.05g/ml 是邻苯三酚法灵敏度的18 倍，因而可测定实验用动物的心肌灌流液、脑脊液、胸腹水、肾透析液、心肌培养细胞、肿瘤培养细胞中的SOD ，此法最灵敏。

6、稳定性好：试剂放在0°C ～4°C 冰箱中可保存6 个月。

7、再现性好：变异系数CV=1.7% ，同一份标本这次测得结果与几天后测得结果相差无几。

8、回收试验：X + SD=103.3 + 2.63%

9、测试面广：即可测T-SOD 又可测Mn-SOD 也可测CuZn-SOD ，本法测试过实验动物的红细胞、白细胞、血小板、血清（浆）、心肌组织、肺、肝、肾、脾、耳膜、肾上腺等几十种组织匀浆、线粒体、微粒体、离体心肌灌流液、肾透析液、腹水、胸水、脑脊液、心肌培养细胞、肿瘤培养细胞等，效果均很佳。

10、方法更先进、技术更成熟：我所在已研制出SDS+KCl 抑制法测CuZn －SOD 和KCN 抑制CuZn －SOD 法测定Mn －SOD 的基础上，开发出抽提法测定CuZn －SOD ，该法不仅无毒无味，而且较SDS+KCl 抑制法测CuZn －SOD 更简便、更快捷。通过抽提法测定CuZn －SOD ，同时测定T －SOD ，即可计算出Mn －SOD 活力。

11、质优价廉：本试剂盒主要原料为美国进口，但价格与国内邻苯三酚测定法相近。

12、实验仪器简单：所用的37 ℃恒温水浴锅、550nm 处的分光光度计、低速台式离心机、微量移液器等主要实验设备均为实验室常用设备，无需特殊设备。用简单的实验设备测定出高水平的指标。

13 、适用范围广：本试剂盒不仅可以在普通分光光度计上操作，还可以在半自动、全自动生化分析仪、酶标仪上等先进仪器上操作。

14 、说明书简洁、详细，易读易懂，试剂配制简单，实验操作简便易行，操作人员无需专门培训，只需按照说明书要求操作，即可获得理想的实验结果。

15 、此方法经江苏省卫生厅组织的同行专家鉴定，并获卫生厅科技成果一等奖。此专利已由中国、美国、英国等国家专利刊收集。文章发表于南京铁道医学院学报1991 年3 月第十卷第一期27 — 30 页，作者：季建平。

二、试剂盒组成：

试剂名称包装100T 50T

试剂一：液体10ml × 1 液体10ml × 5

试剂二：液体10ml × 1 液体10ml × 5

试剂三：液体10ml × 1 液体10ml × 5

试剂四：液体350 m l × 2 液体350 m l × 1

试剂四：稀释液5ml × 2 稀释液5ml × 1

试剂五：粉剂×1 粉剂×1

试剂六：粉剂×1 粉剂×1

三、反应参数：

反应温度37 ℃

反应时间40 分钟

测定波长550nm

比色光径1cm 光径玻璃比色皿

四、保存条件：

在 4 ℃的保存条件下，可以稳定 6 个月（注意：试剂四不可以冷冻）