水产微生态制剂的生产及应用

微生物大幅度生长成为优势菌群。厌氧消化降解有机物产 生大量的氨、有机酸、胺类、硫化氢、甲烷等养殖动物有 毒的产物，引起虾等中毒、致病。
养殖中、后期下层和底层水体微生态的不良循环
5、养殖水体的污染元素
• 1、高浓度的有机污染物被微生物将含氮有机物进行氨化、
硝化作用而产生对养殖动物有害的氨态氮、亚硝态氮等有 害物质，并且水产养殖动物一般是排氨类生物，这样增加 水体中氨态氮的含量。过高的氨态氮、亚硝酸盐对养殖动 物具有很强的毒性；氨氮的耗氧特性会使水体的溶解氧降 低，从而导致鱼类死亡和水体黑臭。
2.2 其他投入品的污染：
• 治疗剂、消毒剂、水质改良剂（化学类）和底质 改良剂等污染。Biblioteka Baidu方面，消毒杀菌药物改善了养
殖生态环境的作用，但也破坏类养殖动物、微生
物与环境三者构成的平衡。
3、养殖水体的自身平衡
• 以对虾为例，养殖前期水体的生态平衡：
• 幼虾除了摄食饲料外，还有菌团、浮游微藻、浮游
动物，养殖过程产生的代谢产物包括虾的排泄物、
残存饲料和浮游微藻的尸体，经过微生物的降解、 转化成为无机元素，促进浮游微藻的繁殖生长，进 而促进浮游动物的繁殖，同时微生物在降解有机物 过程中得以繁殖形成“菌团”。因此，浮游微藻、
浮游动物和细菌菌团构成了对虾食物的来源一部分，
养殖系统处于良性循环阶段，自身污染轻。
光合细菌在水产养殖中的其他功效
作为饵料添加剂：PSB 富含蛋白质,还含有各种B族 维生素、矿物元素及其他未知的生理活性物质等，
因此可为水体中的浮游动物和水产养殖动物提供丰
富的饵料。 光合细菌菌体蛋白质含量高，并含有大量促进 鱼虾生长的活性因子，如生物素、维生素、β-类胡 萝卜素等，可明显促进养殖生物的生长发育，缩短
养殖周期。
• 增强水产养殖动物的抗病性：在同一生态位中微 生物通过营养竞争、空间竞争或分泌抗生素、细 菌素等毒素抑制其他微生物的生长。光合细菌是 水体中的快速繁殖使得其成优势菌，可以抑制病 原微生物的生长，防止鱼虾病害的发生。 • 作为免疫增强剂：如荚膜红假单胞菌细胞壁中含 有的多糖类物质是非特异性免疫增强剂，使鱼类 的免疫球蛋白提高10倍以上。此外，类胡萝卜素 对提高免疫力效果明显。
• 2、含氮有机物分解的同时，蛋白质中的含硫氨基
酸也被分解产生H2S； • 3、COD和磷
无机界
植物
人和动物
微生物净化剂就是要加强微生物的分解作用，减少富 营养物质在水中的累积。
6、微生物方法污水处理及养殖水体 净化
• 水产养殖动物的疾病与水域生态环境关系非常 密切，如不改善水质，水产动物的健康就得不 到保证，水域生态环境就会破坏，病害会越来
子有机物、二氧化碳等作碳源，氨、铵盐、硝酸
盐或亚硝酸盐作氮源，使得光合细菌可以在水质 净化中发挥重要作用，有效地除去水体中H2S，降 低水体中氮及COD，以光合细菌作为水质净化剂 对于改善养殖水体的水质有明显的效果。
提高养殖池塘的能量转化效率：
• 以投饵为重要增产技术的精养池塘，随着时间的延长，常 因有机质投入过多，超过了池塘生态系统的消耗与转化能 力，造成循环不畅，池内有机质的大量沉淀，产生严重的 能量陷阱效应，致使池塘的能量转化效率偏低。由于PSB 挥发其处理低分子有机物、转化H2S等有害物质的作用， 促使池塘内N、P陷入能量陷阱的效应降低，加之这种转 化在黑暗、弱光和厌氧条件下进行，从而起到增氧和降低 H2S的效能，因而提高了单产和池塘的能力转换效率。
物的共同作用下，大部分进一步降解为二氧化碳和
水，降低养殖水体富营养化和减少底泥生成。
1）芽孢杆菌对氮、磷沉积的影响：减少底质环境中
氮、磷的沉积。
• 因为，水产养殖往往需要培养优良的浮游单细胞藻 类，营造合适的水色。在生产上施肥增加水体的营 养盐含量，以培养单细胞藻类。但是，施肥带进的 营养盐物质在池底沉积被固定。芽孢杆菌具降解有
资料来源：农业部公告1126号（2008）
水产微生态制剂种类
• • • • • • 光合细菌 芽孢杆菌 乳酸菌类 硝化与反硝化细菌 酵母菌 蛭弧菌
1、光合细菌
• 光合细菌（photosymthetic bacteria, 简称PSB）是一大 类能进行光合作用的原核生物的总称，分为产氧光合细 菌和不产氧光合细菌两大类。产氧光合细菌主要是蓝细 菌，或称之为蓝藻和原绿藻，在分类上属于藻类。
机物和解氮磷功能，不仅源源不断给单细胞藻类提
供营养盐，而且可以避免池底沉积物的富营养化， 维持生态平衡。
• 2）由于芽孢杆菌降解、转化有机物速度快，可以 有效改善改善池底缺氧状态，减少硫化物的累积。
• 3）芽孢杆菌消化酶活性高，具有降解残存饲料、
排泄物和生物残体等有机物，矿化营养物质供浮 游单细胞藻类生长繁殖。保证了有机物氧化—— 氨化——硝化——反硝化的正常循环，降低氨氮、 亚硝酸盐等有害物质。
光合细菌制剂的剂型
• 市场上见到的光合细菌剂型大致有液体制剂、
浓缩液、固体制剂、冻干粉等。相对而言，液 体制剂较容易大量培养和批量生产，且培养物
的活性较强，光合细菌的代谢物含量丰富。应
用效果也较好，目前在各剂型中是使用量最大 的一种。
光合细菌的各种生 产方式
光合细菌培养必需条件
光能异养型微生物 • 光照 • 适宜的温度 • 培养基 碳源、氮源、无机盐、生长因子
芽孢杆菌菌落与菌体形态
芽孢杆菌在水产养殖中的应用
第一，有些芽胞杆菌属在鱼虾肠道内、体表上繁殖， 形成优势菌群，促进该部位有益细菌生长繁殖，竞
争性抑制肠道、体表致病菌繁殖，提高鱼虾免疫力，
有效预防疾病。 第二，芽胞杆菌在繁殖过程中大量产生蛋白酶、淀 粉酶和脂肪酶，能迅速降解鱼虾残留饵料和排泄物 中蛋白质、淀粉、脂肪等有机物，在池内其他微生
芽孢杆菌的发酵生产
益生菌产品关键控制点：
1、优良菌种 2、发酵水平 • • • • 剂型：粉剂或片剂。 培养方式：固体或液体发酵。 菌数：几亿到一万亿不等。 市面上产品：10~200亿/g
固体培养基与发酵条件研究
初始pH对芽孢产量的影响 Initi Sterilize Calcium al d oxide pH pH 0% 0.5% 1% 6.74 8.14 8.71 6.20 6.75 6.92 Spores (1010 CFU g-1) 10.2 11.8 9.8
• 养殖前期，投喂饲料少，浮游动物、藻类数量也少，所产 生的代谢产物不多，生物的总耗氧量低。这段时期内，养 虾池溶氧比较充足，有机质经好氧微生物分解产生二氧化 碳、水及硝酸盐和硫酸盐、磷酸盐等无机盐类，为浮游单 细胞藻类进行光合作用提供营养，而浮游单细胞藻类的光 合作用有为对虾的呼吸和有机质的氧化分解提供氧气。整 个生态环境处于相对稳定的良性循环状态。
2008年中华人民共和国允许使用的安全微生物
菌种名 拉丁文名 菌种名 拉丁文名
干酪乳杆菌
乳酸乳杆菌 植物乳杆菌 嗜酸乳杆菌 粪肠球菌 屎肠球菌 乳酸肠球菌 乳酸片球菌
Lactobacillus casei
Lactobacillus lactis Lactobacillus plantarum Lactobacillus acidophilus Streptococcu faecalis Streptococcus faecium Streptococcus lactis Pediococcus acidilactici
水产微生态制剂的生产及应用
赵述淼 博士
华中农业大学生命科学技术学院 农业微生物学国家重点实验室
目
• 一、养殖水体污染
录
• 二、水产微生物制剂
一、养殖水体污染
1、养殖水体污染的来源
• 养殖生态环境的外来污染
• 养殖生态环境的养殖自身污染:
多余的饵料：在高密度、集约化养殖过程中，由于 养殖密度大，过多的未被养殖动物利用的饵料在养 殖池塘生态环境中大量的积累以后，就成为养殖池 塘生态环境中最为严重的污染物之一。
光合细菌存在的问题与任务
• 曾经兴起的光合细菌的热潮，遇到诸多的问题，
甚至在水产养殖业的应用几乎停顿。 • 产品质量低劣，标识量极高，实际仅活菌数仅一 亿，养殖效果差。 • 未来重点：如何筛选活性强、适应面广，容易培
养的菌株。
2、有机矿化菌（芽孢杆菌类）
• 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），地衣芽孢杆菌 （Bacillus licheniformis），使用最广泛的微生态 制剂。 特点： • 它们能分泌多种胞外酶，把大分子有机物质如淀 粉、脂肪、蛋白质、核酸、磷脂等分解成小分子 有机物，再进一步矿化生成硝酸盐、磷酸盐、硫 酸盐等无机盐类。
绿色硫细菌（Green sulfur bacteria, 即绿硫菌科） 紫色硫细菌（Purple sulfur bacteria）
• 光合细菌除了可在厌氧和光照条件下进行不放氧的光合作
用外，绝大部分还具有固氮作用，能直接利用水环境中的 溶氧合成有机物，并在厌氧的环境中以硝酸盐或亚硝酸盐 作为主要的代谢上的氧化剂，因此可以直接消耗水中的硝 酸盐和亚硝酸盐。
• 光合细菌还可迅速利用低分子有机物，其中的一些种还具 有反硝化活性和积磷的特性，有较好的脱氮和除磷效果。
常用于废水处理的是红螺菌科的一些种，因其细胞结构及 独特的物质、能量代谢使之能在有机废水处理中显示出其 他菌种无法比拟的优越性。
光合细菌PSB在水产中的应用
净化水质：
• 由于光合细菌的上述代谢特性，光合细菌以小分
动物的大量排泄物；
生物死亡的有机残体.
2、集约化水产养殖的自身污染
自然界良好生态平衡的水体具有自净能力。
集约化水产养殖饲料残渣、动物排泄物、动物残体等 有机物。
2.1 投喂饲料带来的污染：
• 大量饲料未被水产动物转化利用，一部分残存饲料 和排泄物转化为浮游微藻类、浮游动物、原生动物 和细菌等生物体；另一部分以溶解和固态物质存留 在养殖水体和底质中，造成水体富营养化。
养殖前期虾池水体微生态的良性循环
4、对虾养殖中、后期微生态的演变
• 投喂饲料增加，代谢产物增多，有机耗氧量越来越大。
在养殖水体的表层，浮游微藻的光合作用比较旺盛，可以
使水体中有足够的溶解氧，供给好氧性微生物的活动，促 使微生态的良性循环。
而在养殖水体的下层和底层，浮游微藻的光合作用微弱，
水体中溶解氧含量低，很快就被代谢产物的氧化分解所消 耗，好氧微生物的活动受到抑制，使得厌氧性或兼性厌氧
缺点
• 芽孢杆菌生长速度快，能迅速降解养殖池中鱼虾 排泄物、残饵、尸体等的有机物。但是，部分芽 孢杆菌具有硝酸盐还原能力，能将硝酸盐还原为 亚硝酸盐。因此，在水质急剧恶化的养殖水体中 使用芽抱杆菌制剂，起初氨氮水平快速降低，亚 硝酸随之也降低，但随后水体中亚硝酸盐含量出 现反弹。因此，水体中亚硝酸盐含量的反弹，是 芽孢杆菌制剂的主要缺点。 • 耗氧微生物！
越多。因此，水产养殖环境的净化已成为水产
健康可持续发展的关键。
二、水产微生态制剂
• 微生态制剂是在微生态学理论指导下，从自然界 或动物分离、鉴定或通过生物工程技术人工组建 的有益微生物，经培养、发酵、干燥、加工等特 殊工艺制成的含有活菌或者包含细菌菌体及其代 谢产物并作用于环境或动物的生物制剂或活菌制 剂。
• 这里所说的光合细菌之能在厌氧光照条件下进行不产氧 的光合作用的原核生物。分为4个科：红螺菌科、着色 菌科、绿菌科和绿曲菌科。主要特征：A 含有光合色 素——菌绿素；B 在厌氧、光照条件下进行光合生长， 且不产氧。
光合细菌的类群
红螺菌科（即原名紫色非硫细菌）
• 荚膜红假单胞菌(R..capsulata )。 • 沼泽红假单胞菌(R.palustris ) • 深红螺菌(Rsp.rubrum )：菌体呈螺旋状，运动较快。 • 胶质红假单胞(R.capsulata )现名Rhodobacter capsulata
戊糖片球菌
两歧双歧杆菌 酿酒酵母 产朊假丝酵母 沼泽红假单胞菌 枯草芽孢杆菌 地衣芽孢杆菌 保加利亚乳杆菌
Pediococcus pentosaceus
Bifidobacterium bifidium Saccharomyces cereviseae Candida utilis Rhodopseudomonas palustris Bacillus subtilis Bacillus licheniformis Lactobacillus bulgaricus