TPO预防用药和巨核细胞保护作用

Saroj Vadhan-Raj J Clin Oncol 21:3158-3167. 2003 Schiffer CA, Miller K, Larson RA, Blood 95:2530-2535, 2000
TPO对于巨核细胞的保护作用
研究１：TPO对巨核细胞具有抗凋亡作用
此研究使用的是M07e巨核细胞株
不使用 TPO
使用TPO
DNA碎片含量
DNA碎片含量
可见应用TUNEL方法，使用TPO以后，DNA碎片明显减少，说明巨核细胞凋亡显著减少。
Thrombopoietin Suppresses Apoptosis and Behaves as a Survival Factor for the Human Growth Factor-Dependent Cell Line, M07e STEM CELLS 1996;14:330-336
不使用TPO
存活率
使用TPO
存活率
凋亡率 凋亡率
不使用TPO，巨核细胞存活率随着培养时间推移显 著下降。 使用TPO，巨核细胞存活率随着培养时间显著上升
不使用TPO，巨核细胞凋亡率着培养时间推移明显上 升。 使用TPO，巨核细胞凋亡率着培养时间推移变化不大
MEGAKARYOCYTES, Immature megakaryocytes undergo apoptosis in the absence of thrombopoietin Experimental Hematology 27 (1999) 131–138
用药周期和对照周期血小板的平均最低值:64.4×109/L VS 52.4×109/L（P=0.000） 血小板计数<50109/L的平均持续天数:2.5天 VS 3.7天（P=0.004）
减少血小板输注，避免血小板输注潜在风险：
用药周期和对照周期的血小板输注人次：28人次 VS 51人次 （P＜0.05）。
TPO对于多能干细胞、巨核组细胞均有扩增的作用。能加快巨核细
胞的增殖分化，促进成熟
增加巨核细胞储备
化疗前5或7天用TPO患者的巨核细胞数增加4倍
对化疗环境下的巨核细胞具有保护作用
化疗后所有患者的骨髓细胞及巨核细胞数明显下降，而提前5天接
受TPO的患者巨核细胞数是其基线值的2倍.
是其他更晚接受TPO治疗的患者的4倍
十二指肠壶腹癌 男59岁
对照组 TPO
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 化疗时间
病例分布
受试者（154例）：支气管肺癌（57例）、恶性淋巴瘤（43例）、乳腺
癌（21例）、卵巢癌（8例）、其它实体肿瘤（25例）。
恶性淋巴瘤 27.92%
乳腺癌 13.64% 消化道肿瘤 10.39%
肺癌 37.01%
妇科肿瘤 7.79% 其他 3.25%
研究 （一）
结 果
血小板恢复曲线图
＊
＊ ＊ ＊ ＊
70% 60% 50% 40% 30% 23% 20% 10% 2% 0% 化疗后血小板减少时使用 化疗同时使用 其他 75%
数据来源：2010年医生调查问卷；IMS分析
(回答本题医生数N=106)
本调查覆盖25个省份的153名医生，80%以上为三甲医院的肿瘤科医生，80%为主治以上级别
பைடு நூலகம்
TPO：预防性用药提升血小板的机理
不注射特比澳。化疗后 血小板计数最低值 ≤75109/L、血小板计 数恢复后最高值不超过 300109/L者入选。
第一化疗周期
第二化疗周期
A组
用药周期
对照周期
B组
对照周期
用药周期
《中国医学科学院学报》，2004年8月第26卷第4期，P437-441
研究 （一）
随机交叉自身对照试验(A组和B组)
MEGAKARYOCYTES, Immature megakaryocytes undergo apoptosis in the absence of thrombopoietin Experimental Hematology 27 (1999) 131–138
研究２：TPO对巨核细胞的保护作用（二）
保证化疗如期和顺利进行：
用药周期和对照周期血小板最高值:263.9×109/L VS 148.9×109/L；（P=0.000） 血小板计数恢复至≥75×109／L的中位天数:10.3 VS 15.9天；（P=0.000） 恢复至≥100×109／L的中位天数:14 VS 21天。（P=0.000）
研究１：TPO促进巨核细胞进入生长周期
此研究使用的是M07e巨核细胞
不使用TPO 二倍体细胞
使用 TPO 二倍体细胞
流式细胞学检测，在使用了TPO以后，二倍体细胞明显向G1期细胞转移增多，证明TPO抵 抗巨核细胞凋亡同时，还促进巨核细胞进入细胞生长周期。
Thrombopoietin Suppresses Apoptosis and Behaves as a Survival Factor for the Human Growth Factor-Dependent Cell Line, M07e STEM CELLS 1996;14:330-336
血小板值
rhTPO 升血小 板效应
化疗日
国内研究表明，预防应用特比澳疗效确切。
研究 （一）
重组人血小板生成素预防实体瘤患者化 疗后血小板减少的多中心临床试验
随机交叉自身对照试验:入选化疗周期（上一化疗周期）符合入选标准（PLT
最低值 ≤75109/L ），受试者随机进入A试验组和B试验组，接受方案和剂 量相同的两周期化疗。 入选化疗周期
健择 卡铂
ICE
健择 拓扑替康 紫杉醇 卡铂
健择 顺铂
CAV
Shipp MA et al. J Clin Oncol. 1995;13:2916-2923. Kabger Cj et al. Semin Oncol. 1999;26:12-18
反复化疗更容易导致血小板减少
随着化疗进程，血小板 呈下降趋势
保护巨核细胞，选择TPO最佳用药时
机将給患者带来更大临床利益
众多肿瘤化疗方案导致血小板减少
在接受化疗的患者中, 约20%的患者血小板减少程度达到III/ IV度，严重影响化疗足量足程的进行。
100% 84% 80% 61% 60% 50% 50%
40%
29%
27% 15%
20%
0%
大剂量 CHOP

结论：实体肿瘤患者化疗后出现血小板减少时，预防性给予rhTPO可减少血小板降低 程度和持续时间，并能促进血小板及早恢复，且无严重不良反应，值得推广应用。
《临床肿瘤学杂志》2007年12月第12卷第12期 P912-914
研究 （三） 301医院：
TPO预防化疗后血小板减少的研究（预试验）
设计原则：开放式自身前后对照 纳入标准：1.年龄18岁以上；
试验阶段
治疗日期
治疗日期 Saroj Vadhan-Raj J Clin Oncol 21:3158-3167. 2003
美国学者Vadhan的试验设计
预试验阶段的最优组
试验阶段的最优组
组2: d -5,-3,-1,4
组6: d -5 ,4（1.2ug）
美国学者Vadhan的试验设计
结 论
该研究最具吸引力的发现是以低单位剂量（1.2ug/Kg）的rhTPO，对
于AI方案的肉瘤患者在化疗前5天和化疗后第4天各一个单位剂量就能 产生足够的血小板保护效应。这表明为获得最佳效应而在化疗时合理 安排rhTPO应用时间的极度重要性。
妇瘤卡铂方案的研究
该研究方法为 接受大剂量卡 铂化疗（卡铂 ，AUC＝11,D1 ）的妇瘤患者 在周期二的第2 、4、6、8天使 用rhTPO，共四 次。
2.经病理学、细胞学临床诊断为恶性肿瘤；
3.既往放疗的照射面积小于25％骨髓面积； 4.在上一次化疗周期内血小板计数最低值小于7.5 x 109/L； 5.临床上需要接受与上周期相同的化疗方案； 给药方案：化疗－3、－1和1,各皮下注射特比澳一支； 评价指标：1.血小板降低最低值、降低的时间、持续时间和血小板恢复最高值；
Saroj Vadhan-Raj Ann Intern Med. 2000;132:364-368.
问 题
为什么卡铂诱导的血小板减少在化疗结束后用rhTPO效果好？！
rhTPO使用后约12天，血小板增加达到峰值。 卡铂只用1天
卡铂引起的血小板减少是迟发性的（约在第16天左右）
用 卡 铂 后 PLT 下 降 及 恢复过程
用药周期
化疗后6-24h皮下注射特比澳， 300U/kg/qd。 停药指征： 1、使用天数达到14天； 2、若14天内，血小板计数比化 疗后最低值增≥50109/L，则停 药； 3、若14天内，血小板计数升高 到100109/L，则停药。
对照周期
化疗后不注射特比澳， 作为自身对照。
研究 （一）
2.血小板输注次数和数量
研究 （三）
140 120
100
预试验结果
胃腺癌 女，44岁
对照组
TPO
血小板计数
80 60
40
奥沙利铂 卡培他滨
250 200
肺转移癌 男，64岁 健择＋DDP
20 0 1 2 3 4 5 6 化疗时间 7 8 9
血小板计数
150 100 50
对照组 TPO
140 120
研究２：TPO对巨核细胞的保护作用（一）
使用TPO
不使用TPO
使用TPO和不使用TPO的细胞存活率对比：
使用TPO和不使用TPO的细胞凋亡率对比：
使用TPO的巨核细胞存活率高，且培养时间对 巨核细胞存活率影响不大。但不使用TPO，巨 核细胞存活率随着培养时间推移而显著下降。
使用TPO的巨核细胞凋亡率低，且培养时间对 巨核细胞凋亡率影响不大。但不使用TPO，巨 核细胞凋亡率随着培养时间推移而显著升高。
血小板计数＊１０９／Ｌ
250 200 150 100 50 0 0 3 5 7 9 11 13 15
＊
＊
＊
17
21
24
28
化疗后序日
＊（P ≤ 0.001）
用药周期
对照周期
研究 （一）
结论
对于上一化疗周期PLT＜75×109/L的实体肿瘤患者，本周期化疗后6-24小 时用药，特比澳可：
加速血小板恢复，降低出血风险：
促使巨核 细胞进入 细胞生长 周期
促进巨核 细胞增殖 成熟
促进血小板 生成
国外一些研究表明，化疗前或化疗后预防应 用rhTPO是可行的。
美国学者Vadhan的试验设计
第一周期化疗不用TPO 三周后接受相同方案(AI,阿霉素/异环磷酰胺)与剂量的第二疗程化疗时用TPO 预试验阶段
1.2ug/Kg×4dose
TPO有效升高血小板，但达峰具有时限性
PLT下降及恢复
血小板值
TPO升血小板效应
血小板下降谷底多在10-14天
问题：如果化疗结束后开始使用TPO，会造成应答峰值的推迟。
有无可能使应答峰值与下降谷低靠近与重叠？
目前，升血小板药物多为治疗性使用，预防性使用少
升血小板药物的使用时机选择
医生提及率
80%
有效保护巨核细胞 积极防治肿瘤化疗后血小板减少
治疗肿瘤化疗后血小板减少是一个临床难题：
化疗后血小板减少严重影响后续治
疗的正常进行，降低患者生存期和 生活质量
TPO特异性地激发内源性血小板生成，
但这一药理机制决定了其达峰时间 在给药后的第10-14天
化疗药物作用机制和化疗方案的多
样性使TP0最佳用药时机难于把握
研究 （二）
重组人血小板生成素预防化疗所致 血小板减少的临床观察

方法:自身对照研究，51例实体瘤患者入组，第1个周期化疗(对照组)后PIT≤70×109／L ，第2个周期(治疗组) 化疗结束后24h皮下注射特比澳。 结果：治疗组化疗后各时点PLT计数均高于对照组。 PLT最低值（ (79．6±32．5) VS (35．3±22．8)x 109／L）， PLT恢复最高值（(258．7±124．5) VS (139．8±75．4)x 109／L）, PLT恢复至75×109／L (10．66±4．55d VS 13．00±4．22d ），恢复至100×109／L（19 ．33±8．72d VS 23．41±8．30d ）(P<0．001)。 输注血小板（2例 VS 1例）。
研究３：使用TPO前后MO7e 细胞抑制率
4000 M07e＋TPO M07e
2000 1600
800
李自健，杨俊兰，焦顺昌等，TPO对M07e细胞的作用探究[J]. 军医进修学院学报 2010年32（5）
TPO对巨核细胞的作用总结
提高血小板数量
作用于巨核细胞 生长的全部过程
抵抗巨核 细胞凋亡