TPO预防用药和巨核细胞保护作用

研究１：TPO促进巨核细胞进入生长周期
此研究使用的是M07e巨核细胞
不使用TPO 二倍体细胞
使用 TPO 二倍体细胞
流式细胞学检测，在使用了TPO以后，二倍体细胞明显向G1期细胞转移增多，证明TPO抵 抗巨核细胞凋亡同时，还促进巨核细胞进入细胞生长周期。
Thrombopoietin Suppresses Apoptosis and Behaves as a Survival Factor for the Human Growth Factor-Dependent Cell Line, M07e STEM CELLS 1996;14:330-336
MEGAKARYOCYTES, Immature megakaryocytes undergo apoptosis in the absence of thrombopoietin Experimental Hematology 27 (1999) 131–138
研究２：TPO对巨核细胞的保护作用（二）
研究３：使用TPO前后MO7e 细胞抑制率
4000 M07e＋TPO M07e
2000 1600
800
李自健，杨俊兰，焦顺昌等，TPO对M07e细胞的作用探究[J]. 军医进修学院学报 2010年32（5）
TPO对巨核细胞的作用总结
提高血小板数量
作用于巨核细胞 生长的全部过程
抵抗巨核 细胞凋亡
保护巨核细胞，选择TPO最佳用药时
机将給患者带来更大临床利益
众多肿瘤化疗方案导致血小板减少
在接受化疗的患者中, 约20%的患者血小板减少程度达到III/ IV度，严重影响化疗足量足程的进行。
100% 84% 80% 61% 60% 50% 50%
40%
29%
27% 15%
20%
0%
大剂量 CHOP

结论：实体肿瘤患者化疗后出现血小板减少时，预防性给予rhTPO可减少血小板降低 程度和持续时间，并能促进血小板及早恢复，且无严重不良反应，值得推广应用。
《临床肿瘤学杂志》2007年12月第12卷第12期 P912-914
研究 （三） 301医院：
TPO预防化疗后血小板减少的研究（预试验）
设计原则：开放式自身前后对照 纳入标准：1.年龄18岁以上；
TPO对于多能干细胞、巨核组细胞均有扩增的作用。能加快巨核细
胞的增殖分化，促进成熟
增加巨核细胞储备
化疗前5或7天用TPO患者的巨核细胞数增加4倍
对化疗环境下的巨核细胞具有保护作用
化疗后所有患者的骨髓细胞及巨核细胞数明显下降，而提前5天接
受TPO的患者巨核细胞数是其基线值的2倍.
是其他更晚接受TPO治疗的患者的4倍
研究２：TPO对巨核细胞的保护作用（一）
使用TPO
不使用TPO
使用TPO和不使用TPO的细胞存活率对比：
使用TPO和不使用TPO的细胞凋亡率对比：
使用TPO的巨核细胞存活率高，且培养时间对 巨核细胞存活率影响不大。但不使用TPO，巨 核细胞存活率随着培养时间推移而显著下降。
使用TPO的巨核细胞凋亡率低，且培养时间对 巨核细胞凋亡率影响不大。但不使用TPO，巨 核细胞凋亡率随着培养时间推移而显著升高。
2.血小板输注次数和数量
研究 （三）
140 120
100
预试验结果
胃腺癌 女，44岁
对照组
TPO
血小板计数
80 60
40
奥沙利铂 卡培他滨
250 200
肺转移癌 男，64岁 健择＋DDP
20 0 1 2 3 4 5 6 化疗时间 7 8 9
血小板计数
150 100 50
对照组 TPO
140 120
不使用TPO
存活率
使用TPO
存活率
凋亡率 凋亡率
不使用TPO，巨核细胞存活率随着培养时间推移显 著下降。 使用TPO，巨核细胞存活率随着培养时间显著上升
不使用TPO，巨核细胞凋亡率着培养时间推移明显上 升。 使用TPO，巨核细胞凋亡率着培养时间推移变化不大
MEGAKARYOCYTES, Immature megakaryocytes undergo apoptosis in the absence of thrombopoietin Experimental Hematology 27 (1999) 131–138
保证化疗如期和顺利进行：
用药周期和对照周期血小板最高值:263.9×109/L VS 148.9×109/L；（P=0.000） 血小板计数恢复至≥75×109／L的中位天数:10.3 VS 15.9天；（P=0.000） 恢复至≥100×109／L的中位天数:14 VS 21天。（P=0.000）
十二指肠壶腹癌 男59岁
对照组 TPO
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 化疗时间
用药周期和对照周期血小板的平均最低值:64.4×109/L VS 52.4×109/L（P=0.000） 血小板计数<50109/L的平均持续天数:2.5天 VS 3.7天（P=0.004）
减少血小板输注，避免血小板输注潜在风险：
用药周期和对照周期的血小板输注人次：28人次 VS 51人次 （P＜0.05）。
试验阶段
治பைடு நூலகம்日期
治疗日期 Saroj Vadhan-Raj J Clin Oncol 21:3158-3167. 2003
美国学者Vadhan的试验设计
预试验阶段的最优组
试验阶段的最优组
组2: d -5,-3,-1,4
组6: d -5 ,4（1.2ug）
美国学者Vadhan的试验设计
结 论
该研究最具吸引力的发现是以低单位剂量（1.2ug/Kg）的rhTPO，对
于AI方案的肉瘤患者在化疗前5天和化疗后第4天各一个单位剂量就能 产生足够的血小板保护效应。这表明为获得最佳效应而在化疗时合理 安排rhTPO应用时间的极度重要性。
妇瘤卡铂方案的研究
该研究方法为 接受大剂量卡 铂化疗（卡铂 ，AUC＝11,D1 ）的妇瘤患者 在周期二的第2 、4、6、8天使 用rhTPO，共四 次。
血小板值
rhTPO 升血小 板效应
化疗日
国内研究表明，预防应用特比澳疗效确切。
研究 （一）
重组人血小板生成素预防实体瘤患者化 疗后血小板减少的多中心临床试验
随机交叉自身对照试验:入选化疗周期（上一化疗周期）符合入选标准（PLT
最低值 ≤75109/L ），受试者随机进入A试验组和B试验组，接受方案和剂 量相同的两周期化疗。 入选化疗周期
2.经病理学、细胞学临床诊断为恶性肿瘤；
3.既往放疗的照射面积小于25％骨髓面积； 4.在上一次化疗周期内血小板计数最低值小于7.5 x 109/L； 5.临床上需要接受与上周期相同的化疗方案； 给药方案：化疗－3、－1和1,各皮下注射特比澳一支； 评价指标：1.血小板降低最低值、降低的时间、持续时间和血小板恢复最高值；
用药周期
化疗后6-24h皮下注射特比澳， 300U/kg/qd。 停药指征： 1、使用天数达到14天； 2、若14天内，血小板计数比化 疗后最低值增≥50109/L，则停 药； 3、若14天内，血小板计数升高 到100109/L，则停药。
对照周期
化疗后不注射特比澳， 作为自身对照。
研究 （一）
血小板计数＊１０９／Ｌ
250 200 150 100 50 0 0 3 5 7 9 11 13 15
＊
＊
＊
17
21
24
28
化疗后序日
＊（P ≤ 0.001）
用药周期
对照周期
研究 （一）
结论
对于上一化疗周期PLT＜75×109/L的实体肿瘤患者，本周期化疗后6-24小 时用药，特比澳可：
加速血小板恢复，降低出血风险：
Saroj Vadhan-Raj J Clin Oncol 21:3158-3167. 2003 Schiffer CA, Miller K, Larson RA, Blood 95:2530-2535, 2000
TPO对于巨核细胞的保护作用
研究１：TPO对巨核细胞具有抗凋亡作用
此研究使用的是M07e巨核细胞株
70% 60% 50% 40% 30% 23% 20% 10% 2% 0% 化疗后血小板减少时使用 化疗同时使用 其他 75%
数据来源：2010年医生调查问卷；IMS分析
(回答本题医生数N=106)
本调查覆盖25个省份的153名医生，80%以上为三甲医院的肿瘤科医生，80%为主治以上级别
TPO：预防性用药提升血小板的机理
研究 （二）
重组人血小板生成素预防化疗所致 血小板减少的临床观察

方法:自身对照研究，51例实体瘤患者入组，第1个周期化疗(对照组)后PIT≤70×109／L ，第2个周期(治疗组) 化疗结束后24h皮下注射特比澳。 结果：治疗组化疗后各时点PLT计数均高于对照组。 PLT最低值（ (79．6±32．5) VS (35．3±22．8)x 109／L）， PLT恢复最高值（(258．7±124．5) VS (139．8±75．4)x 109／L）, PLT恢复至75×109／L (10．66±4．55d VS 13．00±4．22d ），恢复至100×109／L（19 ．33±8．72d VS 23．41±8．30d ）(P<0．001)。 输注血小板（2例 VS 1例）。
Saroj Vadhan-Raj Ann Intern Med. 2000;132:364-368.
问 题
为什么卡铂诱导的血小板减少在化疗结束后用rhTPO效果好？！
rhTPO使用后约12天，血小板增加达到峰值。 卡铂只用1天
卡铂引起的血小板减少是迟发性的（约在第16天左右）
用 卡 铂 后 PLT 下 降 及 恢复过程
不使用 TPO
使用TPO
DNA碎片含量
DNA碎片含量
可见应用TUNEL方法，使用TPO以后，DNA碎片明显减少，说明巨核细胞凋亡显著减少。
Thrombopoietin Suppresses Apoptosis and Behaves as a Survival Factor for the Human Growth Factor-Dependent Cell Line, M07e STEM CELLS 1996;14:330-336
健择 卡铂
ICE
健择 拓扑替康 紫杉醇 卡铂
健择 顺铂
CAV
Shipp MA et al. J Clin Oncol. 1995;13:2916-2923. Kabger Cj et al. Semin Oncol. 1999;26:12-18
反复化疗更容易导致血小板减少
随着化疗进程，血小板 呈下降趋势
不注射特比澳。化疗后 血小板计数最低值 ≤75109/L、血小板计 数恢复后最高值不超过 300109/L者入选。
第一化疗周期
第二化疗周期
A组
用药周期
对照周期
B组
对照周期
用药周期
《中国医学科学院学报》，2004年8月第26卷第4期，P437-441
研究 （一）
随机交叉自身对照试验(A组和B组)
有效保护巨核细胞 积极防治肿瘤化疗后血小板减少
治疗肿瘤化疗后血小板减少是一个临床难题：
化疗后血小板减少严重影响后续治
疗的正常进行，降低患者生存期和 生活质量
TPO特异性地激发内源性血小板生成，
但这一药理机制决定了其达峰时间 在给药后的第10-14天
化疗药物作用机制和化疗方案的多
样性使TP0最佳用药时机难于把握
TPO有效升高血小板，但达峰具有时限性
PLT下降及恢复
血小板值
TPO升血小板效应
血小板下降谷底多在10-14天
问题：如果化疗结束后开始使用TPO，会造成应答峰值的推迟。
有无可能使应答峰值与下降谷低靠近与重叠？
目前，升血小板药物多为治疗性使用，预防性使用少
升血小板药物的使用时机选择
医生提及率
80%
病例分布
受试者（154例）：支气管肺癌（57例）、恶性淋巴瘤（43例）、乳腺
癌（21例）、卵巢癌（8例）、其它实体肿瘤（25例）。
恶性淋巴瘤 27.92%
乳腺癌 13.64% 消化道肿瘤 10.39%
肺癌 37.01%
妇科肿瘤 7.79% 其他 3.25%
研究 （一）
结 果
血小板恢复曲线图
＊
＊ ＊ ＊ ＊
促使巨核 细胞进入 细胞生长 周期
促进巨核 细胞增殖 成熟
促进血小板 生成
国外一些研究表明，化疗前或化疗后预防应 用rhTPO是可行的。
美国学者Vadhan的试验设计
第一周期化疗不用TPO 三周后接受相同方案(AI,阿霉素/异环磷酰胺)与剂量的第二疗程化疗时用TPO 预试验阶段
1.2ug/Kg×4dose