羊肚菌原种配方筛选实验方案

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羊肚菌原种配方筛选试验方案

一、羊肚菌的生物学特性

1、生态环境

羊肚菌发生地生态环境复杂多样,而且不同种类也有生态上的变化,羊肚菌与植被类型也极为复杂。多生长于阔叶林地上及路旁,单生或群生。还有部分生长在杨树林、果园、草地、河滩、榆树林、槐树林及上述林边的路旁河边。

2、土壤

羊肚菌是一种土生菌,菌丝分布在土壤中。大多羊肚菌发生在腐殖土、黑(黄)色壤土、沙泥混合土中。

3、发生时间

羊肚菌主要发生在两个季节:春末夏初和夏末秋初,这两个时段的典型特征是前后存在温差的变化,或先低后高,或先高后低。

4、温度

研究认为羊肚菌属低温型真菌,菌丝在3-28℃均能生长,生长最适温度为18-22℃,孢子萌发最适宜温度15-20℃,子实体生长最适宜温度为15-18℃。昼夜温差大,能促进子实体的形成。

5、水分和湿度

羊肚菌生长基质的含水量与一般食用菌相似,最适含水量为60%-65%,在子囊果生长地土壤的含水量在20%-30%为宜,子囊果只有在空气相对湿度为75%-95%的条件下才能正常生长。

6、光照和空气

羊肚菌菌丝和菌核生长阶段不需要光照。光线过强会抑制菌丝生长,菌丝在暗处或微光条件下生长很快。光照对子囊果的形成有一定的促进作用,太强或过弱不利于子囊果的生长发育。羊肚菌也是好氧真菌,足够的氧气和良好的通风场所是保证羊肚菌正常发育下的必要条件,菌丝生长阶段对空气无明显的要求,子囊果生长发育则对空气有较强的要求,CO2浓度不得超过0.3%。

7、PH

研究认为,羊肚菌生长的最适PH在6.5-7.5之间,趋于中性。

二、供试菌株

选取3种羊肚菌菌种作为供试菌株

三、母种的制作

1、母种培养基的制作

配方:马铃薯综合培养基(1L)

马铃薯200g+葡萄糖20g+琼脂20g+磷酸二氢钾3g+硫酸镁1.5g

Note:马铃薯需挖去芽眼、削皮、切块加水煮30min左右用四层纱布过滤取滤液,称取其他原料一同置于锅中加热煮沸定容至一定的体积,分装

到试管或锥形瓶中置于高压灭菌锅过灭菌1h左右,灭完菌后待高压

锅压力降至0,取出培养基摆斜面或分装到无菌的培养皿中冷却接种。

2、母种的接种及培养

在超菌工作台上按照要求进行接种,接种后置于20℃的培养箱中避光培养三天即可长满培养皿表面,4-6天就可长出菌核。

四、原种的制作

1、配方选择

配方1 棉籽壳75%、木屑8%、麦麸12%、石灰1%、腐殖土4%

配方2 木屑75%、麸皮20%、磷肥1%、石膏1%和腐殖土3%

配方3 麦粒60%、谷壳20%、石膏1%、腐殖土19%

配方4 麦粒75%、土壤23%、石灰1%、过磷酸钙1%

配方5 棉籽壳30%、腐殖土30%、木屑40%、磷酸二氢钾0.2%

配方6 全麦粒100%

2、培养基制备

将配方 1 至配方8的基料按比例称好,加入适量的水,使含水量达60% 左右;用手握时,指缝间有水溢出,但不滴下;然后装入25 mm×250 mm 的试管,使装入量及松紧度一致。每个处理装10 支试管,高温、高压灭菌,置于暗处冷却备用。

3、注意事项

麦粒需用水浸泡24h后沥干水分

装试管要均匀、松紧度一致,多余的用塑料折角袋或玻璃瓶装。

高压灭菌2h左右

接种量、接种方式等均需相同。

3、培养条件

置于18℃左右的恒温培养箱中暗培养

五、菌丝长势的观察记录

六、时间安排

五、材料准备

1、培养料:

名称数量 /kg

杂木屑

棉籽壳

麦粒

麸皮

谷壳

过磷酸钙

石膏

石灰

腐殖土

2、用具:

试管3*6*10=180支

栽培袋

玻璃瓶

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