二氧化碳结合力测定及全自动生化分析仪的使用

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静脉采血及血清制备
静脉采血非抗凝全血2ml/小组
二氧化碳结合力测定(CO2-CP)
—滴定法、分光光度法
一、原理 二、测定方法 三、参考值 四、临床意义 五、注意事项 六、方法学评价 七、小结
一、原理
1. 样品中的CO2-CP主要以 HCO3- 的 形式存在,在样品中加入过量的标准盐 酸溶液,使酸与 HCO3- 起中和反应,释 放出CO2,然后以标准氢氧化钠溶液滴 定剩余的酸,用酚红指示剂指示终点。 以氢氧化钠的消耗量计算出样品中 HCO3- 含量。
六、方法学评价
1. 本方法准确度:不准确度应≤20% 精确度较低、只能作为对照测定或急 诊、手术应急。 2. 方法有比色法和滴定法两种,比色 法精度更高。 3. 滴定法终点不易准确判断 4. 受样本保存时间限制 5. 操作简便
小结
1. 终点判断 2. 结果对比 3. 下次课预习血清总胆固醇测定
谢 谢!
2. .光度法:二氧化碳结合力在碳酸酐酶的作 用下,使碳酸氢根分解同二氧化碳迁出引 起pH值发生变化,借助联合指示剂显色, 在546nm波长测定吸光度值,计算其含量。
二、操作
1. 滴定法测定
⑴加样:
试剂
标准管
样品管
新鲜血清(μl)

标 准 液(μl)
100
试 剂 R2(μl)
500
试 剂 R1(滴)
成增多,急、慢性肾功能不全致酸性物质排泄减少, 剧烈腹泻、肠瘘、大面积烧伤等碱性物质丢失过多, 均可导致代谢性酸中毒,引起CO2-CP不同程度降低。
轻度代谢性酸中毒CO2-CP 22 ~ 18 mmol/L(50~40容积%),中度代谢性酸中毒CO2-CP 18 ~ 14.47 mmol/L(40~30容积%) ,
重度代谢性酸中毒CO2-CP <14.47 mmol/L(<30 容积%),极度代谢性酸中毒CO2-CP <4.49 mmol/L(<10容积%)。CO2-CP下降与BUN增高呈 负相关。
⑵呼吸性碱中毒:脑溢血、肺炎、支气管哮喘、 癔病等因换气过度,使CO2排出过多而降低。 2. CO2-CP增高
⑴代谢性碱中毒:各种原因引起的剧烈呕吐,
如急性胃炎、幽门梗阻、胃痉挛、妊娠呕吐等, 使酸根大量丢失导致CO2-CP增高。
⑵呼吸性酸中毒:慢性支气管炎、阻塞性肺气
肿、广泛性肺纤维化、慢性肺心病等所致通气和 换气功能障碍,均可引起增高。
CO2-CP表示呼吸和代谢两方面的综合结果。 在代谢性酸碱平衡失调时,它能及时地反映体内碱
2
100 — 500
2
充分振摇1~2分钟,以试剂R3滴定各管至呈 樱桃红色,静置10秒后不退色为终点。
⑵计算:
样品CO2-CP(mmol/L)
0.5 测定管所耗 0.01mol / L NaOH量(ml )
= 0.5 标准管所耗 0.01mol / L NaOH量(ml ) ×25.0
2. 分光光度法测定 ⑴加样:
储备的增减变化。在呼吸性酸碱平衡失调时,必须
在肾以
NH
2
或H+形式增加或减少算得排出,对回
吸收 HCO2 做出相应代偿反应时,方能表现出体内
百度文库碱储备 HCO2 的变化,因而CO2-CP不能及时反映
血中CO2的急剧变化。对伴有通气障碍而发生的酸
碱平衡失调的判断,其实用价值受到限制。
五、注意事项:
试剂
空白管
标准管
样品管
工作试剂(ml) 3
3
3
蒸 馏 水(μl) 100


标 准 液(μl)

100

样 品(μl)


100
充分混匀,置37℃水浴恒温3分钟后,室温冷却测定。
①分光光度计测定方法:波长546nm,试剂空 白调零,测定标准管和样品管吸光度,按公 式计算。
样品 = ×C Au

CO2-CP(mmol/L)
(26mmol/L)
Ac
三、参考值
成人:21.0 ~ 29.0mmol/L 儿童:18.0 ~ 28.0 mmol/L
四、临床意义
CO2-CP反应了体内的碱储备量,其量增加可能 是呼吸性酸中毒或代谢性碱中毒;其量减少可能是 代谢性酸中毒和呼吸性碱中毒。
1. CO2-CP 降低 ⑴ 代谢性酸中毒:糖尿病、饥饿使酸性物质生
1.标本应减少与空气接触,并迅速分离血清或 血浆,即时测定。
2.样品加入试剂R2后振摇要充分,并防止液体 溅出管外。
3.滴定操作在出现橙黄色退色减慢时,速度要 减慢,防止滴定过量。
4.样品一定要新鲜血清;若使用血浆,只能用 肝素抗凝而不能用其它抗凝剂,样品收集后应尽 快分离血清或血浆,及时测定。
5. 小心人体呼吸排出CO2对检验结果的影响。
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