凝集反应实验

3.用专用针头，滴管吸取RPR试剂，分别垂 直滴加30微升于上述血清中。
4.用RPR旋转仪水平转动卡8分钟，100转/ 分钟然后3分钟内在光线充足处判断结果。
1.阴性反应（—）：可见均匀的抗原颗粒而 无凝集物。
2.弱阳性反应（+——++）：可见较小的 黑色凝集物。
3.阳性反应（+++——++++）：可见中 等或较大的黑色凝块，溶液清亮。
上
实验原理
将含有可溶性抗原的待测标本先与 已知抗体混合，充分作用后再加入 抗原致敏的胶乳颗粒，因抗体已与 标本中的可溶性抗原结合，胶乳颗 粒不再出现可见的凝集现象。
1.实验条件：在23˚c—29˚c度的环境下进行。
2.RPR试剂在使用前应充分摇匀。
3.血清中加入试剂后充分振荡使其混匀。
4.定性实验呈弱阳性或阳性者必须做定量实验 才能了解患者血清中的抗体滴度，具体方法如 下：将待检血清用生理盐水作倍比稀释（原血 清，1：2，1：4，1：8，1：16，1：32）然 后对每个稀释按定性实验方法再进行测定并判 断结果。
[用途]
本方法能快速简单地测定梅毒病人血清 中的反应素，可用于梅毒诊断和监测梅 毒病人疗效。
RPR试剂 梅毒阳性对照 梅毒阴性对照 纸片 专用滴管，针头，橡皮头
1.分别吸取30微升梅毒阳性对照和阴性对 照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。
2.另吸取30微升待检血清均匀铺加在纸卡 的另一个圆圈中。
间接凝集反应具有快速、敏感、操作 简便、无需特殊的实验设备等特点，而且 能用于抗原或抗体的测定，因此在临床检 验中广为应用。
ห้องสมุดไป่ตู้
人绒毛膜促性腺激素
检测乙型肝炎表面抗原（ HBsAg）的间接血凝试验。
梅毒抗体 类风湿因子 RF
梅毒快速血浆反应素试验 Rapid Plasma Reagin （RPR） RPR试验
A、正向：诊断试剂为已知抗 原致敏的载体颗粒及相应抗体， 用于检测标本中是否存在与致 敏抗原相同的抗原。
第一种情况：
(标本)
结果：免疫微球不凝集为阳性
第二种情况：
标本 中无 抗原
结果：免疫微球凝集为阴性
3间接凝集抑制反应
B、反向：诊断试剂为已知抗体致 敏的载体颗粒及相应抗原，用 于检测标本中是否存在与致敏 抗体相同的抗体。
凝集反应的类型
一、直接凝集反应(direct agglutination)
是指细菌、螺旋体和红细胞等 颗粒性抗原，在适当电解质参与下可 直接与相应抗体结合出现肉眼可见的 凝集。反应中的抗原称为凝集原，参 与反应的抗体称为凝集素。
二、间接凝集反应
将已知的可溶性抗原（或抗体）吸附或 耦联到与免疫无关的载体颗粒表面,形成致敏 颗粒,再与相应抗体（或抗原）作用,在适宜 的电解质存在的条件下，出现肉眼所见的凝 集现象，称之。
5.本实验只为过筛试验，实验呈弱阳性或阳 性反应者，需结合临床进行综合分析判断 ，同时再做特异性密螺旋体实验加以确诊 。
妊娠试验—HCG测定
人绒毛膜促性腺激素，胎盘合体滋 养层细胞分泌的一种糖蛋白激素
妊娠4-10周分泌量最大
HCG是一种不随胎盘重量增加而分 泌增长的胎盘激素
梅毒感染的实验室诊断
（一）非梅毒螺旋体抗原血清学试验 （二）梅毒螺旋体抗原血清试验
（三） 梅毒确认试验
1、性病研究实验室试验（VDRL） 2、不加热血清反应素试验（USR） 3、快速血浆反应素试验 （RPR） 4、甲苯胺红试验（TRUST）
特异性梅毒血清学试验
梅毒螺旋体抗原血清试验：用梅毒螺旋体作为抗 原检测血清中的抗螺旋体IgM和/或IgG抗体， 其敏感性和特异性均高于非梅毒螺旋体抗原血清 试验，但不能用作疗效观察的指标。
结构中包括α与β两个非共价键结合的亚基。α亚 基与LH，FSH，及TSH的亚基相似，能与这些激 素产生交叉免疫反应
而β亚基与这些激素有较大的差异，不存在于其他 激素中，决定了生物活性和免疫活性的高特异性 。临床上采用高效的抗HCGβ亚基
现试剂盒为HCG-β试剂
1，ELISA：酶联免疫吸附试验 2，单克隆抗体胶体金试验 3，化学发光免疫法 4，放射免疫技术 5，胶乳凝集抑制实验 6，血凝抑制试验：载体不同，吸附于RBC
梅毒的免疫性（一）
感染梅毒后，首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体， 感染梅毒4周左右产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体，即使经足量抗梅
治疗，梅毒螺旋体抗原消失后很长时间，IgG抗体仍可通过记 忆细胞的作用继续产生，甚至终生在血清中可测出
梅毒的免疫性（二）
另一种具有抗体性质的物质叫反应素 （reagin），是梅毒螺旋体破坏人体组织过 程中释放出的一种抗原性心磷脂刺激机体所产 生的抗体。反应素一般在感染后5～7周产生。 经正规治疗后可逐渐消失。
1．沉淀反应 √2．凝集反应 3．补体参与的反应 4. 中和反应 5. 免疫标记
是指颗粒性抗原(红细胞、细菌等)或可 溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合 成致敏颗粒后与相应抗体（或抗原） 发生特异性结合，在适当电解质存在 下，形成肉眼可见的凝集现象。
在免疫学技术中，凝集反应可分 为直接凝集反应和间接凝集反应两大 类。
载体不同可分：
红细胞－间接血凝试验
聚苯乙烯乳胶－间接乳胶凝集试验
活性炭－间接炭凝集试验。
1、正向间接凝集反应
用于检测标本中的抗体
本试验简便、快速、敏感性和特异性高、 成本低。
2、反向间接凝集反应 用于检测标本中的抗原
本法快速、敏感性和特异性高
+
载体颗粒
抗 体
抗 原
抗体致敏颗 粒
凝集
3、间接凝集抑制反应 又称为胶乳凝集抑制试验
1、梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA） 2、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA) 3、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）
1、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验 （FTA-ABS）
2、梅毒螺旋体蛋白印迹试验 （western blot test）
[实验原理]
梅毒患者血清中存在着能与VDRL(类脂 质)抗原发生凝集反应的反应素，本试剂 利用这一原理，将VDRL抗原吸附于活性 炭颗粒表面，当待测血清中存在反应素 时，即与其发生凝集反应，出现肉眼可 见的黑色凝块。