分光光度法测量溶液色素含量实验方案设计报告

实验方案报告

实验项目：分光光度法测量饮料中色素含量

班级：生科二班

学号： 2014506101 姓名：孟令琦

学号： 2014506111 姓名：谢国清

一、实验目的

使用分光光度计测出饮料中柠檬黄、日落黄、和胭脂红的浓度。

二、实验条件

仪器：

紫外可见分光光度计，电子天平；容量瓶、移液管、烧杯等玻璃仪器。

试剂：

柠檬黄、日落黄、胭脂红（试剂说明见附录2）；乙酸铵；光学纯水；

三、实验方案（方法、步骤）

一、先各称取2.5mg的柠檬黄、日落黄、胭脂红，用三个50ml容量瓶配置成0.05mg/ml（50ug/ml）的母液，在分别将每种母液用量筒量取4ml、6ml、8ml、12ml、16ml到50ml容量瓶稀释成4ug/ml、6ug/ml、8ug/ml、12ug/ml、16ug/ml 的子溶液，则有15瓶标准溶液。

二、分别测量8ug/ml（中间浓度）的柠檬黄、日落黄、胭脂红标准溶液的吸光度曲线，记录三者吸光度最大时的波长λ1、λ2、λ3。

λ1λ2λ3

426 nm 482 nm 508 nm

三、分别测量15瓶标准溶液和待测溶液在波长λ1、λ2、λ3时的吸光度。

λ1λ2λ3

柠檬黄4ug/ml0.119 0.036 0.003 6ug/ml0.199 0.061 0.006 8ug/ml0.285 0.087 0.008 12ug/ml0.482 0.146 0.012 16ug/ml0.675 0.204 0.015

日落黄4ug/ml0.050 0.114 0.098 6ug/ml0.080 0.185 0.160 8ug/ml0.121 0.282 0.243 12ug/ml0.222 0.512 0.441 16ug/ml0.320 0.739 0.634

胭脂红4ug/ml0.035 0.094 0.116 6ug/ml0.056 0.153 0.188 8ug/ml0.091 0.231 0.281 12ug/ml0.139 0.366 0.447 16ug/ml0.195 0.526 0.645

待测溶液0.593 0.713 0.624

四、数据处理方法（拟采用的计算方法、程序、软件）

将所测得的数据用excel绘制出折线图，再绘制出趋势线，则趋势线的斜率即为

该波长下物质的摩尔吸光系数ε，如下图所示：

由图可得 λ1

λ2

λ3

ε11=0.0047 ε21=0.0014 ε31=0.0001 ε12=0.0023 ε22=0.0053 ε32=0.0046 ε13=0.0013

ε23=0.0036

ε33=0.0044

根据朗伯-比耳定律有：∑=n

i

i

i bC

A ε

由测得数据可列方程组

3132121111bC bC bC A εεε++= 3232221212bC bC bC A εεε++=

3332321313bC bC bC A εεε++=

将b=1，A 1=0.593，A 2=0.713，A 3=0.624以及ε的值代入方程组用软件（如下图）可解得 C 1=73.68 ，C 2=68.56 ，C 3=68.47 ；

结论： 该溶液由73.68ug/ml 的柠檬黄、68.56ug/ml 的日落黄和68.47ug/ml 的胭脂红组成。

误差分析：

1）仪器误差：仪器本身存在一定误差；

2）操作误差：用天平、量筒、容量瓶量取时读数有一定误差，配置溶液以及最后测量时溶质残留造成一定误差。