叶绿素的提取和分离实验报告
叶绿素的提纯实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解叶绿素的结构和性质。
2. 掌握叶绿素的提取和提纯方法。
3. 学习利用有机溶剂提取叶绿素,并通过色谱法进行分离和纯化。
二、实验原理叶绿素是绿色植物中进行光合作用的重要色素,主要由叶绿素a和叶绿素b组成。
叶绿素不溶于水,但可溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。
通过提取和提纯,可以得到高纯度的叶绿素,为进一步研究其性质和作用提供条件。
实验过程中,首先将植物叶片用有机溶剂提取叶绿素,然后通过层析法分离叶绿素和其他色素,最后收集纯化的叶绿素。
三、实验器材1. 新鲜植物叶片(如菠菜、青菜等)2. 研钵、研杵3. 乙醇、丙酮(分析纯)4. 层析柱、层析板5. 滤纸、脱脂棉6. 移液管、滴管7. 恒温水浴锅8. 显微镜9. 紫外-可见分光光度计四、实验步骤1. 提取叶绿素(1)取新鲜植物叶片,用剪刀剪碎,放入研钵中。
(2)加入适量乙醇和丙酮(体积比1:1),研磨至匀浆。
(3)将匀浆倒入分液漏斗,静置分层。
(4)收集有机层,用无水硫酸钠干燥。
(5)过滤,得到叶绿素提取液。
2. 分离叶绿素(1)将层析板放入层析柱中,在底部铺一层脱脂棉。
(2)取适量叶绿素提取液,用移液管滴加于层析板上,确保液面低于层析板边缘。
(3)选择合适的溶剂系统,如正己烷-乙酸乙酯(体积比4:1)。
(4)将溶剂滴加于层析板上,观察层析过程,直至溶剂前沿到达预定位置。
(5)取出层析板,用铅笔标记层析结果。
3. 收集纯化叶绿素(1)用移液管收集叶绿素层,倒入小烧杯中。
(2)加入少量乙醇,搅拌均匀。
(3)用滤纸过滤,收集滤液。
(4)将滤液倒入蒸发皿中,用恒温水浴锅蒸干。
(5)用少量乙醇溶解残留物,得到纯化叶绿素。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取:通过有机溶剂提取,可以得到绿色叶片提取物,表明叶绿素已从植物叶片中提取出来。
2. 叶绿素分离:通过层析法,可以将叶绿素与其他色素分离,证明叶绿素具有独特的性质。
3. 叶绿素纯化:通过蒸发和溶解,可以得到纯化的叶绿素,说明实验过程中叶绿素得到了有效的纯化。
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》随着社会一步步向前发展,我们都不可避免地要接触到报告,写报告的时候要注意内容的完整。
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生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》1一、实验目的1. 学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2. 比较、观察叶绿体中四种色素:理解它们的特点及与光合作用的关系二、实验原理光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上,而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。
故要提取色素,要破坏细胞结构,破坏叶绿体膜,使基粒片层结构直接与有机溶剂接触,使色素溶解在有机溶剂中。
叶绿体中的色素有四种,不同色素在层析液(脂溶性强的有机溶剂)中的`溶解度不同,因而随层析液的扩散速度也不同。
三、材料用具取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验过程(见书P54)1.提取色素:2.制备滤纸条:3.色素分离,纸层析法。
(不要让滤液细线触及层析液)4.观察:层析后,取出滤纸,在通风处吹干。
观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。
结果是:4条色素带从上而下依次是:胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。
五、讨论1.滤纸条上的滤液细线为什么不能接触到层析液?2.提取和分离叶绿体中色素的关键是什么?生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》2一、实验目的1、学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2、比较、观察叶绿体中四种色素:理解它们的特点及与光合作用的关系二、实验原理光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上,而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。
故要提取色素,要破坏细胞结构,破坏叶绿体膜,使基粒片层结构直接与有机溶剂接触,使色素溶解在有机溶剂中。
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇实验报告一:菠菜中提取叶绿素的方法比较1.引言叶绿素是一种重要的植物色素,它在光合作用中承担着捕获光能和转化化学能的重要角色。
菠菜是叶绿素含量较高的植物之一,因此本实验旨在比较不同方法提取菠菜中的叶绿素,探索最有效的提取方式。
2.材料与方法2.1 材料:- 新鲜菠菜叶片- 无水乙醚- 丙酮- 高速离心机- 比色皿2.2 方法:- 方法一:无水乙醚提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的无水乙醚,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于乙醚中,然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法二:丙酮提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的丙酮,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于丙酮中,然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法三:乙醇提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中,加入适量的乙醇,用摇床震动片刻,使叶绿素溶解于乙醇中,然后离心10分钟收集上层液体。
3.结果在三种提取方法中,通过观察可以发现,方法一和方法二提取的叶绿素溶液呈现绿色,而方法三提取的叶绿素溶液呈现黄绿色。
利用分光光度计测定三个试管中叶绿素溶液的吸光度,发现方法一和方法二提取的叶绿素吸光度较高,而方法三的吸光度较低。
4.讨论方法一使用无水乙醚作为提取溶剂,乙醚能有效溶解叶绿素,并且在离心过程中上层液体的分离效果较好。
方法二使用丙酮作为提取溶剂,丙酮也能有效溶解叶绿素,并且丙酮相对于乙醚来说更易于购买。
方法三使用乙醇作为提取溶剂,乙醇对叶绿素的溶解能力较差,导致提取的叶绿素溶液吸光度较低。
5.结论通过对菠菜中提取叶绿素的实验比较,我们发现使用无水乙醚和丙酮作为提取溶剂的方法能够较好地提取菠菜中的叶绿素,并且吸光度较高。
因此,在菠菜中提取叶绿素的实验中,建议使用无水乙醚或丙酮作为提取溶剂。
实验报告二:叶绿素在光合作用中的作用研究1.引言叶绿素是植物体内最重要的色素之一,它在光合作用中起着关键作用。
本实验旨在研究叶绿素在光合作用中的功能和重要性。
从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)
从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)从菠菜中提取叶绿素实验报告(精选3篇)从菠菜中提取叶绿素实验报告篇1【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。
2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg };胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。
当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。
【实验仪器】研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。
【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。
2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。
按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。
3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。
4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL水洗涤一次。
5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中,加几滴丙酮既可以看到颜色变化。
6、洗净仪器,收拾实验室,打扫卫生。
【实验记录】虽然分层现象不是非常明显,但是还是可以看得见分层现象。
【结果与讨论】1、做这个实验的时候,我觉得不应该用纱布挤干,因为个人感觉很多色素都被纱布吸走了,导致后来的实验现象没有很明显,经过对比,没用纱布直接过滤的同学做出的现象比用纱布做的现象要明显的多。
2、有机溶剂往往比较容易挥发,所以加入后要盖上表面皿。
3、此实验浸泡15分钟以后现象就可以很明显,因此以后在课堂上给学生演示的时候浸泡的时间不是越长越好的,15分钟足矣。
叶绿素实验报告书(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习并掌握从菠菜中提取叶绿素的方法。
2. 了解叶绿素的化学性质及其在光合作用中的作用。
3. 培养实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的主要色素,位于叶绿体的类囊体膜上。
叶绿素分子中含有镁离子,是镁卟啉化合物。
叶绿素分为叶绿素a和叶绿素b两种,分别吸收红光和蓝紫光,对绿光的吸收最少,因此叶片呈现绿色。
叶绿素的提取方法主要有溶剂提取法和层析法。
本实验采用溶剂提取法,利用有机溶剂(如丙酮、乙醇等)将叶绿素从菠菜叶片中提取出来。
叶绿素在有机溶剂中溶解度较高,因此可以通过这种方式提取。
三、实验仪器与材料1. 仪器:研钵、剪刀、烧杯、漏斗、玻璃棒、滤纸、滤液细线、色谱柱、脱脂棉、纱布等。
2. 材料:新鲜菠菜叶、丙酮、碳酸钙等。
四、实验步骤1. 准备材料:称取30g新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎。
2. 研磨:将剪碎的菠菜叶放入研钵中,加入少量碳酸钙,用研杵研磨至烂。
3. 提取:将研磨好的菠菜叶转移到烧杯中,加入30mL丙酮,盖上表面皿,浸泡10-15分钟。
4. 过滤:用滤纸将提取液过滤,收集滤液。
5. 层析:将滤液滴在色谱柱的滤纸条上,层析液从上至下流过,观察色素分离情况。
五、实验结果与分析1. 提取液颜色:提取液呈绿色,表明叶绿素已从菠菜叶片中提取出来。
2. 层析结果:色谱柱上出现四条不同颜色的色带,自上而下依次为胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。
六、实验讨论1. 叶绿素在光合作用中起着至关重要的作用,是植物进行能量转换的关键色素。
本实验通过溶剂提取法成功提取了叶绿素,为后续研究提供了基础。
2. 实验过程中,碳酸钙的加入有助于防止研磨过程中叶绿素被破坏。
此外,层析法可以有效地将叶绿素与其他色素分离,便于进一步研究。
3. 本实验操作简单,但需要注意以下几点:- 研磨过程中要避免研磨过猛,以免破坏叶绿素结构。
- 提取过程中要控制好溶剂的用量和浸泡时间,以确保叶绿素充分提取。
从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇
从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇从菠菜中提取叶绿素实验报告 (1)1.1 仪器与试剂仪器:研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10 cm)、UV-240紫外分光光度计试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶G、中性氧化铝(150目~160目)1.2 提取与分离1.2.1 浸泡法提取色素在研钵中放入20 g新鲜的菠菜叶,加入20 mL3:2(体积比)石油醚—乙醇混合液,适当研磨(不要研成糊状,否则会给分离造成困难),用倾析法将提取液转移到分液漏斗中,每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。
洗涤时要轻轻旋荡,以防乳化。
弃去水乙醇层,石油醚层用无水硫酸钠干燥,干燥后滤入小圆底烧瓶,在水浴上蒸发浓缩至大约l m L。
1.2.2 薄层层析取四块显微载玻片,硅胶G经0.5%羧甲基纤维素钠调制后制板,在室温下晾干后在110°C活化1h。
选取效果最好的一块进行点样。
展开剂:(1)石油醚—丙酮=8:2(体积比)(2)石油醚—乙酸乙酯=6:4(体积比)取活化后的层析板,点样,放入预先选定展开剂的广口瓶。
瓶的内壁贴一张高5cm,绕周长4/5的滤纸,下部浸入展开剂中,盖上瓶盖。
待展开剂上升至规定高度时,取出层析板,晾干,做出标记。
分别用两种展开剂展开,比较不同展开剂的展开效果。
观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小。
注意更换展开剂时,需干燥层析瓶,不允许前一种展开剂带入后一系统。
1.2.3 柱层析取少量脱脂棉在小烧杯中用石油醚浸润后,挤压除去气泡,放在层析柱底部。
在层析柱中加15cm石油醚。
加入中性氧化铝8克,打开柱下活塞,保持石油醚高度不变,氧化铝在柱子中堆积。
装完后,打开下端活塞,放出溶剂,直到氧化铝表面剩下1—2mm高为止(不能使氧化铝表面露出液面)。
将浓缩液用滴管加到柱顶部,打开下端活塞,让液面下降到柱面以下1mm,关闭活塞,加数滴石油醚,打开活塞,使液面下降,几次反复,使色素全部进入柱体。
绿叶素的提取实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习从植物叶片中提取叶绿素的方法。
2. 了解叶绿素的性质和功能。
3. 掌握层析技术的基本原理和操作方法。
4. 通过实验,加深对绿色植物光合作用的理解。
二、实验原理叶绿素是绿色植物进行光合作用的重要色素,主要存在于植物的叶绿体中。
叶绿素分子由卟啉环和长链脂质组成,具有亲水和亲脂性。
在提取过程中,利用有机溶剂(如丙酮、乙醇等)可以将叶绿素从植物组织中溶解出来。
层析技术是分离混合物中各组分的一种常用方法,通过不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异,实现分离。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜绿色植物叶片、无水乙醇、丙酮、层析纸、层析缸、滤纸、镊子、剪刀、研钵、研杵、移液管、滴管、天平等。
2. 实验仪器:分析天平、紫外-可见分光光度计、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备植物样品:取新鲜绿色植物叶片,洗净、晾干,用剪刀剪成小碎片。
2. 提取叶绿素:将剪碎的叶片放入研钵中,加入适量无水乙醇,用研杵充分研磨,使叶片充分溶解。
3. 过滤:将研磨后的溶液用滤纸过滤,收集滤液。
4. 蒸发溶剂:将滤液倒入蒸发皿中,在通风橱内蒸发溶剂,直至出现固体。
5. 层析分离:将得到的固体溶解于少量丙酮中,用移液管吸取少量溶液滴在层析纸上,待溶剂挥发后,将层析纸放入层析缸中,加入适量丙酮作为流动相,观察层析过程。
6. 观察与记录:观察层析纸上色素带的分布情况,记录色素带的颜色、位置和宽度。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取:通过研磨和过滤,成功从植物叶片中提取出叶绿素。
2. 层析分离:在层析纸上观察到三条明显的色素带,从上到下依次为胡萝卜素、叶黄素和叶绿素。
3. 叶绿素性质:叶绿素具有绿色,在紫外-可见光范围内有特定的吸收光谱,可被分光光度计检测。
4. 光合作用:叶绿素是光合作用的主要色素,参与光能的吸收和转换。
六、实验讨论1. 叶绿素的提取:在提取过程中,有机溶剂的选择和用量对叶绿素的提取效果有较大影响。
叶绿素的提取、分离和测定
Ca=12.7OD663-2.69OD645 Cb=22.9OD645-4.68OD663 Ct=Ca+Cb=20.2D645+8.02D663
解方程式得
(二)步骤
称取0.5g叶片,剪碎后置于玻璃匀浆器中加纯丙酮5mL,研成匀浆,用80%丙酮10mL洗匀浆器,用80%丙酮定容到25mL,避光静置5min。用移液管吸取上面的绿色清液1mL置于一大试管中,加入丙酮4ml稀释,摇动试管,作测定用。
测量光密度值 取上述提取液以80%丙酮作为空白对照,于663及645nm下读取光密度值
计算结果代入公式求出各来自绿素的含量(单位mg/L)最后计算时需考虑稀释因子
叶绿素a含量(mg/g鲜重)=CA*5 *25*2/1000 =0.25CA
叶绿素b的含量(mg/g鲜重)=0.25CB
研钵、吸管、小烧杯、试管、培养皿等
01
95%酒精、石油醚
02
碳酸钙
03
(二)仪器和药品
(三)步骤
用天平称取15g鲜叶,剪碎放入研钵中,加少量的CaCO3粉末及95%酒精5-10mL研成糊状,再加95%酒精20mL,充分混匀以提取叶片匀浆中的色素,5-10分钟后,过滤入三角烧瓶中加塞待用。
取一张色层分析纸或定性滤纸代用,剪成圆形,直径应略大于培养皿的直径;将圆形滤纸平放在培养皿上,用滴管吸取叶绿素提取液,滴在滤纸的中心位置,稍干后,再重复操作几次;然后取另一滴管吸取石油醚,慢慢地推动叶绿素提取液,不久即可看到分离的各种色素的同心圆环,由内到外依次为:叶绿素a为蓝绿色、叶绿素b为黄绿色、叶黄素呈鲜黄色、胡萝卜素为橙黄色。
叶绿素a、b在长波方面的最大吸收峰分别为为663nm和645nm。
叶绿素样本制作实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解叶绿素的提取原理和方法。
2. 掌握叶绿素样本制作的步骤和技巧。
3. 通过实验,加深对叶绿素在植物中的作用和分布的认识。
二、实验原理叶绿素是植物体内的一种绿色色素,是进行光合作用的重要物质。
叶绿素主要存在于植物的叶绿体中,具有吸收光能、传递电子和催化光合作用等生理功能。
本实验通过提取叶绿素,制作叶绿素样本,观察其颜色、形态和分布,进一步了解叶绿素在植物体内的作用。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜叶、95%乙醇、石英砂、碳酸钙、蒸馏水、滤纸、移液管、量筒、研钵、试管、剪刀、天平等。
2. 实验仪器:分光光度计、紫外-可见分光光度计、电子天平、研钵、试管、烧杯、漏斗、滤纸等。
四、实验步骤1. 准备叶绿素提取液(1)称取0.1g新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中。
(2)加入少量石英砂和碳酸钙粉,再加入3~5ml 95%乙醇。
(3)研磨至组织变白,静置3~5min。
2. 过滤提取液(1)取一张滤纸,置漏斗中,用乙醇湿润。
(2)将提取液倒入漏斗中,过滤到10ml试管中。
(3)用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次,最后连同残渣一起倒入漏斗中。
3. 定容(1)用滴管吸取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入漏斗中,直至滤纸和残渣中无绿色为止。
(2)最后用乙醇定容至10ml,摇匀。
4. 测定叶绿素含量(1)将叶绿素提取液倒入光径1cm的比色杯内。
(2)以95%乙醇为空白,在波长663nm、645nm下或652nm测定吸光度。
(3)根据吸光度计算叶绿素的含量。
5. 制作叶绿素样本(1)取一张滤纸,用蒸馏水湿润。
(2)将提取液滴加到滤纸上,使其充分扩散。
(3)待滤纸干燥后,用剪刀将叶绿素样本剪成适当大小。
五、实验结果与分析1. 叶绿素含量测定根据实验结果,叶绿素提取液的吸光度为A,根据计算公式可得叶绿素的含量(mg/g)为:叶绿素的含量(mg/g)= [(A/34.5)提取液体积] × 10002. 叶绿素样本制作通过实验,成功制作了叶绿素样本。
绿叶色素的分离实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习绿叶中色素的提取和分离方法。
2. 掌握层析法分离不同色素的原理和操作。
3. 了解不同色素在叶绿体中的分布和特点。
二、实验原理绿叶中的色素主要包括叶绿素、类胡萝卜素和叶黄素等。
这些色素在有机溶剂中具有良好的溶解度,因此可以通过有机溶剂提取绿叶中的色素。
在层析过程中,不同色素在层析液中的溶解度不同,从而在滤纸上形成不同的色素带。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜的绿色叶片、无水乙醇、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙、定性滤纸、研钵、烧杯、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒等。
2. 实验仪器:分析天平、酒精灯、烘箱、显微镜、电子天平等。
四、实验步骤1. 提取绿叶中的色素:(1)取新鲜的绿色叶片,用剪刀剪成小块,放入研钵中。
(2)加入适量的二氧化硅和碳酸钙,充分研磨。
(3)向研钵中加入10ml无水乙醇,继续研磨,使色素充分溶解。
(4)将研磨好的混合物过滤,收集滤液。
2. 制备滤纸条:(1)取一张定性滤纸,剪去两角,使滤纸条呈三角形。
(2)将滤纸条放入烧杯中,加入少量层析液,使滤纸条充分湿润。
(3)将滤纸条取出,在通风处吹干。
3. 画滤液细线:(1)用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀画一条细而直的滤液线。
(2)待滤液线干燥后,重复画2-3次,以增加色素量。
4. 色素分离:(1)将干燥后的滤纸条画线一端朝下放入有少许层析液的层析瓶中。
(2)盖上培养皿,使层析瓶密封。
(3)待层析液上升到滤纸条上端后,取下培养皿,观察色素分离情况。
5. 观察与记录实验结果:(1)观察滤纸条上出现的色素带数目、颜色、位置和宽窄。
(2)记录实验结果,分析不同色素的分布和特点。
五、实验结果与分析1. 滤纸条上出现的色素带从上至下依次为:胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。
2. 胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光,叶绿素a和叶绿素b主要吸收蓝紫光和红光。
高中色素提取实验报告(3篇)
一、实验目的1. 学习叶绿体中色素的提取和分离方法。
2. 了解叶绿体色素的种类及其在光合作用中的作用。
3. 培养学生的实验操作能力和观察分析能力。
二、实验原理叶绿体中含有多种色素,其中绿色素包括叶绿素a和叶绿素b,黄色素包括胡萝卜素和叶黄素。
这些色素都易溶于有机溶剂,如丙酮或无水乙醇。
利用有机溶剂提取叶绿体中的色素,并通过层析法分离不同色素,可观察到不同颜色的色素带,从而确定叶绿体中存在的色素种类。
三、实验材料1. 新鲜绿色叶片(如菠菜叶)2. 无水乙醇3. 层析液(由20份石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成)4. 二氧化硅5. 碳酸钙6. 研钵7. 玻璃棒8. 定性滤纸9. 毛细吸管10. 试管11. 烧杯12. 移液管13. 天平四、实验步骤1. 提取色素(1)称取5g新鲜绿色叶片,剪碎,放入研钵中。
(2)向研钵中加入少量二氧化硅和碳酸钙,用玻璃棒充分研磨。
(3)向研钵中加入10mL无水乙醇,继续研磨,使叶片中的色素充分溶解。
(4)将研磨液倒入试管中,用移液管吸取上层清液。
2. 制备滤纸条(1)将定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条。
(2)将滤纸条一端剪去两角,在此端距顶端1cm处用铅笔划一条细横线。
3. 层析分离(1)将烧杯中加入少量层析液,使层析液浸没滤纸条底端。
(2)将滤纸条插入烧杯中,使滤液细线位于液面之上。
(3)观察色素分离情况,记录不同色素带的位置和颜色。
4. 观察记录(1)记录不同色素带的位置和颜色,从上到下依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。
(2)分析实验结果,总结叶绿体中存在的色素种类及其在光合作用中的作用。
五、实验结果与分析1. 实验结果从上到下依次为胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)和叶绿素b(黄绿色)。
2. 实验分析通过实验观察到四种不同的色素带,证明叶绿体中存在四种色素,分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。
这些色素在光合作用中具有不同的作用,如胡萝卜素吸收光能,叶黄素保护叶绿素免受光损伤,叶绿素a和叶绿素b则参与光合作用的化学反应。
提取叶绿素理论实验报告(3篇)
一、实验目的1. 理解叶绿素在植物光合作用中的作用及其提取的重要性。
2. 掌握从植物材料中提取叶绿素的基本原理和实验方法。
3. 学习使用有机溶剂提取和分离叶绿素的技术。
4. 了解叶绿素的理化性质和鉴定方法。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的关键色素,主要存在于植物的叶绿体中。
叶绿素分子由一个镁离子和四个吡咯环组成,这些环通过共轭双键形成一个大的共轭体系,使其能够吸收太阳光中的光能。
在提取叶绿素的过程中,利用叶绿素能溶解于有机溶剂(如丙酮、乙醇等)的特性,将其从植物组织中分离出来。
叶绿素的提取通常包括以下几个步骤:1. 植物材料的准备:选择新鲜的绿色植物叶片,洗净、晾干。
2. 研磨:将植物叶片与碳酸钙和有机溶剂混合,在研钵中研磨,使叶绿素从细胞中释放出来。
3. 提取:将研磨后的混合物过滤,收集滤液。
4. 分离:使用色谱技术(如纸层析、薄层色谱或柱层析)对滤液中的叶绿素进行分离。
5. 鉴定:通过观察分离后的色素带颜色和与标准样品比较,鉴定叶绿素的存在。
三、实验材料与仪器实验材料:- 新鲜绿色植物叶片(如菠菜)- 丙酮或乙醇- 碳酸钙- 研钵- 滤纸- 漏斗- 色谱纸或薄层色谱板- 显色剂(如碳酸钠溶液)- 烧杯- 量筒实验仪器:- 烘箱- 蒸馏装置- 显微镜- 分光光度计四、实验步骤1. 植物材料准备:选择新鲜的绿色植物叶片,洗净、晾干,称取适量叶片备用。
2. 研磨:在研钵中加入叶片、碳酸钙和丙酮或乙醇,用玻璃棒研磨至叶片充分破碎。
3. 提取:将研磨后的混合物通过滤纸过滤,收集滤液。
4. 分离:- 纸层析法:将滤液滴在色谱纸上,用合适的溶剂系统进行层析,待溶剂前沿到达预定位置后取出色谱纸,晾干。
- 薄层色谱法:将滤液滴在薄层色谱板上,用合适的溶剂系统进行层析,待溶剂前沿到达预定位置后取出薄层色谱板,晾干。
- 柱层析法:将滤液加入装有吸附剂的层析柱中,用合适的溶剂系统进行层析,收集不同颜色的流出液。
从菠菜中提取叶绿素实验报告(分享10篇)
从菠菜中提取叶绿素实验报告(分享10篇)(经典版)编制人:__________________审核人:__________________审批人:__________________编制单位:__________________编制时间:____年____月____日序言下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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叶绿体色素提取实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习并掌握叶绿体色素的提取方法。
2. 通过实验了解叶绿体中主要色素的种类、特性及其与光合作用的关系。
3. 掌握纸层析法分离混合色素的原理和方法。
二、实验原理叶绿体中的色素主要分为两大类:叶绿素和类胡萝卜素。
叶绿素在光合作用中起着关键作用,而类胡萝卜素则吸收其他波长的光能。
这两种色素均不溶于水,但能溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。
因此,通过有机溶剂提取叶绿体中的色素,并利用纸层析法进行分离,可以观察到不同色素的特征。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜的绿色叶片、无水乙醇、碳酸钙、二氧化硅、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒。
2. 实验仪器:显微镜、紫外灯、天平、酒精灯、电炉、通风橱。
四、实验步骤1. 样品制备:取新鲜绿色叶片,用剪刀剪碎,放入研钵中。
2. 提取色素:- 向研钵中加入少量无水乙醇,用研杵充分研磨,使叶片充分破碎。
- 将研磨液倒入烧杯中,加入少量碳酸钙和二氧化硅,搅拌均匀。
- 将烧杯置于电炉上加热,用酒精灯辅助加热,使研磨液沸腾,不断搅拌,直至溶液颜色变深。
- 停止加热,待溶液冷却后,用漏斗和纱布过滤,收集滤液。
3. 制备滤纸条:- 将定性滤纸剪成长条,用铅笔在滤纸条的一端画一条直线。
- 将滤纸条一端插入装有少量层析液的烧杯中,使滤纸条的下端浸入层析液中,但不要让滤液细线触及层析液。
4. 色素分离:- 将滤纸条轻轻取出,放在通风处晾干。
- 用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀画一条细而直的滤液线。
- 将滤纸条放入装有少量层析液的层析瓶中,盖上盖子,静置一段时间,观察色素分离情况。
5. 观察与记录:- 观察滤纸条上出现的色素带,记录其颜色、位置和宽窄。
- 比较不同色素的特性,分析实验结果。
五、实验结果与分析1. 在滤纸条上观察到4条明显的色素带,从上至下依次为胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。
叶绿素的提取实验报告
一、实验目的1. 了解叶绿素在植物光合作用中的作用。
2. 掌握叶绿素提取的方法和原理。
3. 学习使用有机溶剂提取植物中的叶绿素。
4. 了解叶绿素提取过程中可能遇到的问题及解决方法。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要物质,主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。
这些色素不溶于水,但溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。
因此,我们可以利用有机溶剂提取植物中的叶绿素。
实验中,我们使用95%乙醇作为提取剂,通过研磨、过滤等步骤提取叶绿素。
提取液中的叶绿素可通过薄层色谱法进行分离和鉴定。
三、实验材料1. 新鲜植物叶片(如菠菜、卤地菊等)2. 95%乙醇3. 研钵、剪刀、石英砂、碳酸钙粉、漏斗、滤纸、烧杯、玻璃棒等四、实验步骤1. 取新鲜植物叶片1克,洗净、擦干,去掉中脉剪碎,放入研钵中。
2. 在研钵中加入少量石英砂和碳酸钙粉,加入2-3 mL 95%乙醇,研磨至糊状。
3. 再加入2-3 mL 95%乙醇,继续研磨,直至植物碎片充分溶解。
4. 将研磨好的混合物用漏斗过滤,收集滤液。
5. 将滤液置于烧杯中,用玻璃棒搅拌均匀。
6. 取一张滤纸,将滤液均匀涂在滤纸上,晾干。
7. 将晾干的滤纸置于紫外灯下,观察叶绿素荧光现象。
8. 将晾干的滤纸置于薄层色谱板上,用合适的溶剂进行层析。
9. 观察层析结果,确定叶绿素a和叶绿素b的位置。
五、实验结果与分析1. 植物叶片经过研磨、过滤后,滤液呈绿色,说明叶绿素已被提取。
2. 在紫外灯下观察,晾干的滤纸上有绿色荧光,证明叶绿素的存在。
3. 通过薄层色谱分离,叶绿素a和叶绿素b分别在色谱板上形成两个不同的斑点,证明叶绿素已被成功分离。
六、实验讨论1. 实验过程中,使用碳酸钙粉的目的是防止研磨过程中叶绿素被破坏。
2. 乙醇的浓度对叶绿素的提取效果有影响,实验中使用的95%乙醇提取效果较好。
3. 叶绿素提取过程中,温度、研磨时间等因素也会影响提取效果。
4. 薄层色谱分离叶绿素时,选择合适的溶剂和层析条件对分离效果至关重要。
叶绿素的提取和分离实验报告
叶绿素的提取和分离实验报告一、实验目的1、掌握叶绿素提取和分离的原理和方法。
2、了解叶绿体中色素的种类和含量。
二、实验原理1、提取原理叶绿素是一种脂溶性色素,能够溶解在有机溶剂中,如无水乙醇、丙酮等。
在研磨叶片时,细胞被破碎,叶绿素能够从叶绿体中释放出来,溶解在有机溶剂中,从而实现提取。
2、分离原理叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。
这样,不同的色素就会在滤纸条上分离出来。
三、实验材料和用具1、材料新鲜的菠菜叶。
2、用具研钵、漏斗、脱脂棉、毛细吸管、剪刀、定性滤纸、载玻片、盖玻片、培养皿、天平、药匙、量筒、玻璃棒、无水乙醇、层析液(石油醚:丙酮:苯= 20:2:1)、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验步骤1、提取叶绿素(1)称取 5g 新鲜的菠菜叶,剪碎后放入研钵中。
(2)向研钵中加入少量的二氧化硅和碳酸钙,以及5mL 无水乙醇。
(3)迅速、充分地研磨菠菜叶,直至变成匀浆状。
(4)用漏斗和脱脂棉过滤研磨液,收集滤液到小试管中。
2、制备滤纸条(1)将定性滤纸剪成 10cm×1cm 的长条。
(2)在一端剪去两角,以防止层析液在滤纸条边缘扩散过快。
3、画滤液细线(1)用毛细吸管吸取少量滤液,沿滤纸条的铅笔细线均匀地画出一条细而直的滤液细线。
(2)待滤液干后,再重复画 2 3 次,以增加色素的含量。
4、分离叶绿素(1)将适量的层析液倒入培养皿中,液面高度不要超过 1cm。
(2)将滤纸条有滤液细线的一端朝下,轻轻插入层析液中,注意不要让滤液细线触及层析液。
(3)用培养皿盖盖住培养皿,以防止层析液挥发。
5、观察和记录(1)一段时间后,取出滤纸条,待干燥后观察色素带的分布。
(2)记录不同色素带的颜色、位置和宽度。
五、实验结果1、观察到滤纸条上出现了四条不同颜色的色素带,从上到下依次为:胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素 a(蓝绿色)、叶绿素 b(黄绿色)。
叶片提取叶绿体实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解叶绿体的基本结构和功能。
2. 掌握从叶片中提取叶绿体的方法。
3. 学习观察叶绿体的形态和结构。
二、实验原理叶绿体是植物细胞中特有的细胞器,是进行光合作用的重要场所。
叶绿体中含有大量的叶绿素,使叶片呈现绿色。
本实验通过研磨叶片,提取叶绿体,观察其形态和结构,从而了解叶绿体的基本特征。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜绿色叶片、无水乙醇、二氧化硅、碳酸钙、滤纸、毛细管、载玻片、显微镜等。
2. 仪器:研钵、剪刀、烧杯、漏斗、纱布、量筒、酒精灯等。
四、实验步骤1. 准备材料:取新鲜绿色叶片,用剪刀剪成小块,备用。
2. 提取叶绿体:a. 在研钵中加入适量二氧化硅和碳酸钙,放入剪好的叶片。
b. 加入无水乙醇,研磨至叶片成糊状。
c. 将研磨液倒入漏斗中,用纱布过滤,收集滤液。
3. 观察叶绿体:a. 取载玻片,滴加少量滤液。
b. 用显微镜观察叶绿体的形态和结构。
五、实验结果与分析1. 叶绿体的提取:经过研磨、过滤等步骤,成功从叶片中提取了叶绿体。
2. 叶绿体的形态和结构:在显微镜下观察,叶绿体呈绿色,呈椭球形或球形,具有双层膜结构,内部有基粒和基质。
六、实验讨论1. 叶绿体的提取过程中,二氧化硅和碳酸钙的作用是什么?二氧化硅和碳酸钙在研磨过程中起到研磨叶片的作用,有助于破坏细胞结构,释放叶绿体。
2. 为什么使用无水乙醇作为提取溶剂?无水乙醇是一种良好的有机溶剂,能够溶解叶绿素,便于提取。
3. 如何观察叶绿体的形态和结构?通过研磨、过滤等步骤提取叶绿体后,在显微镜下观察,可以看到叶绿体的绿色、椭球形或球形、双层膜结构等特征。
七、实验结论本实验成功从叶片中提取了叶绿体,并观察了其形态和结构。
实验结果表明,叶绿体是植物细胞中特有的细胞器,具有双层膜结构,内部有基粒和基质。
通过本实验,我们了解了叶绿体的基本特征,为后续研究光合作用等生物学问题奠定了基础。
八、实验反思1. 在提取叶绿体的过程中,研磨叶片时要用力均匀,避免过度研磨导致叶绿体破坏。
叶绿素提取生物实验报告
一、实验目的1. 了解叶绿素的结构和功能。
2. 掌握叶绿素提取和分离的方法。
3. 探究不同提取溶剂对叶绿素提取效果的影响。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素,主要存在于叶绿体的类囊体膜上。
叶绿素分子由一个镁离子和四个吡咯环组成,可以吸收太阳光中的光能,并将其转化为化学能。
叶绿素提取的原理是利用有机溶剂(如丙酮、乙醇等)将叶绿素从植物组织中溶解出来。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜叶、丙酮、乙醇、蒸馏水、层析纸、毛细管、研钵、剪刀、漏斗、烧杯、滤纸等。
2. 实验仪器:显微镜、分光光度计、紫外可见光分光光度计、恒温水浴锅、离心机等。
四、实验步骤1. 准备提取液:将丙酮、乙醇、蒸馏水按一定比例混合,配制成不同浓度的提取液。
2. 提取叶绿素:取新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨。
加入少量碳酸钙,防止研磨过程中破坏叶绿素结构。
将研磨好的菠菜叶转入烧杯中,加入适量的提取液,浸泡一段时间。
3. 过滤提取液:用滤纸过滤提取液,去除固体杂质。
4. 分离叶绿素:将层析纸浸入蒸馏水中,使其充分湿润。
用毛细管将提取液点在层析纸的一端,另一端放入装有蒸馏水的烧杯中,进行纸层析。
5. 观察层析结果:待层析液上升到一定高度后,取出层析纸,观察叶绿素在层析纸上的分离情况。
6. 测量叶绿素含量:用紫外可见光分光光度计测定叶绿素溶液的吸光度,计算叶绿素含量。
五、实验结果与分析1. 不同提取溶剂对叶绿素提取效果的影响:通过比较丙酮、乙醇、蒸馏水三种提取溶剂的叶绿素提取效果,发现丙酮提取效果最好,其次是乙醇,蒸馏水提取效果较差。
2. 叶绿素在层析纸上的分离情况:通过观察层析结果,发现叶绿素在层析纸上呈现出蓝绿色带状,说明叶绿素在层析纸上有较好的分离效果。
3. 叶绿素含量测定:通过紫外可见光分光光度计测定叶绿素溶液的吸光度,计算叶绿素含量。
实验结果显示,叶绿素含量与提取溶剂的浓度、提取时间等因素有关。
六、实验结论1. 丙酮是提取叶绿素的最佳溶剂。
叶绿素分离提取实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习并掌握从植物材料中提取叶绿素的方法。
2. 了解柱色谱分离技术的原理及其在叶绿素分离中的应用。
3. 通过实验操作,提高对天然产物分离纯化技术的实际操作能力。
4. 掌握叶绿素理化性质的鉴定方法。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素,主要存在于植物的叶片中。
叶绿素具有多种类型,包括叶绿素a和叶绿素b,它们在结构上存在细微差别。
在提取过程中,叶绿素能够溶解于有机溶剂中,如丙酮或乙醇。
通过柱色谱技术,可以根据叶绿素与其他色素在极性和溶解度上的差异,实现叶绿素的分离。
实验中使用的柱色谱技术,主要是利用固定相(如硅胶)对不同极性物质的吸附能力差异,以及流动相(如不同极性的溶剂)对物质的推动作用,使混合物中的各组分在柱中按一定顺序移动,从而实现分离。
三、实验器材与试剂1. 器材:研钵、漏斗、三角瓶、色谱柱、毛细管、烘箱、天平等。
2. 试剂:新鲜植物叶片、丙酮、硅胶、无水乙醇、氨水、氢氧化钠等。
四、实验步骤1. 样品准备:取新鲜植物叶片,剪碎后置于研钵中,加入适量丙酮,研磨充分,使叶片中的叶绿素溶解。
2. 过滤:将研磨后的溶液通过滤纸过滤,去除固体杂质。
3. 柱色谱准备:将硅胶装入色谱柱中,用无水乙醇淋洗,直至流出液无色。
4. 上样:将过滤后的叶绿素溶液缓慢加入色谱柱中,使其均匀分布。
5. 洗脱:用不同极性的溶剂(如无水乙醇、氨水、氢氧化钠溶液等)依次洗脱,收集流出液。
6. 检测与鉴定:通过比色法或紫外-可见光谱法检测收集到的流出液中的叶绿素含量,并观察其颜色变化,鉴定叶绿素。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取:通过研磨和丙酮溶解,成功提取出植物叶片中的叶绿素。
2. 柱色谱分离:在色谱柱中,叶绿素与其他色素分离良好,分别形成不同的色带。
3. 叶绿素鉴定:通过比色法或紫外-可见光谱法检测,确定收集到的流出液中含有叶绿素。
4. 叶绿素含量测定:通过计算收集到的叶绿素溶液的吸光度,得出叶绿素含量。
叶绿素提取分离实验报告
一、实验目的1. 学习叶绿素提取与分离的方法。
2. 了解叶绿素的理化性质。
3. 掌握薄层色谱法在叶绿素分离中的应用。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的主要色素,存在于叶绿体的类囊体膜上。
叶绿素具有吸收红光和紫光,反射绿光的特性,因此植物呈现绿色。
叶绿素主要分为叶绿素a和叶绿素b两大类,此外还有叶黄素和胡萝卜素等类胡萝卜素。
叶绿素的提取通常采用有机溶剂,如乙醇、丙酮等,将叶绿素从植物组织中溶解出来。
分离叶绿素通常采用薄层色谱法,根据叶绿素在不同溶剂中的分配系数不同,通过层析将叶绿素与其他色素分离。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜叶片、石英砂、碳酸钙粉、95%乙醇、层析缸、滤纸、毛细管等。
2. 实验仪器:研钵、漏斗、三角瓶、剪刀、滴管、电热恒温水浴锅、离心机、紫外灯等。
四、实验步骤1. 准备工作:将新鲜菠菜叶片洗净、擦干,去掉中脉剪碎。
2. 叶绿素提取:将剪碎的菠菜叶片放入研钵中,加入少量石英砂和碳酸钙粉,加入2-3ml 95%乙醇,研磨至糊状,再加入10-15ml 95%乙醇,离心35min,提取上清液过滤于三角瓶中。
3. 叶绿素分离:取圆形定性滤纸一张,将其剪成滤纸条(9cm×3cm),用滴管吸取乙醇叶绿素提取液,沿纸条的长度方向涂在纸条的一边(距边约1cm),使色素扩散的宽度限制在0.5cm以内,风干后,重复操作数次。
4. 层析:在层析缸中加入适量的推动剂,将滤纸条带有色素的一端插入层析缸中,使滤纸条下端浸入推动剂中。
迅速盖好层析缸盖,等待推动剂前沿接近滤纸边缘时,取出滤纸,风干,即可观察到分离的各种色素条带。
五、实验结果与分析1. 色素条带观察:在紫外灯下观察,滤纸条上呈现出蓝绿色、黄绿色、黄色和橙黄色的条带。
2. 色素鉴定:根据色素条带的颜色和位置,鉴定出叶绿素a、叶绿素b、叶黄素和胡萝卜素。
3. 叶绿素含量测定:通过比较各色素条带的长度,计算叶绿素a和叶绿素b的含量。
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陕西师范大学远程教育学院
生物学实验报告
报告题目叶绿素的提取和分离
姓名刘伟
学号
专业生物科学
批次/层次
指导教师
学习中心
叶绿素的提取和分离
一、实验目的
1. 学习叶绿体色素的提取、分离方法。
2. 通过叶绿体色素提取、分离方法的学习了解叶绿体色素的相关理化性质。
3. 为进一步研究各叶绿体色素性质、功能等奠定基础。
二、原理
叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。
它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。
它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(如极性、吸收光谱)和在光合作用中的地位和作用也不一样。
这两类色素是酯类化合物,都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙醇等有机溶剂提取。
提取液可用色谱分析的原理加以分离。
因吸附剂对不同物质的吸附力不同,当用适当的溶剂推动时,混合物中各种成分在两相(固定相和流动相)间具有不同的分配系数,所以移动速度不同,经过一定时间后,可将各种色素分开。
三、材料、仪器设备和试剂
1. 绿色植物如菠菜等的叶片。
2. 研钵、漏斗、三角瓶、剪刀、滴管、康维皿、圆形滤纸(直径11cm)。
3. 试剂:95%乙醇,石英砂,碳酸钙粉,推动剂:按石油醚:丙酮:苯=10:2:1比例配制(v/v)
四、试验步骤
1. 叶绿体色素的提取
(1)取菠菜或其他植物新鲜叶片4-5片(4g左右),洗净,擦干,去掉中脉剪碎,放入研钵中。
(2)研钵中加入少量石英砂及碳酸钙粉,加2-3ml 95%乙醇,研磨至糊状,再加10ml 95%乙醇,然后以漏斗过滤之,残渣用10ml 95%乙醇冲洗,一同过滤于三角瓶中。
2. 叶绿体色素的分离
(1)将11cm的滤纸的一端剪去二侧,中间留一长约、宽约窄条。
(2)用毛细管取叶绿体色素浓溶液点于窄条上端,用电吹风吹干,如一次点样量不足可反复在色点处点样数次,使色点上有较多的叶绿体色素。
(3)在大试管中加入四氯化碳3-5ml及少许无水硫酸钠。
然后将滤纸条固定于软木塞上,插入试管内,使窄端浸入溶剂中,而色点略高于液面,滤纸条边缘不可碰到试管壁,软木塞盖紧,直立于阴暗处层析。
小时后,观察色素带分布:最上端橙黄色(胡萝卜素),其次黄色(叶黄素),再崐次蓝绿素(叶绿素a),最后是黄绿色(叶绿素b)。
(4)当展层剂前沿接近滤纸边缘时便可结束实验,此时可看到不同色素的同心圆环,各色素由内往外的顺序为:叶绿素b(黄绿色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶黄素(鲜黄色)、胡萝卜素(橙黄色),再用铅笔标出各种色素的位置和名称。
1、选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。
如菠菜叶等。
2、画滤液细线时,应以细、直、颜色浓绿为标准,重复画线时必须等上次画线干燥衙再进行,重复2-3次。
3、层析时不要让滤液细线触及层析液。
七、注意事项
1、因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂,所以研磨要快,收集的滤液要用棉塞塞住,层析时要加盖,尽量减少有机溶剂的挥发。
2、在研磨时要加少许二氧化硅,目的是为了研磨充分,有利于色素的提取;加少许碳酸钙的目的是为了防止研磨过程中,叶绿体中的色素受到破坏。
3、分离色素时,一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液,这是因为色素易溶解在层析液中,导致色素带不清晰,影响实验效果。