糖醛酸含量测定

糖醛酸含量测定——硫酸-咔唑（523 nm）
1实验材料
1.1药品：半乳糖醛酸、四硼酸钠、浓硫酸、无水乙醇、咔唑、漩涡混合器、具塞试管
1.2对照品溶液的配制
精密称取干燥至恒质量的半乳糖醛酸10mg, 用适量的蒸馏水溶解, 并定容于100mL 容量瓶中, 配
成100μg/mL 的对照品溶液。

1.3供试品溶液的配制
精密称取多糖10mg, 加入蒸馏水溶解, 并定容于10mL 容量瓶中, 配制成浓度为1mg/mL 溶液。

1.4四硼酸钠- 硫酸溶液的配制
精密称取0.478g 四硼酸钠溶解于100mL 浓硫酸中备用[3]。

1.5咔唑溶液的配制
精密称取咔唑75mg, 溶解于50mL 无水乙醇中,配制成0.15%的咔唑溶液备用。

2实验方法
2.1测定波长的选择
分别吸取对照品溶液、供试品溶液1mL, 置于10mL 具塞试管中, 在冰水浴中分别加入四硼酸钠- 硫酸溶液5mL, 用漩涡混合器混匀, 于沸水浴中加热20min, 取出后立即冷却至室温, 加0.15%咔唑溶液0.2mL, 摇匀, 在室温下保持2h, 另取1mL 蒸馏水同法操作作参比, 在波长400～800nm 扫描,
2.2标准曲线的制作
分别精密吸取对照品溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0mL 于10mL 具塞试管中, 各管加水至1mL, 分别在冰水浴中加入四硼酸钠- 硫酸溶液5mL,取出后立即冷却至室温, 加0.15%咔唑溶液0.2mL, 摇匀, 在室温下保持2h, 在最佳测定波长下测定其吸光度。

2.3样品糖醛酸含量的测定
取供试品溶液各1 mL，同时做三个重复, 以空白试剂为参比, 按上述标准曲线的测定法, 分别测定其吸光度值, 计算样品中蛋白质的含量。

蕨麻多糖（1 mg/ml）
3.1 稳定性实验
取同一供试品溶液1 mL, 按下列时间梯度测定3 次,观测其稳定性, 结果见表。

静置时间过长？
3.2 精密度实验
精密吸取100 μg/mL标准溶液0.5 mL 进行精密度试验, 连续进行6 次测定其吸光度,
3.3重现性实验
精密吸取来自同一批原料的试样, 按样品测定方法, 分别测定其吸光度, 检验该测定方法的重现性, 表明重复性较好,
3.4回收率实验
精密吸取1mg/mL 供试品溶液0.1mL, 分别加入0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL 的对照品溶液, 按样品测。