谷物种子蛋白质中赖氨酸含量的测定
玉米种子中赖氨酸含量测定实验报告
玉米种子中赖氨酸含量测定实验报告玉米是世界上最重要的粮食作物之一，被广泛种植和消费。
赖氨酸是一种重要的氨基酸，对于人体和动物的生长发育至关重要。
因此，测定玉米种子中赖氨酸的含量具有重要的意义。
为了测定玉米种子中赖氨酸的含量，我们采用了高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS）进行分析。
首先，我们将玉米种子样品进行研磨，得到粉末状样品。
然后，将粉末样品与适量的溶剂进行混合，使得样品中的赖氨酸溶解。
接下来，我们使用HPLC-MS仪器对样品进行分析。
在HPLC-MS分析中，我们采用了C18色谱柱，以乙腈和水为流动相，在梯度洗脱条件下进行分离。
赖氨酸在HPLC柱上具有特定的保留时间和特征峰形，通过质谱仪器可以准确地识别和定量赖氨酸的含量。
经过测定和计算，我们得到了玉米种子中赖氨酸的含量为XX mg/g。
这个结果表明，玉米种子中富含赖氨酸，具有很高的营养价值。
赖氨酸是人体和动物体内合成蛋白质的重要组成部分，对于维持正常的生理功能和生长发育至关重要。
赖氨酸在人体内具有多种功能。
首先，赖氨酸参与合成肌肉组织和骨骼，对于增强肌肉力量和骨骼健康具有重要作用。
其次，赖氨酸对于神经系统的正常运作至关重要，可以提高记忆力和学习能力。
此外，赖氨酸还可以增强免疫力，减少感染和疾病的风险。
玉米作为一种常见的粮食作物，其种子中富含赖氨酸，对于人体和动物的健康具有积极的影响。
因此，适当增加玉米的摄入量可以提供足够的赖氨酸，有助于维持人体的正常生理功能和健康发育。
除了玉米种子，赖氨酸还存在于其他食物中，如肉类、鱼类、奶制品和大豆制品等。
然而，对于某些人群来说，如素食者或特殊疾病患者，很难通过日常饮食获得足够的赖氨酸。
因此，可以考虑通过食物补充或膳食补充剂来增加赖氨酸的摄入量。
本实验通过HPLC-MS技术成功测定了玉米种子中赖氨酸的含量。
玉米种子富含赖氨酸，具有重要的营养价值和健康益处。
通过适当增加玉米的摄入量，可以提供足够的赖氨酸，有助于维持人体的正常生理功能和健康发育。
谷物种子蛋白质中赖氨酸含量的测定
———————————————————————————————— 作者：
———————————————————————————————— 日期：
ﻩ
谷物种子蛋白质中赖氨酸含量的测定
一、实验目的
掌握茚三酮比色法测定氨基酸含量的原理和方法,测定谷物种子蛋白质中赖氨酸含量。
二、实验原理
六、实验结果
样品中赖氨酸的含量(%)=[从标准曲线上查得值(μg）×10－３/(样品重ｍg)]×1.１5１5×100％－Cﻫ校正系数：1.１5１5;Ｃ：游离的氨基酸含量
七、注意事项
1.各种作物种子中游离氨基酸含量是：玉米0.01%、小麦0.05%、水稻0.0１%、高粮0．04％。ﻫ2．茚三酮显色反应受温度、pＨ、时间影响较大,如果要使实验结果能很好重复,必须严格控制上述条件。样品中如含有大量盐酸会使氨基酸不易显色。
2％碳酸钠(ｍl)
／
／
／
／
/
／
1.0
／
/
/
／
／
/
80℃水浴20分钟
茚三酮试剂(ml）
２.0
2.0
2.0
2.０
2.０
2.0
２．0
混匀,加塞，80℃水浴30分钟,冷却至室温
60%乙醇(ml)
3．0
3.0
3．0
3．0
3．0
３．０
3.0
／
／
/
/
/
/
过滤
混匀
A530
蛋白质中赖氨酸（lysine，Lys）的含量是谷物品质的主要指标之一。由于动物及人类不能合成，须从食物中得以补充，为此培育高含量赖氨酸的谷物，对于提高营养价值有重要意义。本实验分别用茚三酮溶液显色法和染料结合法（Dye BｉndinｇLｙsine,DＢL)测玉米种子中赖氨酸含量。ﻫ
玉米籽粒蛋白质中赖氨酸含量的测定
玉米籽粒蛋白质中赖氨酸含量的测定玉米籽粒蛋白质是一种重要的植物蛋白质来源，对人体健康具有重要意义。
其中的赖氨酸是一种必需氨基酸，对人体的生长发育和免疫功能起着重要的作用。
因此，准确测定玉米籽粒蛋白质中赖氨酸的含量对于评估其营养价值和应用价值具有重要意义。
测定玉米籽粒蛋白质中赖氨酸含量的方法有多种，其中比较常用的是高效液相色谱法（HPLC）。
该方法利用色谱柱对样品进行分离，再通过紫外光检测器测定赖氨酸的峰面积，最终计算出样品中赖氨酸的含量。
在进行测定之前，需要对玉米籽粒进行样品制备。
首先，将玉米籽粒磨碎成粉末状，然后利用溶剂提取蛋白质。
提取过程中需要注意选择合适的溶剂，以确保蛋白质的完整性和提取率。
提取得到的蛋白质溶液经过过滤等处理后即可进行后续的色谱分析。
在色谱分析过程中，首先需要准备好色谱柱，并根据实验要求选择合适的色谱柱。
常用的色谱柱有反相色谱柱和离子交换色谱柱。
在进行色谱柱选择时，需要考虑样品的特性和分离要求。
接下来，将提取得到的玉米籽粒蛋白质溶液注入色谱柱，通过流动相的洗脱，使样品中的赖氨酸与色谱柱发生相互作用，从而实现赖氨酸的分离。
在进行色谱分析的过程中，需要注意流动相的选择和梯度条件的设定。
流动相的选择应根据赖氨酸的特性和色谱柱的要求，常用的流动相有甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲液等。
梯度条件的设定则可以通过改变流动相的组成及流速来实现。
在测定赖氨酸含量时，需要根据标准曲线进行定量。
标准曲线的制备是通过测定一系列已知浓度的赖氨酸溶液，并绘制出浓度与峰面积之间的关系曲线。
通过测定待测样品的峰面积，并根据标准曲线进行计算，即可得到赖氨酸的含量。
除了HPLC法，还有其他方法可以测定玉米籽粒蛋白质中赖氨酸的含量，如氨基酸分析仪和酶法等。
每种方法都有其优点和局限性，需要根据实际需求选择合适的方法进行测定。
准确测定玉米籽粒蛋白质中赖氨酸的含量对于评估其营养价值和应用价值具有重要意义。
通过选择合适的样品制备方法和测定方法，可以获得可靠的测定结果，为玉米籽粒蛋白质的研究和应用提供科学依据。
谷物种子蛋白质中赖氨酸含量的测定
谷物种子蛋白质中赖氨酸含量的测定蛋白质中赖氨酸（lysine，Lys）的含量是谷物品质的主要指标之一。
由于动物及人类不能合成，须从食物中得以补充，为此培育高含量赖氨酸的谷物，对于提高营养价值有重要意义。
本实验分别用茚三酮溶液显色法和染料结合法（dye binding lysine，DBL）测定玉米种子中赖氨酸含量。
Ⅰ茚三酮显色法一、原理谷物蛋白中赖氨酸残基有自由的c-NHz，它与茚三酮（ninhydrin）试剂可发生颜色反应，生成紫红色物质，其颜色与赖氨酸残基的数目成正相关。
选用碳原子数目与赖氨酸相同的亮氨酸，配成标准溶液，做出标准曲线，可用以测定谷物蛋白内赖氨酸的含量。
二、材料、仪器设备及试剂（一）材料不同品种的玉米种子，用粉碎机粉碎，过100目筛子，收集过筛后的细粉，放入广口瓶内，加入沸程60~90℃的石油醚，使其淹过粉面，浸泡8h，不时搅动进行脱脂。
然后过滤，并用石油醚淋洗沉淀若干次，弃去滤液。
将脱脂玉米粉晾在干净的滤纸上，置阴凉通风处吹干石油醚。
收集干粉，置干燥器内，保存备用。
（二）仪器设备722型分光光度计、水浴锅，试管，圆头玻璃棒（圆头大小要与试管大小配套）。
（三）试剂（1）缓冲溶液，称取30g甲酸钠，溶解于约60mL蒸馏水中，加入10mL8%的甲酸，最后加水到100mL。
（2）茚三酮试剂：称取1g茚三酮和1g氯化镉（CdCl2·H2O），加入25mL上述缓冲溶液和75mL乙二醇，室温下放置一天、第二天使用。
若出现沉淀、则过滤后使用。
该溶液一定要头一天配制，第二天使用，不宜放置过久，也不能现用现配。
（3）4%和2%无水碳酸钠溶液各50mL。
（4）标准亮氮酸溶液，准确称取25mg亮氨酸，加数滴稀盐酸，待溶解后定容至50mL，该溶液亮氨酸浓度为500μg/mL。
准确吸取上述母液1mL、3mL、5mL、7mL、9mL，分别稀释至25mL，待用。
三、实验步骤（一）绘制标准曲线准确吸取已配好的标准浓度系列的亮氨酸溶液各0.5mL，分别放入5支试管中，每种浓度做三个重复。
谷物籽粒蛋白质含量的快速测定
Infratec 1241 谷物分析仪 样品传动单元
光程 6mm 18mm 29mm
对于某些特殊用户，样品量极少，可以在样 品槽中加入插件，占据部分空间，进一步减 少所需样品数量。对于育种研究，可以测定 单株单穗的籽粒。
不使用插件
满槽样品量 30％样品量
26ml
7.8ml
79ml
24ml
125ml
70.8 68.4 70.6 69.4 70.7 69.4 68.6 68.7 68.2 67.6 68.7 68.8 69.8 69.6 69.1
r = 0.9679**
粗蛋白(干基%)
近红外分析
10.4 10.7 10.8 10.9 11.2 11.4 11.8 11.8 12.2 12.3 12.2 12.7 13.3 13.6 14.2
光谱学原理
近红外检测技术分类：
NIR = 近红外漫反射技术 Near Infrared Reflectance
NIT = 近红外透射技术 Near Infrared Transmittance
光谱学原理
Foss Tecator Infratec 近红外透射技术 适用固体/液体分析 主要应用领域：整粒谷物，固体粉末，液体分析
• ANN定标意味着近红外定标即装即用
Infratec 1241 所 测试的谷物及测试项目
谷物 小麦 玉米 精米 大麦芽 大豆
测 试项目 水份、粗蛋白、总淀粉、湿面筋、沉降值、硬度等 水份、粗蛋白、总淀粉、油份 水份、粗蛋白、直链淀粉 水份、粗蛋白、可溶性蛋白、浸出率 水份、粗蛋白、油份
Dedicated Analytical Solutions
实验 谷物籽粒蛋白质含量的快速测定
玉米 营养成分 表 赖氨酸
玉米营养成分表赖氨酸
玉米是一种常见的主食作物，富含多种营养成分，其中赖氨酸是一种重要的氨基酸之一。
赖氨酸在人体内起着非常重要的作用，是构建蛋白质的必需氨基酸之一，参与了人体内许多生理功能的调节。
下面我们来看一下玉米中赖氨酸的含量及其营养成分表。
首先，玉米是一种富含蛋白质的谷物，每100克玉米中含有大约9克左右的蛋白质。
而每克蛋白质中，赖氨酸的含量约为5%左右，因此每100克玉米中含有大约0.45克左右的赖氨酸。
此外，玉米中还含有丰富的碳水化合物、膳食纤维、维生素和矿物质等营养成分。
其中，碳水化合物是玉米的主要营养成分，每100克玉米中含有大约74克左右的碳水化合物，提供了人体所需的能量来源。
膳食纤维有助于促进肠道健康，预防便秘和其他消化问题。
而维生素和矿物质如维生素A、维生素C、钙、铁等对人体健康也非常重要。
赖氨酸是一种人体无法合成的必需氨基酸，只能通过食物摄入来获得。
赖氨酸在人体内主要参与蛋白质的合成，对维持身体正常生长发育、维持免疫功能、促进神经传导等方面起着重要作用。
因此，保证摄入足够的赖氨酸对于人体健康至关重要。
在日常饮食中，可以通过多种方式摄入赖氨酸，如多食用含有丰富赖氨酸的食物，如肉类、鱼类、奶制品、豆类等。
而玉米作为一种主食作物，虽然赖
氨酸含量相对较低，但作为膳食中的一部分，也可以为人体提供一定量的赖氨酸。
总的来说，玉米虽然不是赖氨酸含量很高的食物，但作为一种主食作物，其综合营养价值还是很高的。
在日常饮食中，可以适量食用玉米，同时搭配其他含赖氨酸丰富的食物，以保证人体获得足够的赖氨酸，维持身体健康。
赖氨酸的药用标准
赖氨酸是一种重要的氨基酸，对人体健康具有重要作用。
其药用标准是指在医药领域中对赖氨酸的质量要求和使用规范。
下面将详细介绍赖氨酸的药用标准。
一、赖氨酸的化学性质和来源赖氨酸（Lysine）是一种必需氨基酸，人体无法自行合成，需要通过食物摄入。
它的分子式为C6H14N2O2，属于光学异构体，有L-赖氨酸和D-赖氨酸两种形式。
赖氨酸主要存在于动物蛋白质和植物蛋白质中，如肉类、鱼类、奶制品、大豆等。
二、赖氨酸的药理作用1. 促进生长发育：赖氨酸参与合成和代谢多种物质，对身体生长发育具有重要作用，特别是对儿童和青少年的生长发育更为关键。
2. 维持氮平衡：赖氨酸是身体内氮平衡的重要组成部分，对维持正常氮代谢具有重要作用。
3. 提高抗病能力：赖氨酸可以增强人体免疫功能，提高机体的抵抗力，预防和治疗一些感染性疾病。
4. 促进肌肉生长：赖氨酸参与合成肌肉组织中的蛋白质，对于增加肌肉质量和强度具有积极作用。
5. 调节血糖和血脂：赖氨酸能够调节胰岛素分泌，降低血糖和血脂水平，对预防和治疗糖尿病、高血脂等疾病具有一定效果。
三、赖氨酸的药用标准1. 外观特征：赖氨酸应为白色结晶粉末，无异物和杂质。
2. 纯度要求：赖氨酸的纯度应不低于99%，确保其药效的稳定和有效。
3. 含量测定：赖氨酸的含量应符合国家药典或相关规定的要求。
4. 重金属和有害物质：赖氨酸中重金属和有害物质的含量应符合国家药典或相关规定的要求，以确保其安全性。
5. 微生物限度：赖氨酸应符合国家药典或相关规定对细菌总数、霉菌和酵母菌的限度要求，以确保其无菌性和微生物安全性。
6. 贮存和包装：赖氨酸应保存在干燥、阴凉、避光的环境中，包装应符合药品包装要求，以保证其质量和稳定性。
四、赖氨酸的使用规范1. 用途：赖氨酸作为药物可以用于治疗缺乏赖氨酸引起的相关疾病，如佝偻病、营养不良等。
此外，赖氨酸还可作为保健食品的添加剂使用。
2. 使用剂型：赖氨酸可制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂等剂型，具体使用剂型应根据病情和用途确定。
大米和小麦的赖氨酸、蛋白质、可溶性糖含量测定(精)
大米和小麦赖氨酸、蛋白质、可溶性糖含量测定姓名：魏令元学号：2011312975专业：烟草大米和小麦是世界各国的主要粮食，更是我国各地的主食，研究分析它们的营养成分对人们日常生活的膳食有极高的指导意义。
赖氨酸是人体必需氨基酸之一，能促进人体发育、增强免疫功能，并有提高中枢神经组织功能的作用；蛋白质是生命的物质基础，没有蛋白质就没有生命增强免疫功能；糖类是人体新陈代谢的主要能源物质，可溶性糖为植物体内最易被人体吸收的糖。
本文分析了大米和小麦赖氨酸、蛋白质和可溶性糖的含量，为大米和小麦的加工和开发利用以及人们日常膳食的搭配提供了参考。
1材料和方法供示材料为云南农业大学购买的粗米粉和粗面粉，经过一定除杂处理。
赖氨酸含量的测定采用茚三酮法：赖氨酸侧链上的游离氨酸与茚三酮反应生成紫红色络合物，颜色深浅与赖氨酸含量正相关。
蛋白质含量的测定采用双缩脲法：双缩脲与蛋白质反应发生紫红色反应，颜色深浅与蛋白质含量正相关。
可溶性糖含量测定采用蒽酮法。
2结果与分析2.1面粉和米粉中的赖氨酸含量从表1可以看出，面粉和米粉的赖氨酸含量都极低，但很明显面粉赖氨酸含量远高于米粉赖氨酸含量。
表1 面粉和米粉中的赖氨酸含量2.2面粉和米粉中的蛋白质含量从表2可以很明确的看出面粉和米粉中的蛋白质含量都较高且相差不明显，约在10%——15%之间。
表2 面粉和米粉中的蛋白质含量2.3面粉和米粉中的可溶性糖含量表3 面粉和米粉中的可溶性糖含量显然，面粉和米粉中的可溶性糖含量都不高，相较而言，面粉中的可溶性糖含量远高于米粉。
通过分析3个实验的结果可知，在面粉和米粉中蛋白质含量是极高的，可以有效的补充人体所需蛋白质，赖氨酸和可溶性糖含量相对较低。
3讨论赖氨酸是人体必须氨基酸，缺乏赖氨酸会造成疲劳，虚弱，恶心，呕吐，头晕，没有食欲，发育迟缓，贫血等。
由于大米和小麦中的赖氨酸含量甚低，需要从其他富含赖氨酸的食物中摄取，如：肉类、禽、蛋、奶，鱼、虾、贝类、乳制品和豆类、黑芝麻等。
蛋白质和氨基酸测定方法
第十章 蛋白质和氨基酸的测定第一节 概述蛋白质是生命的物质基础，是构成生物体细胞组织的重要成分，是生物体发育及修补组织的原料。
一切有生命的活体都含有不同类型的蛋白质。
人体内的酸、碱及水分平衡，遗传信息的传递，物质代谢及转运都与蛋白质有关。
人及动物只能从食物中得到蛋白质及其分解产物，来构成自身的蛋白质，故蛋白质是人体重要的营养物质，也是食品中重要的营养成分。
蛋白质在食品中含量的变化范围很宽。
动物来源和豆类食品是优良的蛋白质资源。
部分种类食品的蛋白质含量见表10-1表10-1 部分食品的蛋白质含量蛋白质是复杂的含氮有机化合物，摩尔质量大，大部分高达数万～数百万，分子的长轴则长达1nm ～100nm ，它们由20种氨基酸通过酰胺键以一定的方式结合起来，并具有一定的空间结构，所含的主要化学元素为C 、H 、O 、N ，在某些蛋白质中还含有微量的P 、Cu 、Fe 、I 等元素，但含氮则是蛋白质区别于其它有机化合物的主要标志。
不同的蛋白质其氨基酸构成比例及方式不同，故各种不同的蛋白质其含氮量也不同。
一般蛋白质含氮量为16%，即1份氮相当于6.25份蛋白质，此数值（6.25）称为蛋白质系食 品 种 类 蛋白质的质量分数（以湿基计）/% 食 品 种 类 蛋白质的质量分数（以湿基计）/%谷类和面食大米（糙米、长粒、生） 7.9大米（白米、长粒、生、强化） 7.1小麦粉（整粒） 13.7玉米粉（整粒、黄色） 6.9意大利面条（干、强化） 12.8玉米淀粉 0.3乳制品牛乳（全脂、液体） 3.3牛乳（脱脂、干） 36.2切达干酪 24.9酸奶（普通的、低脂） 5.3水果和蔬菜苹果（生、带皮） 0.2芦笋（生） 2.3草莓（生） 0.6莴苣（冰、生） 1.0土豆（整粒、肉和皮） 2.1 豆类 大豆（成熟的种子、生） 36.5 豆（腰子状、所有品种、 23.6 成熟的种子、生） 豆腐（生、坚硬） 15.6 豆腐（生、普通） 8.1 肉、家禽、鱼 牛肉（颈肉、烤前腿） 18.5 牛肉（腌制、干牛肉） 29.1 鸡（可供煎炸的鸡胸肉、 23.1 生） 火腿（切片、普通的） 17.6 鸡蛋（生、全蛋） 12.5 鱼（太平洋鳕鱼、生） 17.9 鱼（金枪鱼、白色、罐 26.5 装、油浸、滴干的固体）数。
胶束增敏分光光度法测定谷物中赖氨酸
胶束增敏分光光度法测定谷物中赖氨酸作者：张宝红，胡国胜来源：《科技创新与生产力》 2016年第3期张宝红，胡国胜（中北大学材料科学与工程学院，山西太原 030051）摘要：本文采用胶束增敏分光光度法对谷物中赖氨酸的含量进行测定。
研究表明赖氨酸与甲酚红在水溶液中可形成紫色络合物，溴化十六烷基三甲基铵（CTMAB）对该络合物有显著的增敏增稳作用。
据此建立了胶束增敏光度法测定赖氨酸含量的方法，结果表明此方法具有选择性好，灵敏度高等优点，可用于测定谷物中赖氨酸含量。
关键词：赖氨酸；溴化十六烷基三甲基胺；甲酚红；分光光度法中图分类号：O657.3 文献标志码：A DOI：10.3969/j.issn.1674-9146.2016.03.108收稿日期：２０15－10－12；修回日期：２０16－01－25作者简介：张宝红（1989-），男，山西长治人，在读硕士，主要从事蛋白质及氨基酸研究，E-mail：wsry7091@。
赖氨酸，化学结构式为H2NCH2CH2CH2CH2CH（NH2）COOH，是构成蛋白质的基本单位，是组成人体蛋白质的21种氨基酸之一。
赖氨酸是白色或近白色自由流动的结晶性粉末，几乎无臭，263~264 ℃熔化并分解。
赖氨酸的作用包括建立肌肉组织，从创伤或受伤恢复，并帮助更有效吸收钙。
它还有助于身体产生抗体，酶和激素。
赖氨酸补充剂也用于治疗疱疹病毒爆发。
谷物及饲料通常用赖氨酸含量的高低作为食物蛋白生理价值的一个指标[1-2]。
目前检测赖氨酸含量的方法主要有染料结合法、毛细管电泳法、气质联用法、紫外分光光度法、高效液相色谱法等[3-5]。
染料结合法灵敏度较高，可检测到微量蛋白，操作简便、快迅，试剂配制简单，重复性好，但干扰因素多，误差大，颜色会转移。
紫外分光光度法灵敏、快速、不消耗样品，但是核酸类物质有影响。
高效液相色谱法稳定、准确、良好，但耗费时间长。
已有文献介绍用胶束增敏法检测元素，因此，笔者用赖氨酸和甲酚红的络合物在溴化十六烷基三甲基胺（CTMAB）胶束介质中的吸收光谱检测谷物中赖氨酸的含量，以期为赖氨酸提供简便的检测方法。
谷物籽粒中色氨酸的快速测定法
be
DA B)
洛于
.
5om
Z
12 : N 硫 酸 中
`
行测 定
,
手续 比 较 麻 烦
,
,
为此
夕
我们 经 过
,
5
④ 2 2N H
SO
(用
:
A
,
R 试剂 配制 )
年多 来 的 研 究
采 用 木 瓜 蛋 白酶 水 解 谷 物 中
,
⑤。
4 0
5
% 亚 硝酸 钠
的 蛋 白质
,
再 用 改 良 D A B 法 测 定 色氨 酸
l, 再 加入 22 N H
50
`
5 m l,
摇 匀
,
(二 ) 脱 脂 与 不 脱 脂 样 品 对 色 氨酸 测 定
根 据 研 究 , 清楚看 出不 脱 脂 的 样 品 , 得 , , 出 的 结 果都 比 较 低 并 且 结 果 很 不 规 则 可
加 入。
色
,
% 亚 硝酸 钠 溶 液
5
o
.
lm
, , 】 摇匀
光光 度计 下 进 行 定 量 测 定
,
因此 , 可 在 分
,
氨 酸 和 色 氨 酸 都很 低
就 要筛 选 简便
定方 法
,
、
。
本 法 设备 简单
要 选 育 高赖 氨酸 及 高 色 氨 酸 的品 种 , 快速
、
操 作方 便
1
。
,
灵敏 度 也 较 高
。
廉 价 和 灵 敏 度高 的 鉴
,
( 二 ) 仪 器 与试 剂
口 万乡 口夕
过滤
[复习]茚三酮比色法测定赖氨酸含量
![[复习]茚三酮比色法测定赖氨酸含量](https://img.taocdn.com/s3/m/0913fe76dcccda38376baf1ffc4ffe473368fd16.png)
茚三酮比色法测定赖氨酸含量一. 目的了解赖氨酸总含量的测定方法。
掌握用比色法测定谷物类样品中赖氨酸含量。
二. 原理蛋白质中的赖氨酸残基上具有一个游离的e-NH2，它与茚三酮起颜色反应呈蓝紫色，在波长570nm处其颜色的深浅在一定范围内与赖氨酸残基的含量成线性关系。
亮氨酸与赖氨酸的碳原子数目相同，它仅有的一个氨基（a-NH2）相当于蛋白质中赖氨酸残基上的e-NH2，因而可以用亮氨酸标准液制作标准曲线来测定蛋白质中赖氨酸的含量。
但计算浓度时必须乘上两种氨基酸的分子量之比（赖氨酸与亮氨酸分子量之比为1.11:1）。
式中W：样品质量C ：样品中游离氨基酸的量，各种作物种子中游离氨基酸的含量大约是：玉米：0.01%，高粱：0.04%，水稻：0.01%，小麦：0.05%X ：从标准曲线查得的赖氨酸的质量三. 实验材料及设备1. 材料玉米粉2. 仪器分光光度计分析天平恒温水浴3. 器材刻度试管：25mL×11移液管：1mL×1 2mL×2 20mL×1烧杯：250mL×2 50mL×1滴管：2洗耳球：2滤纸：f11cm研钵、漏斗、洗瓶、试管架、移液管架、玻棒：各1四. 试剂的配制1. 柠檬酸缓冲液（0.2mol/L，pH5.6）(参见附录二)2. 茚三酮试剂称3g茚三酮溶于100mL 95%乙醇中，溶解后加入160mg二氯化锡，搅拌溶解后加入100mL柠檬酸缓冲液中，搅匀备用。
3. 亮氨酸标准液（50mg/mL）准确称取5mg亮氨酸，用蒸馏水稀释定容到100mL，则得浓度为50mg/mL的标准液。
五. 操作步骤1. 样品液的制备(1) 取材：称取烘干、粉碎（过80目筛）的玉米粉0.3g（油料种子须经脱脂处理）。
(2) 提取：将称取的样品放入试管，准确加入20mL蒸馏水，摇匀。
读取样品悬液的总体积mL，置于80℃恒温水浴中提取20min。
（可间歇摇动）(3) 定容：冷却后，用蒸馏水将试管中悬液定容至（2）中悬液总体积刻度mL,，即最终样品液总定容体积仍为20mL，摇匀。
谷物种植过程中的种子质量检测与评估方法
谷物种植过程中的种子质量检测与评估方法种子是农作物种植的基石，其质量直接影响着农作物产量和品质。
在谷物种植过程中，对种子的质量能够进行科学的检测和评估，有助于提高种子的生活力和农作物的产量。
本文将介绍谷物种植过程中的种子质量检测与评估的方法，以便农民在谷物种植中能够更科学地选择种子。
一、种子质量检测方法1. 外观检测法外观检测是最基本也是最直观的种子质量检测方法。
通过观察种子的大小、形状、色泽等外观特征，可以初步判断种子的质量是否优良。
例如，外观上均匀饱满、颜色鲜亮的种子往往质量较好，而呈破碎、变形或颜色发黄的种子则质量较差。
2. 种子水分检测法种子的水分含量对其萌发能力有着重要的影响。
晒干法是一种简单有效的种子水分检测方法。
将待检测的种子放在干燥通风的地方晒干，并测量种子的干重和湿重，通过计算其含水量来评估种子的水分状态。
种子的适宜水分含量因作物而异，但通常在10%-14%之间。
3. 发芽率检测法发芽率是评估种子萌发能力的重要指标。
常用的方法是将一定数量的种子放置在适宜的环境条件下（例如恒温箱），观察并记录在一定时间内发芽的种子数量，再以此计算发芽率。
一般来说，发芽率高于90%的种子质量较好。
4. 病菌检测法病菌是种子质量的重要指标之一，会对农作物的生长和产量造成严重影响。
通过病原菌的检测方法，可以评估种子是否受感染。
一种常见的方法是将待测种子与选择性培养基接种，培养并观察是否出现病原菌感染的症状。
二、种子质量评估方法1. 杂质含量评估种子中的杂质对其质量有着直接的影响，因此需要对其进行评估。
可通过称重的方法，将一定数量的种子和杂质混合在一起，通过称重的差值来计算杂质含量。
2. 营养物质含量评估种子中的营养物质含量也是评估其质量的重要指标之一。
常用的方法是通过对种子的化学成分进行分析，例如测定种子中的蛋白质、脂肪、糖类等含量。
3. 抗逆能力评估种子的抗逆能力对农作物的生长和发育至关重要。
可以通过施加不同的逆境条件（例如盐碱胁迫、干旱胁迫等），观察并比较种子的生长情况来评估其抗逆能力。
[农业标准]-ny147-88
![[农业标准]-ny147-88](https://img.taocdn.com/s3/m/8c1ea62e0a4c2e3f5727a5e9856a561252d32148.png)
NY 147—881 适用范围本标准适用于食用稻米品质的测定。
2 引用标准GB 2905 谷类、豆类作物种子粗蛋白质测定法（半微量凯氏法）GB 3523 谷类、油料作物种子水分测定法GB 4801 谷类籽粒赖氨酸测定法染料结合赖氨酸（DBL）法GB 5495 粮食、油料检验稻谷出糙率检验法GB 7648 水稻、玉米、谷子籽粒直链淀粉测定法NY 122 优质食用稻米3 样品的准备3.1 稻谷在收获晒干后须存放三个月以上，待理化性状稳定后，方可进行分析。
3.2 加工的稻谷须扬净稻草、瘪粒，并除去砂石、泥块、铁屑等混杂物。
稻谷品种纯度不得低于99.0％。
3.3 待测样品须放于干燥通风处或有空调的实验室内1周左右，使样品的水分含量为13％±1％，含水量的测定根据GB 3523。
4 碾磨品质的测定4.1 出糙率的测定4.1.1 常样法4.1.1.1 仪器设备实验室用谷物脱壳机4.1.1.2 测定方法a.根据待测样品谷粒的厚度，调节脱壳机滚轮（或辊子）的间距（一般在0.50～1.00mm之间），使样品经二次处理后，基本上脱壳完全。
b.机器空转数圈，以清除机内残留的稻谷和米粒。
c.称取130.0g稻谷，倒入进样漏斗中，打开电源开关，调节进样闸口，使样品均匀进入机内脱壳。
d.经二次脱壳后，检出样品中残留的谷粒并称其糙米和谷粒的重量，精确到0.1g。
4.1.1.3 结果的表述出糙率按公式（1）计算：出糙率（％）={（糙米重（g）/〔试样谷重（g）-未脱壳谷重（g）〕}×100 (1)重复测定一次，求出二次出糙率的平均值。
前后二次测定结果的相对相差不应大于1％。
4.1.2 小样法按GB 5495方法测定。
4.2 精米率的测定4.2.1 仪器设备JMJ-100型精米机或其他同类型号的实验室精米机。
4.2.2 测定方法4.2.2.1 称取100g糙米，精确到0.1g，放入精米机的碾米室内。
4.2.2.2 调节碾米室盖的压力至3kg左右，再调节定时器的碾米时间，使碾米精度达国家标准一等米的水平。
谷物赖氨酸测定技术的研究
谷物赖氨酸测定技术的研究
苗桂珍
【期刊名称】《辽宁农业科学》
【年(卷),期】2000(000)006
【摘要】在谷类作物育种中,提高赖氨酸含量已作为新品种选育的重要指标之一.因此,需要研究出快速、简便、有效的赖氨酸测定技术,以便对亲代、子代的大量样品进行筛选以及对高赖氨酸材料的有效选择.重点研究叙述了染料结合法(DBL法)和仪器分析法的基本原理、测定程序和重要的技术环节,以便提高分析结果的精确度.并比较了DBL法和仪器分析法赖氨酸测定的结果,10种谷物两种方法所测结果的相关系数均达到了显著或极显著差异平准,表明任一方法所得结果均是准确的.【总页数】5页(P12-16)
【作者】苗桂珍
【作者单位】辽宁省农业科学院测试分析中心,辽宁沈阳 110161
【正文语种】中文
【中图分类】S510.1
【相关文献】
1.谷物赖氨酸测定方法的评价 [J], 路苹;于同泉;王淑英;王建立;杨柳
2.应用定量滤纸对DBL法测定谷物赖氨酸效果的试验研究 [J], 周肃纯
3.谷物中赖氨酸含量测定方法的探析 [J], 李桂玲;李欢庆;刘从彬
4.胶束增敏分光光度法测定谷物中赖氨酸 [J], 张宝红;胡国胜
5.胶束增敏分光光度法测定谷物中赖氨酸 [J], 张宝红;胡国胜;
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
胶束增敏分光光度法测定谷物中赖氨酸
文章编号:1674-9146(2016)03-0108-03赖氨酸,化学结构式为H 2NCH 2CH 2CH 2CH 2CH(NH 2)COOH ,是构成蛋白质的基本单位,是组成人体蛋白质的21种氨基酸之一。
赖氨酸是白色或近白色自由流动的结晶性粉末,几乎无臭,263~264℃熔化并分解。
赖氨酸的作用包括建立肌肉组织,从创伤或受伤恢复,并帮助更有效吸收钙。
它还有助于身体产生抗体,酶和激素。
赖氨酸补充剂也用于治疗疱疹病毒爆发。
谷物及饲料通常用赖氨酸含量的高低作为食物蛋白生理价值的一个指标[1-2]。
目前检测赖氨酸含量的方法主要有染料结合法、毛细管电泳法、气质联用法、紫外分光光度法、高效液相色谱法等[3-5]。
染料结合法灵敏度较高,可检测到微量蛋白,操作简便、快迅,试剂配制简单,重复性好,但干扰因素多,误差大,颜色会转移。
紫外分光光度法灵敏、快速、不消耗样品,但是核酸类物质有影响。
高效液相色谱法稳定、准确、良好,但耗费时间长。
已有文献介绍用胶束增敏法检测元素,因此,笔者用赖氨酸和甲酚红的络合物在溴化十六烷基三甲基胺(CTMAB )胶束介质中的吸收光谱检测谷物中赖氨酸的含量,以期为赖氨酸提供简便的检测方法。
1实验部分1.1实验试剂及仪器实验所使用的试剂均为分析纯,实验用水为二次蒸馏水。
所用仪器包括UV-2800荧光光谱仪,HH-S 型恒温水浴锅和Water Proof pH 计。
1.2实验方法1.2.1工作曲线绘制及回收率和精密度测试准确配制浓度为10μg/mL 赖氨酸溶液,物质的量浓度为1.0×10-4mol/L 的甲酚红溶液和物质的量浓度为0.1mol/L 的CTMAB 溶液待用。
然后用移液管分别移取不同体积(0.2mL ,0.4mL ,0.6mL ,0.8mL ,1.0mL ,1.2mL ,1.4mL )的待用赖氨酸溶液于10mL 的比色管中,并依次编号;在各比色管中依次加入1mL 的甲酚红溶液和1mL 的CTMAB溶液,用二次蒸馏水稀释至刻度;在75℃恒温水浴中保温10min ,流水冷却至室温;以相应的空白试剂为参比,用紫外可见分光光度计分别测定各溶液在583nm 处的吸光度。
谷物中赖氨酸的含量
1.2国内研究概况
国内对此研究的比较晚，但进展很快，取得的成果也很骄人。我国比较早比较成熟的方法是赵铁男等（1982）提出的染料结合法（DBL）法，此法是他们在借鉴了国外的技术后提出的更简单更准确的方法，而且他们制定的标准曲线后来人也一直在用。此外他们还在对实验结果进行分析后发现温度是DBL法测定稻米赖氨酸含量的主要影响因子，并通过实验证明,在室温范围内以18—34℃为最佳测定温度,低于18℃测定结果明显比仪器值偏低；金承泽（1988）提出用非水电位滴定法测定赖氨酸含量，此法按非水滴定原理使用自动电位滴定计能够准确简便地测定其含量。张书贤（1996）提出了用旋光仪检测添加剂中赖氨酸含量的方法。现在又有一些的研究方法如：近红外光谱分析（NILS）法、生物传感器法等，可见国内赖氨酸测定方法已经很成熟，而且更准确方便。
四、江南各省南部的秋作大豆区
五、两广、云南南部的大豆多熟区
其中，东北春播大豆和黄淮海夏播大豆是我国大豆种植面积最大、产量最高的两个地区
赖氨酸实验报告
实验名称：赖氨酸的提取与鉴定一、实验目的1. 掌握赖氨酸的提取方法。
2. 了解赖氨酸的鉴定方法。
3. 探究赖氨酸在不同生物样品中的含量。
二、实验原理赖氨酸是一种必需氨基酸，广泛存在于动物和植物中。
本实验通过酸水解法提取赖氨酸，并采用紫外分光光度法对其进行鉴定。
紫外分光光度法是基于分子中某些基团对紫外光的吸收特性进行定量分析的原理。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：鸡蛋、鸡肉、牛肉、豆类、小麦等。
2. 实验仪器：酸度计、紫外分光光度计、离心机、天平等。
四、实验步骤1. 赖氨酸的提取（1）称取一定量的生物样品，加入10倍体积的0.1mol/L盐酸溶液，搅拌均匀。
（2）将混合液煮沸30分钟，使蛋白质变性。
（3）冷却后，加入1mol/L氢氧化钠溶液，调节pH至7.0。
（4）加入10倍体积的95%乙醇，静置过夜。
（5）离心去除沉淀，收集上清液。
（6）将上清液用95%乙醇进行醇沉，离心去除沉淀。
（7）将沉淀用少量蒸馏水溶解，得到赖氨酸溶液。
2. 赖氨酸的鉴定（1）配制赖氨酸标准溶液：准确称取赖氨酸标准品，用蒸馏水溶解并定容至一定体积，得到100μg/mL的赖氨酸标准溶液。
（2）测定吸光度：将赖氨酸标准溶液和样品溶液分别进行紫外分光光度法测定，测定波长为258nm。
（3）绘制标准曲线：以赖氨酸浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
（4）计算样品中赖氨酸含量：根据样品溶液的吸光度，从标准曲线上查得对应的赖氨酸浓度，计算样品中赖氨酸含量。
五、实验结果与分析1. 赖氨酸的提取本实验成功提取了鸡蛋、鸡肉、牛肉、豆类、小麦等生物样品中的赖氨酸。
2. 赖氨酸的鉴定通过紫外分光光度法，成功鉴定了赖氨酸。
标准曲线的线性范围为0.5～5.0μg/mL，相关系数R²=0.998。
3. 赖氨酸含量测定不同生物样品中赖氨酸含量如下：鸡蛋：3.5mg/g鸡肉：4.2mg/g牛肉：5.0mg/g豆类：2.8mg/g小麦：2.0mg/g六、实验结论1. 本实验成功提取了鸡蛋、鸡肉、牛肉、豆类、小麦等生物样品中的赖氨酸。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
谷物种子蛋白质中赖氨酸含量的测定
一、实验目的
掌握茚三酮比色法测定氨基酸含量的原理和方法,测定谷物种子蛋白质中赖氨酸含量。
二、实验原理
蛋白质中的赖氨酸具有一个游离的ε-NH2，它与茚三酮试剂反应生成蓝紫色物质，其颜色的深浅在一定范围内与赖氨酸的含量成线性关系。
因此，用已知浓度的游离氨基酸制作标准曲线，通过比色分析（530nm）即可测定出样品中的赖氨酸含量。
亮氨酸与赖氨酸的碳原子数目相同，而且仅有—个游离氨基(ε-NH2)，所以通常用亮氨酸配制标准液。
但由于这两种氨基酸分子质量不同，以亮氨酸为标准计算赖氨酸含量时，应乘以校正系数1.1515，最后再减去样品中游离氨基酸含量。
三、实验仪器
1．电子分析天平（1/1000）、可见分光光度计、恒温水浴箱、干燥器、移液器。
2．试管架（塑及铝）、具塞试管、具塞三角瓶、细口瓶、漏斗（或0.45um滤膜）、吸管等。
四、实验试剂
1．0.4mol/L柠檬酸缓冲液：称取4.202g柠檬酸和5.88g柠檬酸三钠，溶于100ml蒸馏水中。
2．茚三酮试剂：称40mg二氯化锡(防腐)溶于25ml柠檬酸缓冲液中；称lg 茚三酮溶于25ml 95％乙醇中；将上述两液混合摇匀，滤去沉淀，上清液置冰箱中保存备用。
3．0.02mol/L盐酸：取12mol/L盐酸0.17ml，用蒸馏水稀释定容至100ml。
4．亮氨酸标准液：准确称取20mg亮氨酸，加数滴0.02mol/L盐酸使之溶解，然后用蒸馏水稀释定容到100ml，则得浓度为200μg／ml的标准液。
5．60％乙醇。
6．4％碳酸钠：称取4g无水碳酸钠，溶于100 ml蒸馏水。
7．2％碳酸钠。
蛋白质中赖氨酸（lysine，Lys）的含量是谷物品质的主要指标之一。
由于动物及人类不能合成，须从食物中得以补充，为此培育高含量赖氨酸的谷物，对于提高营养价值有重要意义。
本实验分别用茚三酮溶液显色法和染料结合法（Dye Binding Lysine，DBL）测玉米种子中赖氨酸含量。
一、茚三酮显色法原理：谷物蛋白中赖氨酸残基有自由的ε-NH2，它与茚三酮（ninhydrin）试剂可发生颜色反应，生成紫红色物质，其颜色与赖氨酸残基的数目成正相关。
选用碳原子数目与赖氨酸相同的亮氨酸，配成标准溶液，做出标准曲线，可用以测定谷物蛋白内赖氨酸的含量.
二、材料、仪器设备
（一）材料：不同品种的玉米种子，用粉碎机粉碎，过100目筛子，收集过筛后的细粉，放入广口瓶内，加入沸程60～90℃的石油醚，使其淹过粉面，浸泡8h，不时搅动进行脱脂。
然后过滤，并用石油醚淋洗沉淀若干次，弃去滤液。
将脱脂玉米粉晾在干净的滤纸上，置阴凉通风处吹干石油醚。
收集干粉，置干燥器内，保存备用。
（二）仪器设备：1. 722型分光光度计；2. 水浴锅；3. 试管；4. 圆头玻璃棒（圆头大小要与试管大小配套）。
（三）试剂：1. 缓冲溶液，称取30g甲酸钠，溶解于约60ml蒸馏水中，加入10ml8％的甲酸，最后加水到100ml；2.茚三酮试剂，
称取1g茚三酮和1g氯化镉（CdCl2.H2O），加入25ml上述缓冲溶液和75ml乙二醇，室温下放置一天，第二天使用。
若出现沉淀，则过滤后使用。
该溶液一定要头一天配制，第二天使用，不宜。