最新2.2.1动物细胞培养和核移植技术(第2课时))课件PPT
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
b.细胞水平上： 指一个单一的细胞分裂所形成的细胞群体。
c.个体水平上： 指基因型完全相同的两个或一个群体。
2、克隆动物能否用类似植物组织培 养的方法获得？为什么？
目前不能。 因为动物细胞的全能性随着分化程度 的提高逐渐受到限制。目前，用动物体细胞 克隆的动物，实际上是通过核移植来实现的。
那么，什么是动物核移植呢？
葡萄糖、动物血清
培养基特有成分 蔗糖、植物激素 促生长因子
培养结果
一般为植物体 细胞数目增多
培养目的
快速繁殖、培育 脱毒作物等
获得细胞 或细胞产物
复习：
1、动物细胞工程常用的技术手段有哪些？
2、叙述动物细胞培养的过程。 3、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官
或组织做动物细胞培养材料？ 4、为什么培养前要将组织细胞分散成单个
培养器皿
实验设备
超净工 作台
倒置显微镜 细胞培养箱
动物细胞特点？
• 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的 提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄， 这是指整体细胞而言。
• 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含 有保持物种遗传性所需的全套基因， 而且并没有因细胞分化而丢失基因， 因此高度分化细胞的细胞核仍具有全 能性
2.2.1动物细胞培养和 核移植技术(第2课时))
植物 植物体细胞杂交
细胞
主 工程 植物组织培养
要 技术
动物细胞培养 基础
技 术
动物 细胞
核移植 动物细胞融合
工程
技术 单克隆抗体技术
胚胎移植
1. 动物细胞培养对培养的材料有要求吗？ 通常取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
因为其分化程度低、增殖能力强，更容易培养。 2. 为什么在培养前要将组织分散成单个细胞？ 分散后能与培养液充分接触，更易进行物质交换。 3. 用胰蛋白酶处理，组织就会分散成单个细胞，说明了什么？
克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但核外还 有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞。
（三）体细胞核移植技术的应用前景
动物核移植
是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个 已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发 育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育 为动物个体。（克隆动物）
动物核移植
胚胎细胞核移植
体细胞核移植（更难）
哪一种核移植难度更大？为什么？
体细胞核移植的过程： 去核
注核
重组细胞
动物体细胞核移植技术（过程）
1.回忆克隆羊“多莉”的培育过
程
Ａ母绵羊
Ｂ母绵羊
卵细胞
乳腺细胞
核移植
融合后的卵细胞
卵裂
早期胚胎
胚胎移植
C母绵羊子宫 妊娠 分娩
Leabharlann Baidu多莉羊
2.结合P48图2-21，叙述克隆高产奶牛的培育过程。
供体细胞培养
减数第二次分裂中期
（ MⅡ卵母细胞）
将供体细胞注入去核卵母细胞
核移植 胚胎移植
有人说它有三个 母亲，对吗？
１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前， 为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
为使核移植动物的核遗传物质全部来自有利 用价值的动物提供的细胞。 ２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代 以内的细胞，为什么？
10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 未发生突变。 3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞 供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 不是
阅读P46-47
1、生产生物制品 病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等；
2、动物基因工程离不开动物细胞的培养；
3、用于检测有毒物质及毒性；
4、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、 药理等方面的研究。
植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基 液体培养基
根据动物细胞核仍具有全能性 的特点,怎样将动物细胞的全能性 表达?
利用动物体细胞核移植技术
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1. 什么是克隆？
克隆就是无性繁殖，具体地说，是指 一个共 同的祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群 遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。 a.分子水平上： 一般指DNA克隆。
MⅡ卵母细胞细胞质中含有的物质更易支持胚胎的全 程发育，用它作受体更容易成功。
将供体细胞注入受体细胞，使克隆动物更像供体动物， 操作也方便。
思考与讨论：
3、克隆过程运用的技术手段？
动物细胞培养、动物体细胞核移植和胚胎移植
4、结论:体现细胞核的什么功能？ 高度分化的体细胞核具有全能性
讨 论：P49
说明细胞与细胞间的主要物质是蛋白质 4.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？
胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也
会消化细胞膜蛋白，因此必须控制好胰蛋白酶的处理时间。
5.人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？
保存10代以内的细胞。
因为10－50代部分细胞的细胞核型可能发生变化， 有少部分还发生突变向癌细胞方向发展。
定期更换培养液；
2、营养
葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等
动物血清、血浆
3、温度和pH
能否用胃蛋白酶
温度36.5±0.5度，pH7.2～7.4 代替胰蛋白酶？
4、气体环境
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） O2是细胞代谢所必需的。 CO2维持培养液的pH。
（四）动物细胞培养技术的应用
思考与讨论：
1、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出 操作过程的不同点？
（1）多莉克隆过程中受体细胞是去核卵细胞，高产奶 牛克隆过程中受体细胞是去核卵母细胞。
（2）多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞，而 高 产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体细胞。
2、讨论分析上述哪一种措施更科学？并说明理由？
细胞？ 5、动物细胞培养的条件。
动物细胞 培养过程：
动物胚胎或幼龄动物 的细胞、组织或器官
剪碎 胰蛋白酶
接触 抑制
单个细胞
加培养液
细胞悬浮液
细胞贴壁 →原代培养
10代细胞 （遗传物质不变）细胞株 剥离 分瓶
（遗传物质变）细胞系
动物细胞培养不能 最终培养成动物体
50代细胞 无限传代
传代培养
部分细胞“癌变”， 遗传物质改变，无 限传代
（二）动物细胞培养的概念（P44）
就是从动物机体中取出相关的组织,将它 分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基 中,让这些细胞生长和增殖。
想一想：动物细胞培养的基本原理是什么？
原理：细胞增殖
（三）动物细胞培养条件
1、无菌、无毒的环境 对培养液和培养用具进行无菌处理；
在培养液中添加一定量的抗生素;
c.个体水平上： 指基因型完全相同的两个或一个群体。
2、克隆动物能否用类似植物组织培 养的方法获得？为什么？
目前不能。 因为动物细胞的全能性随着分化程度 的提高逐渐受到限制。目前，用动物体细胞 克隆的动物，实际上是通过核移植来实现的。
那么，什么是动物核移植呢？
葡萄糖、动物血清
培养基特有成分 蔗糖、植物激素 促生长因子
培养结果
一般为植物体 细胞数目增多
培养目的
快速繁殖、培育 脱毒作物等
获得细胞 或细胞产物
复习：
1、动物细胞工程常用的技术手段有哪些？
2、叙述动物细胞培养的过程。 3、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官
或组织做动物细胞培养材料？ 4、为什么培养前要将组织细胞分散成单个
培养器皿
实验设备
超净工 作台
倒置显微镜 细胞培养箱
动物细胞特点？
• 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的 提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄， 这是指整体细胞而言。
• 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含 有保持物种遗传性所需的全套基因， 而且并没有因细胞分化而丢失基因， 因此高度分化细胞的细胞核仍具有全 能性
2.2.1动物细胞培养和 核移植技术(第2课时))
植物 植物体细胞杂交
细胞
主 工程 植物组织培养
要 技术
动物细胞培养 基础
技 术
动物 细胞
核移植 动物细胞融合
工程
技术 单克隆抗体技术
胚胎移植
1. 动物细胞培养对培养的材料有要求吗？ 通常取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
因为其分化程度低、增殖能力强，更容易培养。 2. 为什么在培养前要将组织分散成单个细胞？ 分散后能与培养液充分接触，更易进行物质交换。 3. 用胰蛋白酶处理，组织就会分散成单个细胞，说明了什么？
克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但核外还 有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞。
（三）体细胞核移植技术的应用前景
动物核移植
是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个 已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发 育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育 为动物个体。（克隆动物）
动物核移植
胚胎细胞核移植
体细胞核移植（更难）
哪一种核移植难度更大？为什么？
体细胞核移植的过程： 去核
注核
重组细胞
动物体细胞核移植技术（过程）
1.回忆克隆羊“多莉”的培育过
程
Ａ母绵羊
Ｂ母绵羊
卵细胞
乳腺细胞
核移植
融合后的卵细胞
卵裂
早期胚胎
胚胎移植
C母绵羊子宫 妊娠 分娩
Leabharlann Baidu多莉羊
2.结合P48图2-21，叙述克隆高产奶牛的培育过程。
供体细胞培养
减数第二次分裂中期
（ MⅡ卵母细胞）
将供体细胞注入去核卵母细胞
核移植 胚胎移植
有人说它有三个 母亲，对吗？
１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前， 为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
为使核移植动物的核遗传物质全部来自有利 用价值的动物提供的细胞。 ２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代 以内的细胞，为什么？
10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 未发生突变。 3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞 供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 不是
阅读P46-47
1、生产生物制品 病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等；
2、动物基因工程离不开动物细胞的培养；
3、用于检测有毒物质及毒性；
4、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、 药理等方面的研究。
植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基 液体培养基
根据动物细胞核仍具有全能性 的特点,怎样将动物细胞的全能性 表达?
利用动物体细胞核移植技术
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1. 什么是克隆？
克隆就是无性繁殖，具体地说，是指 一个共 同的祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群 遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。 a.分子水平上： 一般指DNA克隆。
MⅡ卵母细胞细胞质中含有的物质更易支持胚胎的全 程发育，用它作受体更容易成功。
将供体细胞注入受体细胞，使克隆动物更像供体动物， 操作也方便。
思考与讨论：
3、克隆过程运用的技术手段？
动物细胞培养、动物体细胞核移植和胚胎移植
4、结论:体现细胞核的什么功能？ 高度分化的体细胞核具有全能性
讨 论：P49
说明细胞与细胞间的主要物质是蛋白质 4.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？
胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也
会消化细胞膜蛋白，因此必须控制好胰蛋白酶的处理时间。
5.人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？
保存10代以内的细胞。
因为10－50代部分细胞的细胞核型可能发生变化， 有少部分还发生突变向癌细胞方向发展。
定期更换培养液；
2、营养
葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等
动物血清、血浆
3、温度和pH
能否用胃蛋白酶
温度36.5±0.5度，pH7.2～7.4 代替胰蛋白酶？
4、气体环境
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） O2是细胞代谢所必需的。 CO2维持培养液的pH。
（四）动物细胞培养技术的应用
思考与讨论：
1、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出 操作过程的不同点？
（1）多莉克隆过程中受体细胞是去核卵细胞，高产奶 牛克隆过程中受体细胞是去核卵母细胞。
（2）多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞，而 高 产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体细胞。
2、讨论分析上述哪一种措施更科学？并说明理由？
细胞？ 5、动物细胞培养的条件。
动物细胞 培养过程：
动物胚胎或幼龄动物 的细胞、组织或器官
剪碎 胰蛋白酶
接触 抑制
单个细胞
加培养液
细胞悬浮液
细胞贴壁 →原代培养
10代细胞 （遗传物质不变）细胞株 剥离 分瓶
（遗传物质变）细胞系
动物细胞培养不能 最终培养成动物体
50代细胞 无限传代
传代培养
部分细胞“癌变”， 遗传物质改变，无 限传代
（二）动物细胞培养的概念（P44）
就是从动物机体中取出相关的组织,将它 分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基 中,让这些细胞生长和增殖。
想一想：动物细胞培养的基本原理是什么？
原理：细胞增殖
（三）动物细胞培养条件
1、无菌、无毒的环境 对培养液和培养用具进行无菌处理；
在培养液中添加一定量的抗生素;