细胞工程

Ｇ41 8的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、抗性 筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。氨基糖苷类抗生 素作用机制 氨基糖苷类抗生素具有强大的杀细胞作用，主要 作用于细胞的核糖体，抑制蛋白质的合成。作用过程为： 1、氨基糖苷类分子吸附于细胞表面，造成细胞膜轻度损伤； 2、少数氨基糖苷类分子进入细胞，与核糖体结合，影响正 在进行的肽链延长过程，造成遗传密码错读，全盛异常蛋白 质； 3、异常蛋白质结合进细胞膜，导致细胞膜渗漏； 4、大量氨基糖苷类分子进入细胞，形成更多的异常蛋白质， 加重了细胞膜渗漏和药物摄入量； 5、进入菌体的氨基糖苷类分子显著超过核糖体数时，使核 糖体内进行的蛋白质合成起始阶段全部停止，此作用系不可 逆的，因此导致细菌迅速死亡。
二、 neo基因为什么能抗G来自百度文库18
Neo是对新霉素（neomycin)的抗药基因， 一般卡那霉素抗性基因编码的是新霉素磷酸转移 酶II,基因记做neo 。细胞表达该基因可以灭活氨 基糖甙类抗生素，破坏卡那霉素和新霉素（原核 生物）以及G418（geneticin）（在真核生物）。 该基因往往被克隆到表达载体，作为筛选基因。
一、G418简介
G418是一种氨基糖苷类抗生素 ,分子式为： C20H40N4O10.2H2SO4，其结构与新霉素、庆 大霉素、卡那霉素相似，在分子遗传试验中常被 用作抗性筛选。它通过影响80S核糖体功能而阻 断蛋白质合成，对原核和真核细胞都有毒性 ,包 括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原 生动物和蠕虫。是稳定转染最常用的选择试剂。 当neo基因被整合进真核细胞DNA后 ,则能启动 neo基因编码的序列转录为ｍＲＮＡ ,从而获得 抗性产物的高效表达 ,使细胞获得抗性而能在含 有Ｇ41 8的选择性培养基中生长。
新霉素磷酸转移酶基因（neomycin phosphotransfcrase gene,ntpII）,来自大肠 杆菌转座子Tn5上的a phA2基因。该基因编码 氨基糖苷-3’-磷酸转移酶（NTPII）,能使氨基糖 苷类抗生素（卡那霉素、新霉素、G418和庆 大霉素等）磷酸化二失活。NTPII使ATP分子 上的r-磷酸基转移到抗生素分子上，影响抗生 素与核糖体亚基的结合，从而使抗生素失活。