《检验仪器分析》第2章 常用移液器

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活塞正移动移液器
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活塞正移动移液 器采用外置式活 塞，活塞设计在 吸头内部，直接 与液体接触，活 塞与液体之间没 有空气段。
操作杆 尖头
活塞 （一次性） 毛细吸管 （一次性）
液体
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两种移液器的比较
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3．多通道移液器和电子移液器
多通道移液器通常为8通道 或12通道，与96孔（8×12 ）微孔板一致。 多通道移液器的使用不但 可减少实验操作人员的加 样次数，而且可提高加样 的精密度。
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三、移液器的使用方法
移液器的操作是科学试验的第一步，是一个非常 基础的试验操作，而错误的操作容易产生移液偏 差，导致实验结果不准确。
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（一）设定移液体积
从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆 时针旋转旋钮即可。 从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋 钮至超过设定体积的刻度，再回调至设定体积，这 样可以保证量取的最高精确度。
清洁并润滑O-形环和活塞 清洁吸液嘴连件 清洁并润滑活塞和吸液嘴连件 清洁吸液嘴连件和推出轴
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按钮卡住或运动不 畅 移液器堵塞，吸液 量太少 吸液嘴推出器卡住 或运动不畅
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思 考 题
移液器的概念及基本工作原理。
移液器的使用方法要点及注意事项。
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（一）设定移液体积
千万不要将旋钮旋出量程， 否则会卡住内部机械装置 而损坏移液器。
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（二）装配吸液嘴
单通道移液器，将移液端垂直插入吸头，左右微 微转动，上紧即可。
多通道移液器，将移液器的第一道对准第一个吸 头，倾斜插入，前后稍微摇动上紧，吸头插入后 略超过O型环即可
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电子移液器多为半自动加 样系统，加样重复性高， 可减少人为误差和污染， 应用范围广。
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第二节 移液器的结构、性能与使用
移液器是临床实验室中最常使用的移液器材之一 ，虽然其基本结构简单，使用方便，但对移液器 的性能要求比较严格，作为专业的检验人员应当 掌握移液器的基本结构和使用方法。
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（二）不同性质液体移液时的操作 特性和保养方法
为确保移液的准确度，建议根据具体使用情况采 用相应的清洗及保养方法，以延长移液器使用寿 命。
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移液器在不同使用情况下应采取的清洗和保养方法
液体性质 水溶液和缓 冲液 操作特性 用蒸馏水校准移液器，结果非 常准确 如果经常移取高浓度的酸/碱 液，建议偶尔用双蒸水清洗移 液器的下半支。并推荐使用带 有滤芯的吸嘴 为了避免污染，应该使用带有 滤芯的吸嘴。或者使用正向置 换方法移取 清洗和保养方法 打开移液器，用双蒸水冲洗污染部分， 可以在干燥箱中干燥，温度不超过60℃ 。给活塞涂抹少量润滑油 Eppendorf移液器使用的塑料材料和陶质 活塞都是耐酸耐碱材料（除氢氟酸）。 但是酸液/碱液的蒸汽可能会进入移液器 的下部，影响其性能。清洁方法同“水 溶液”部分 污染部分进行121℃，20分钟高压灭菌。 或将移液器下部浸入实验室常规消毒剂 中。随后用双蒸水清洗，并用如上所述 的方法进行干燥。
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二、移液器常见故障的排除
移液器的使用频率较高，同时可能存在操作人员 使用不当，易导致移液器出现故障，因此，操作 人员应当熟悉移液器常见故障，并具备排除故障
的基本能力。
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移液器的常见故障及排除
常见故障
吸液嘴内有残液
可能原因
吸液嘴不适配 吸液嘴塑料湿润性不均一 吸液嘴未装好
解决办法
使用原配吸液嘴 装紧吸液嘴 重装新吸液嘴
漏液或移液量太少
吸液嘴不适配 吸液嘴和连件间有异物 活塞或O-形环上硅油不够 O-形环与活塞未扣好或O-形环损坏 操作不当 需要校准或液体密度与水差异大 移液器被损坏
活塞被污染或有气溶胶渗透 液体渗进移液器且已干燥 吸液嘴连件和/或吸液嘴推出轴被污染
ຫໍສະໝຸດ Baidu
使用原配吸液嘴 清洁连件，重装新吸液嘴 涂上硅油 清洁并润滑O-形环和活塞或更换 O-形环 认真按规定操作 根据指导重新校准 维修
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第三节 移液器的维护与 常见故障的排除
移液器以操作简单， 准确性高等优点得到 了广泛应用，为使移 液器始终保持最佳性 能，必须定期进行维 护，并及时排除故障 。
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移液器的拆卸方法
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移液器的拆卸方法
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（一）清洁和消毒
内外部 清洁
①外壳的清洁：清洁液擦洗，双蒸水淋 洗，晾干；②内部的清洗：拆卸移液器 下半部分，按①步骤清洗后在活塞表面 涂上一层薄硅酮油脂。
无机酸/碱
具有潜在传 染性的液体
细胞 培养物
为了保证无菌，应使用 Eppendorf带有滤芯的吸嘴
参照“具有潜在传染性的液体”的清洁 方法
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移液器在不同使用情况下应采取的清洗和保养方法
液体性质 操作特性 清洗和保养方法 1．密度与水不同。因此必须调 通常对于蒸气压高的液体，任其自然挥发 节移液器。2．由于蒸汽压高和 的过程就足够了。或者将下部浸入消毒剂 湿润行为的变化，应该快速移液。 中。用双蒸水清洗，并用如上所述的干燥 3．移液结束后，拆开移液器， 方法将其干燥 让液体挥发。 为了避免污染，应该使用带 有滤芯的吸嘴。或者使用正 向置换方法 拆开移液器，将污染部分浸入复合溶液或 专用的清洁溶液，用双蒸水清洗，并用如 上所述的干燥方法将其干燥
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①常规高温高压灭菌处理：包装灭菌部 消毒灭菌 件于121℃，100kPa，灭菌20分钟，室 温下晾干，活塞涂一层薄硅酮油脂，再 处理 组装；②紫外线照射灭菌：表面消毒。 移液器下半部分拆卸下来的内外套筒， DNA污染 95℃下于清洗液中浸泡30分钟，再用蒸 的去除 馏水冲洗套筒，60℃下烘干或完全晾干 后在活塞表面涂上硅酮油脂再组装。
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一、移液器的基本结构
移液器是一种量出式量 器，移液量由一个配合 良好的活塞在活塞套内 移动的距离来确定。
移液器的基本结构主要 由显示窗、容量调节部 件、活塞、O-形环、吸 引管和吸液嘴（俗称枪 头）等部分组成
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二、移液器的性能要求
移液量能否按照实验的要求精确量取，直接关系 到检测结果的准确性和可靠性。
第二章
实验室常用移液器
主讲人：周振华
教学基本要求
掌 握（1）移液器的工作原理 （2）移液器的基本结构和性能要求 （3）移液器的使用方法
熟 悉（1）移液器的维护
（2）移液器常见故障的排除
了 解（1）移液器的种类
（2）移液器的专业校准
第二章
实验室常用移液器
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第一节 常用移液器的工作原理 第二节 移液器的基本结构、性能与使用 第三节 移液器的维护与常见故障的排除
按钮
调节器
可调移液器的容量调节指示部分在调节范围内转 动要灵活，数字指示要清晰、完整。 采用聚丙烯或性能相似材料制成，无明显弯曲， 内壁光洁、平滑，排液后没有明显液体遗留，有 相应配套的吸液嘴
吸液嘴
密合性
在0.04MPa的压力下，5s内不得有漏气现象。
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（三）移液器的检测
1．气密性检测 ①目视法检测：将吸取液体后的移液器垂直静置15 秒，观察是否有液滴缓慢的流出。若有流出，说 明有漏气现象；
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反向移液法
一般用于转移高粘液体、生物活性液体、 易起泡液体或极微量的液体。 吸取液体时先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮 至原点。将按钮按至第一停点排出液体，保持按钮 位于第一停点，取下有残留液体的吸液嘴，弃之。
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（四）移液器的放置
使用完毕，可以将其竖直挂在移液器架上。 当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放 置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。
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二、常用移液器的工作原理
目前临床常用的移液器主要有空气垫移液器、 活塞正移动移液器、多通道移液器和电子移液 器。
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1．空气垫移液器
空气垫移液器主要用于固定或可调体积液体的加 样，加样体积的范围在1μl至l0ml之间。
空气垫的作用是将吸至塑料吸头内的液体与移液 器内的活塞分隔开，空气垫随着移液器活塞的弹 簧伸缩而移动，进而带动吸头中的液体。
根据移液量是否可调又可分为定量移液器和可调 式移液器。
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一、移液器的工作原理
移液器的基本工作原理是依据胡克定律。 在一定限度内弹簧伸展的长度与弹力成正比，也 就是移液器的吸液体积与移液器内的弹簧伸展的 长度成正比。移液器内活塞通过弹簧的伸缩运动 来实现吸液和放液。在活塞推动下，排出部分空 气，利用大气压吸入液体，再由活塞推动空气排 出液体。
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（三）移液方法
移液前，保证移液器、枪头和液体处于相同温度。 吸液前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴。 吸液时，保持竖直，枪头插入液面下2～3毫米。
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前进移液法
用大拇指将按钮按下至第一停点，( 枪头插入液面 下) ，然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至 第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停 点吹出残余的液体，最后松开按钮 。
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（一）计量性能要求
移液器在标准温度20℃ 时，其容量允许误差和 测量重复性应符合《中 华人民共和国国家计量 检定规程——移液器》 的要求.
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（二）通用技术要求
外观 要求
①标有产品名称、生产商、标称容量等基本信息 ②移液器外壳塑料表面应平整、光滑， 按钮上下移动应灵活、分档界限明显，在正确使 用情况下不得有卡住现象。
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前
言
良好的分析技术对于临床检验是极为重要的，在 各种临床检验分析技术中，首先要熟练掌握的就 是准确的移液技术，它是检验技术人员的基本功 ，是保证检验结果准确的前提和条件。
目前，移液器替代了过去的玻璃刻度吸管，作为 一种方便有效的精密计量器材已广泛应用于各类 实验室。
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第一节 常用移液器的工作原理
有机溶剂
放射性溶 液
核酸/蛋白 质溶液
（1）蛋白质：拆开移液器，用去污剂清 洗，清洗和干燥方法如上所述。 为了避免污染，应该使用带有滤 （2）核酸：在氨基乙酸／盐酸缓冲液 芯的吸嘴。或者使用正向置换方 （pH2）中煮沸10分钟（确保琼脂糖凝胶 法 电泳检测不到DNA残留），用双蒸水清洗 干净，并用如上所述的干燥方法将其干燥。 同时给活塞涂抹少量润滑油 返回目录
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（四）移液器的专业校准
移液器的工作量大，长期使用，将会使弹簧弹力发 生变形，加之使用塑料材料，不耐磨擦，容易产生 误差。 新购进的移液器必须进行校准才能使用。 正在使用的移液器，由于长期使用会造成其设定体 积与吸取体积的误差。 目前，由于实验室自身条件的限制，一般实验室进 行的常规检测并不能完全取代专业的校准工作。
空气垫移液器最大的不足之处就是容易受温度、 气压和空气湿度的影响，导致加样的准确度降低 。
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活塞 套筒
死体积
吸嘴（一次性）
液体
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2．活塞正移动移液器
该类移液器可以在空气垫移液器难以应用的情况 下使用。 如移取具有高蒸汽压、高黏稠度以及密度大于 2.0g/cm3的液体。 活塞正移动移液器的吸头与空气垫移 液器吸头不同，其内含一个可与移液 器活塞耦合的活塞，这种吸头不能使 用普通的吸头或不同厂家的吸头。
②压力泵检测：使用专用的压力泵，检测压力情况 ，判断是否漏气。
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（三）移液器的检测
移液器漏气的处理 可能原因 吸头不匹配 装配吸头时没上紧 移液器内部气密性不好 处理办法 使用原装匹配的吸头
注意装配吸头的方法（参考 说明书）
请厂商工程师处理
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（三）移液器的检测
2．准确性检测 ①量程小于1μl：建议使用分光光度法检测。 ②量程大于1μl：用称重法检测。通过对水的称重， 转换成体积来鉴别移液器的准确性。
移液器（locomotive pipette）又名微量加样器或移 液枪，是连续可调、计量和转移液体的专用器材。
目前移液器的吸液 范围从小于1μl至 10ml之间。
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第一节 常用移液器的工作原理
根据其移液的物理学原理可分为使用空气垫(又称 活塞冲程)加样的移液器和使用无空气垫的活塞正 移动加样的移液器。