实验二 体验制备细胞膜的方法

实验二体验制备细胞膜的方法
一、实验目的要求
1、体验用哺乳动物红细胞制备细胞膜的方法和过程
2、熟悉并掌握显微镜的使用
二、实验原理
1、动物细胞没有细胞壁，不但省去了去除细胞壁的麻烦，而且没有细胞壁的支持和保护，细胞易吸水涨破。

2、哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和具有有膜的细胞器，可以避免细胞膜与其它膜结构混在一起。

3、红细胞放入清水中，细胞吸水膨胀直至胀破，细胞内的物质流出，从而得到细胞膜。

三、实验材料及用具
1、实验材料：新鲜的鸡血（自己的血）
2、实验试剂：肝素或柠檬酸钠，生理盐水，蒸馏水或清水
3、实验用具：离心机，离心管，滴管，吸水纸，载玻片，盖玻片，显微镜
四、教师实验准备
准备一定量的新鲜鸡血，在冰箱中静置一昼夜。

用滴管将上清液吸去，再吸取1ml的沉淀物，放入离心管中，加入生理盐水2ml，在2000r/min条件下离心五分钟。

去除上清液，在沉淀物中加入生理盐水2ml，再离心一次，去除上清液，留沉淀物备用。

五、学生实验步骤
1、取一个小烧杯，加入生理盐水1-2ml。

2、用滴管吸取沉淀下层的一小滴血细胞，滴入小烧杯的生理盐水中。

3、制片：用另一个滴管吸取少量红细胞稀释液，滴一小滴到载玻片上，盖上盖玻片，制成临时装片。

4、观察：先在低倍镜下找到红细胞，再转换成高倍镜，直至清晰地看到正常状态下的红细胞形态。

5、滴水：往载物台上盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水，同时在另一侧用吸水纸小心吸引，边吸引边观察红细胞的形态变化。

当红细胞体积逐渐变大，变得非常膨胀，在视野中可以找到少量涨破的红细胞，它们已失去完整的边缘。

六、实验结果
看到近水的部分红细胞发生变化：凹陷消失，细胞体积增大，很快细胞破裂，内容物流处。

（一）鸡的血细胞（正常情况）
（二）鸡的血细胞（吸水涨破）
（三）人的血细胞
七、注意事项
1、制作临时装片时，红细胞必须得稀释，而且取红细胞的量要少
2、在高倍镜下观察，待观察物清晰时，在盖玻片的一侧滴加蒸馏水，同时在另一侧用吸水纸吸引。

上述操作均在载物台上进行，并随时调整镜筒高度，持续观察细胞的变化。

在盖玻片的一侧滴加蒸馏水的量要少，不能让盖玻片处于漂浮状态；同时在另一侧用吸水纸吸引要小心，不要将血细胞吸走。

3、操作时要认真观察才能看到连续的变化过程。