嗜热芽孢杆菌

从淀粉厂的酸性土壤中筛选得到一株生产酸性α-淀粉酶的野生菌,YX-1。此菌株具

有较高的产酶能力,初步鉴定为Bacillus stearothermophilus。

1材料与方法

1.1菌种

YX-1从淀粉厂酸性土壤中分离得到。

1.2培养基

1.2.1筛选培养基(%)

(NH4)2SO40. 25, KH2PO40. 3, CaCl2·6H2O

0.025,可溶性淀粉1,胰蛋白胨0.5, pH3.0~4.5。

用于酸性α-淀粉酶生产菌株的筛选和培养。

1.2.2种子培养基(%)

酵母膏0.5,蛋白胨1,NaCl 1,可溶性淀粉1,

pH4.0。

1.2.3发酵培养基(%)

(NH4)2SO40.25, MgSO4·7H2O 0.02, KH2PO4

0.3, FeSO4·7H2O 0.0025, CaCl2·6H2O 0.025,可溶

性淀粉1,胰蛋白胨0.5, pH4.0。

1.3酸性α-淀粉酶生产菌株的筛选

在淀粉原料的加工地附近,酸性环境中采样,样

品经过无菌水处理,稀释成不同稀释度的样品溶液。

将菌液涂布于筛选培养基平板(不同pH梯度,3.0

~4.5)进行培养。有菌体生长后,在平板上喷洒稀

碘液,将菌落周围有透明圈的菌株挑选出来,进一步

纯化分离。

将挑选的菌种分别接种发酵培养基进行发酵产

酶及产酶量的测定,从中挑选出高产酸性α-淀粉酶

的菌株。(筛选流程如图1所示)

酸性α-淀粉酶生产菌株的筛选流程

YX-1细胞形态(左)与芽孢形态(右)的电子显微照片

由于芽孢杆菌YX-1的

发酵产酶量高,生长迅速,生产安全,便于以后的生

产和基因工程改造选育高产菌株,因此选用YX-1

作为发酵产酶菌株。YX-1菌株经初步鉴定为嗜热

脂肪芽孢杆菌。