保健食品中脱氢表雄甾酮的测定

保健食品中脱氢表雄甾酮（DHEA）的测定
1 范围
本方法规定了保健食品中脱氢表雄甾酮（DHEA）含量的测定方法。

本方法适用于添加在片剂、胶囊等试样类型中功效成分脱氢表雄甾酮（DHEA）含量的测定。

本方法的最低检出量6.00mg/kg。

本方法的最佳线性范围：0.0400～10.0mg/mL。

2 原理
将粉碎的胶囊和片剂试样使用流动相进行提取和稀释，根据高压液相色谱紫外检测器定性定量检测。

3 试剂
3.1 甲醇优级纯。

3.2 脱氢表雄甾酮（DHEA）标准溶液准确称量脱氢表雄甾酮（DHEA）标准品（Sigma公司，纯度99%）0.0100g，加入检测用流动相并定容至10mL。

此溶液每mL含1mg脱氢表雄甾酮（DHEA）。

4 仪器设备
4.1 高效液相色谱仪：附紫外检测器（UV）。

4.2 超声波清洗器。

4.3 离心机。

5 分析步骤
5.1 试样处理：取20粒以上片剂或胶囊试样进行粉碎混匀，准确称取试样（精确至0.001g）于容量瓶中，加入流动相定容至10.0mL, 使浓度大约为每mL中含脱氢表雄甾酮（DHEA）1mg。

超声提取5min后以3000rpm/min离心3min。

准确取2.0mL试样溶液于试管中，加入流动相定容至5.0mL，摇匀。

经0.45mm 滤膜过滤后，备用。

5.2 液相色谱参考条件
5.2.1 色谱柱: C18柱 4.6×250mm。

5.2.2 柱温：室温。

5.2.3 紫外检测器：检测波长215nm。

5.2.4 流动相：甲醇：水＝80：20。

5.2.5 流速：0.6mL/min。

5.2.6 进样量：10mL。

5.2.7色谱分析：取10μL标准溶液及试样溶液注入色谱仪中，以保留时间定性，以试样峰高或峰面积与标准比较定量。

5.2.7 色谱图
在上述色谱条件下，脱氢表雄甾酮（DHEA）的保留时间为7.40。

5.3 标准曲线制备分别配制浓度为0.0、0.0400、0.200、1.00、5.00、10.0mg/mL脱氢表雄甾酮（DHEA）
标准溶液,在给定的仪器条件下进行液相色谱分析,以峰高对浓度作标准曲线。

5.4 分析结果表示
5.4.1计算
h1× C ×V ×5
X = ─────────
h2×m×2
式中：X－试样中脱氢表雄甾酮（DHEA）的含量，mg/g；
h1－试样峰高或峰面积；
C －标准溶液浓度，mg/mL；
V－试样定容体积，mL；
h2－标准溶液峰高或峰面积；
m－试样质量，g。

5.4.2 结果表示保留三位有效数字。

6 技术参数
准确度方法的回收率在91.5%～96.0%之间
允许差平行样相对误差≤±5%。