鸡骨草与毛鸡骨草及其种子的急性毒性实验

鸡骨草与毛鸡骨草及其种子的急性毒性实验
鸡骨草与毛鸡骨草及其种子的急性毒性实验

作者:李爱媛,周芳,陈坤凤,莫海彦

【摘要】目的观察鸡骨草(jgc)、毛鸡骨草(mjgc)及其种子的急性毒性。方法采用最大耐受量试验(mtd)与扩展(上下)试验方法测定(ld50)。结果①以jgc,mjgc给予小鼠灌胃(ig),两者mtd分别为400,364 g/kg。②以jgc,mjgc荚果给予小鼠ig,mtd分别为416,360 g /kg。③以jgc,mjgc种子给予小鼠ig,两者mtd测定结果均为224 g/kg。

④以jgc,mjgc种子生品给予小鼠ig,两者的ld50分别为(10.01±2.90)和(6.77±2.46)g/kg。结论①jgc,mjgc的mtd分别大于400,364 g/kg体重。②jgc,mjgc荚果的mtd分别大于416,360 g/kg体重。③jgc,mjgc种子mtd均大于224 g/kg体重。④jgc、mjgc的种子(生品)的ld50分别为(10.01±2.90)g/kg和(6.77±2.46)g/kg。jgc,mjgc果实经水煎后毒性均明显降低。

【关键词】鸡骨草;毛鸡骨草;急性毒性

鸡骨草为华南地区常用草药。主要来源于豆科植物鸡骨草abrus cantoniensis hance和毛鸡骨草a.mollis hance,具有清热解毒,舒肝止痛之功效,主要用于黄疸,胁肋不舒,治疗急、慢性肝炎[1]。药理研究表明jgc和mjgc对ccl4肝损伤和bcg与lps诱导的小鼠免疫性肝损伤均保护作用[2]。有关文献记载两者的荚果(果实)有大毒,《中国药典》《广西中药材标准》《中药志》等仍规定要把荚果除去[3]。由于缺乏鸡骨草、毛鸡骨草及荚果毒性的实验研究,为验证本文对jgc,mjgc及其果实进行毒性研究,为jgc和mjgc的临床应用提供科学依据。

1 材料与仪器

1.1 药物来源及药物的制备[4]jgc,mjgc购于南宁药材站,经广西中医学院药用植物刘寿养副教授品种鉴定,jgc为abrus cantoniensis hance; mjgc为abrus mollis hance。jgc,mjgc种子由广西玉林制药有限责任公司提供。

1.1.1 jgc,mjgc(去荚果)水煎剂的制备

取jgc,mjgc各500 g,加10倍水浸泡30 min,按常规方法煎煮3次,40 min/次,滤液合并浓缩至jgc 500%,mjgc 455%,冰箱保存备用。

1.1.2 jgc,mjgc荚果水煎剂的制备

取jgc,mjgc荚果各250 g,加8倍水浸泡30 min,按常规方法煎煮3次,40 min/次,滤液合并jgc荚果浓缩至520%,mjgc荚果浓缩至400%,冰箱保存备用。

1.1.3 jgc,mjgc种子水煎剂的制备

取jgc、mjgc种子各200 g,捣碎,用4层纱布包,加10倍水浸泡30 min,按常规方法煎煮3次,40 min/次,滤液合并浓缩至280%。冰箱保存备用。

1.1.4 jgc,mjgc种子混悬液(生品)的制备取jgc,mjgc种子各100 g,加蒸馏水200 ml置冰箱中浸泡24 h,再加适量蒸馏水用家用搅拌机反复搅拌成糊状,jgc种子加蒸馏水配成7.04%;mjgc种子加蒸馏水配成11%。备用。

1.2 动物

昆明种小鼠,普通级(cv),合格证号:桂医动字11004号,由广西中医学院实验动物中心提供。

1.3 条件

实验室室温为(25±2)℃(空调)。

1.4 仪器

电子天平,美国双杰兄弟(集团)有限公司,常熟双杰测试仪器厂生产,型号规格:t200,d=0.1 g。

2 方法与结果

2.1 jgc,mjgc水煎剂最大耐受量(mtd)的测定[5]

取健康昆明种小鼠60只,随机分成3组,20只/组(♀♂各10只),体重(20±2)g,禁食12h后,一组给予等容积的蒸馏水作为正常对照。另两组以jgc(500%)和mjgc(455%)给药容量40 ml/kg体重,ig给药,间隔6 h/次,一共2次。jgc,mjgc给药量每天分别为400,364 g生药/kg体重。按人用量50~100 g/d,即jgc相当于人用量的240~480倍;mjgj 相当于人用量的218.4~436.8倍。

2.2 jgc,mjgc荚果水煎剂最大耐受量(mtd)的测定[5,6]

取昆明种小鼠60只,随机分成3组,20只/组(♀♂各10只),体重(20±2)g,禁食12 h后,一组给予等容积的蒸馏水作为正常对照。另两组以jgc荚果(520%)、mjgc荚果(400%)给药容量为40 ml/kg,ig给药,间隔6 h 1次,一共2次。给药量每天分别为416,360 g 生药/kg体重。

色胺酮对小鼠急性和亚急性毒性实验

2012年11月第9卷第32期 ·论著· CHINA MEDICAL HERALD 中国医药导报色胺酮(TRYP )为吲哚喹啉类生物碱,其化学名称为吲哚[2,1-b]喹唑啉-6,12-二酮(6,12-dihydro-6,12-dioxoindo lo-[2,1-b]-quinazoline ),主要存在于马蓝(Strobilanthes cusia )、蓼蓝(Polygonum tinetorium Lour )、菘蓝(Isatis tinctoria L.)等产蓝植物中,现也可通过微生物发酵或人工合成得到[1]。近年来药理研究表明其具有抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗疟和杀虫作用,特别是可以通过多种途径对肿瘤细胞增殖具有抑制作用[1-9]。经文献报道和本课题组研究发现,色胺酮对K562白血病细胞有突出的抑制和诱导凋亡的作用[2-3]。为了评价其成药的安全性,为进一步制剂的剂量设计提供参考,笔者对其极性毒性进行了研究,现将结果报道如下:1仪器与试药 ABX MICROS 60三分类细胞计数仪(西京医院儿科);COBAS INTEGRA 400Plus 全自动生化分析仪;分析天平(德国赛多利斯)。 色胺酮(TRPY )粉末由西北大学生命科学院提供,经HPLC 法检测其含量高于95%,其他试剂均为分析纯,临用前配制成混悬液用以灌胃。 昆明种小鼠,雄性,体重(20±2)g ,使用许可证号:SCXK (军)字第2007-007号。2方法与结果2.1急性毒性实验 取适应性饲养3d 后的小鼠10只,禁食不禁水12h ,每组于 1d 内按50mg/kg 剂量灌胃给药3次,每8小时给药1次。给药 后仔细观察小鼠的外观、行为、活动、精神、食欲、皮毛、呼吸和鼻、眼、口及大小便等。结果连续观察3d ,体重略有减轻,但未见死亡,其他未见异常,无法测出半数致死量(LD 50)。对小鼠进行大体解剖,发现胃肠道有明显的黄色粉末状物体,推测是未被完全吸收的色胺酮粉末,其他未见明显异常。2.2亚急性毒性实验 2.2.1日常行为观察取小鼠40只,随即分为对照组和高、中、低三个剂量组。根据药代动力学研究[10]定其剂量分别为:高剂量组80mg/kg 、中剂量组50mg/kg 、低剂量组25mg/kg ,对照组给同体积生理盐水,连续给药30d 。每日观察动物的精神、活动、毛色状态、记录摄食量及体重变化。见表1、2。结果表明各剂量组体重和进食量与对照组比较差异均无统计学意义(P >0.05)。 2.2.2血常规检查末次给药后2h 眼球取血,进行血常规和生化指标测定,即红细胞(RBC )、白细胞(WBC )计数、血红蛋白(HGB )、平均血红蛋白(MCH )等。见表3。 2.2.3脏器系数检测末次给药2h 后摘眼球取血,取血后解剖大鼠,观察各组织脏器均无明显异常,摘取心、肝、脾、肺、肾和脑等组织,用生理盐水清洗,滤纸吸干多余水分后称重,按以下公式计算脏器系数,脏器系数(‰)=脏器重量(g )体重(g )×100‰, 结果见表4。用SPLM 3.0版软件进行统计学检验和方差分析显示,其结果差异无统计学意义(P >0.05)。3讨论 白血病是严重危害人类生命健康的造血系统恶性肿瘤。当前,白血病的临床治疗仍采用传统的大剂量联合化疗,但此 色胺酮对小鼠急性和亚急性毒性实验研究 李捷缪珊王四旺王剑波谢艳华 第四军医大学天然药物学教研室,陕西西安 710032 [摘要]目的观察色胺酮灌胃后小鼠产生的急性毒性反应,以评价色胺酮原料药的安全性。方法将色胺酮设定3个剂量组,灌胃给药,小鼠未出现死亡,故以高、中、低三个给药剂量进行亚急性毒性研究。连续喂养观察体态行为,30d 后摘眼球取血作血常规检测。结果试验小鼠的行为未出现异常,无小鼠死亡。各组小鼠的体重及其增重、进食量、食物利用率与对照组比较差异均无统计学意义(均P >0.05);各计量组血常规指标与对照组比较,差异无统计学意义(P >0.05)。结论色胺酮具有较好的安全性。[关键词]色胺酮;安全性;急性毒性试验;小鼠[中图分类号]R282.71[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2012)11(b )-0013-02 Acute and sub-acute toxicity test of TRYP in mice LI Jie MIAO Shan WANG Siwang WANG Jianbo XIE Yanhua Department of Nature Medicine,the Fourth Military Medical University,Shaanxi Province,Xi ′an 710032,China [Abstract]Objective To evaluate the safety of TRYP by observing the acute toxic reaction of mice after oral administra -tion.Methods The mice were oral administrated with TRPY at three different dosages.No death of mice was found.So three doses of the high,middle and low for subacute toxicity study were given.After feeding for 30days,the blood hema -tology was detected.Results Dreg-treated mice had no behavior anomaly and death in the observation period.The differ -ence of body weight,weight increased,food in-take and utilization ratio in each group was not significant (P >0.05).The hematology in each dose group had no significant difference compared with control group (P >0.05),either .Conclusion TRYP is relatively safe. [Key words]TRYP;Safety;Acute toxicity;Mice [基金项目]国家“重大新药创制”科技重大专项(项目编号:2011ZX09401-308)。 [作者简介]李捷(1983-),女,硕士研究生,助教;研究方向:中药药理学。[通讯作者]王四旺(1958-),男,教授,博士生导师;研究方向:中药新药开发。 13

工业废水的鱼类急性毒性效应研究

工业废水的鱼类急性毒性效应研究 李丽君1,刘振乾*1,徐国栋2,舒阳1,曹玉珍2,齐卫华 2 (1暨南大学水生生物研究所,广州 510632;2广州市环境监测中心站,广州 510030) 【摘要】利用斑马鱼对某市六家有代表性的企业所排放的处理前和处理后的工业废水进行了急性毒性试验,以对斑马鱼的半致死浓度为评价指标,得到了六种工业废水毒性强度的初步排序,并结合理化指标分析了斑马鱼的致死原因。 实验表明,六家企业处理前工业废水的毒性大小顺序为:电子类>食品类>电镀类>电池类>玻璃类>橡胶类,96hLC50分别为:0.98%、4.73%、11.35%、13.60%、47.60% , 其中橡胶类毒性最小,100%的工业废水对斑马鱼无致死效应。处理后的工业废水毒性基本消除,但部分行业的工业废水处理后仍存在毒性。 关键词:工业废水;斑马鱼;急性毒性 中图分类号:X 503.225 文献标识码:A 文章编号:1008-8873(2006)01-043-05 Study on acute-toxicity of six kind industrial wastewaters to zebrafish LI Li-jun1, LIU Zhen-qian*1, XU Guo-dong2,SHU Yang1, CAO Yu-zhen2,QI Wei-hua2(1.Institute of Hydrobiology, Jinan University, Guangzhou 510632, China;2.Guangzhou Environmental Monitoring Centre,Guangzhou 510030,China) Abstract In this paper, acute-toxicity test using zebrafish was applied to monitoring the wastewater form six industries. Based on 96h LC50 values, the toxicity sequence of the six industrial effluents was in order of electron effluent> grocery effluents> electroplate effluent >battery effulent >glass effluent > rubber effluent. The six 96hLC50 are as follows: 0.98%、4.73%、11.35%、 13.60%、47.60%.The toxicity of the rubber effluent was the least, the 100% industrial wastewater can not be deadly to Brachydanio rerio fish. The toxicity was eliminated after management, but the toxicity of some industries were not eliminated. Key word: Industrial wastewater; Zebrafish (Brachydanio , rerio); Acute-toxicity 随着近代工业的发展,工业废水对水生生态系统及人类安全的影响日益严重,已引起世界各国的普遍关注,为了有效地控制水环境污染和保护水资源,近几十年来,世界各国都广泛地开展了工业废水及其组分的毒性评价和生物监测工作。目前我国工业废水排放的监督和管理主要以理化监测为主,这虽然能快速地定量测定某些废水中的污染物含量,但对于组分复杂的工业废水来说,就难以用理化分析方法阐明其组分和对环境的影响,而且是在没有考虑时间因素和环境因素对毒性的影响,没有考虑各毒性物质之间可能相互作用的情况下进行的,而实际情况比较复杂,理化分析并不能反映出废水的综合毒性强度。因此通过水生生物毒性试验[1、2]来反映废水的综合毒性,以此说明水质的污染状况将是一行之有效的方法。 目前被用来监测工业废水的生物主要有:鱼[3~9]、藻类[10]、大型溞类[11]、发光细菌[13,14]、虾[12]等,本研究选择国际标准化组织(ISO)推荐的五大试验鱼种之一——斑马鱼为试验生物,对某市六家有代表性的企业处理前和处理后的工业废水进行急性毒性试验,并把毒性测试结合理化测试进行比较分析,综合评价了污染源的污染程度,确定了工业废水的安全排放浓度。这对加强生物监测与评价手段,强化工业污染源的科学管理有着重要的意义。 1 材料与方法 1.1 试验材料 1.1.1 试验生物试验所用鱼种为斑马鱼(Brachydanio rerio),又名蓝条鱼、花条鱼,真骨鱼总目,鲤科。原产地:印度和孟加拉国。购于当地鸟鱼虫市场,平均体长 2.56 cm,平均体重为0.29 g。在连续曝气的循环水中驯养14 d以上,驯养期间无一尾鱼死亡。 1.1.2 试验器材化学惰性材料制成的水族箱(规格一致,体积适宜),采用高27 cm、直径20 cm的5000 mL 的圆形玻璃烧杯,同一试验采用相同规格和质量的容器。实验容器使用前彻底洗净。 pH计(HI-8424)等。 1.2 试验条件 试验用水为曝气24 h的驯养循环水;光照每天12 h 生态科学 2006年2月第25卷第1期 ECOLOGIC SCIENCE Feb., 2006, 25(1):43~47

小鼠的急性毒性试验

五种农药对小鼠的急性毒性试验 绪论 随着现代农业的飞速发展,农药的应用越来越广泛,在农林作物的病虫防治中,农药一直发挥着巨大作用,尤其是本世纪60-70年代,人们大量使用农药,几乎使粮食产量增长一倍,但随着农药长期的、大量的、不合理的使用,导致了对环境的严重污染并对人体健康产生极大的影响。它们对动、植物和人类的危害越来越严重。一方面它们可以直接进入生物体内引起急性、慢性中毒和畸变,同时还通过径流、排污、挥发等途径进入土壤、大气和水体,引起各种生态环境下生物的死亡,并通过食物链的富集影响人类的食品安全。目前,因农药使用与管理失控而引发的一系列水域环境污染以及食品安全等问题,已引起政府相关部门和业内学者的广泛重视。当前,随着有机氯农药的禁用,菊酯类和有机磷类等成为我国目前使用较广泛的农药。 《中华人民共和国农药管理条例》指明,农药是指用于预防、消灭或者控制危害农业、林业的病、虫、草和其他有害生物以及有目的地调节植物、昆虫生长的化学合成物或者几种物质混合物及其制剂。农药残留是指农药使用后残存于环境、生物体和食品中的农药及其衍生物和杂质的总称。动植物在生长期间、食品在加工和流通中均可受到农药的污染,导致食品中农药残留。 相关报道表明,农药利用率一般为10%,约90%的残留在环境中,过多地使用农药,大量未被利用的农药经过降雨、农田渗滤和水田排水等进入水体,同时,还有大量散失的农药挥发到空气中,最后汇入水域,沉降积淀在土壤中,通过农作物吸收和食物链进入人体进行累积,并对人体健康造成危害。目前中国一些食品,如茶叶、大米、肉、蛋等食品中农药残留量常超过规定标准,过多的残留量对人体健康会造成危害。为此,论述农药残留对人体健康的危害效应及其毒理机制和防治措施,以期对防治食品中农药残留对人体健康的危害提供理论依据。 在哺乳类实验动物中,由于小鼠个体小,饲养管理方便,生产繁殖快,质量控制严格,价廉可以大量供应,又有大量的具有各种不同特点的近交品系,突变品系,封闭群及杂交一代动物,小鼠实验研究资料丰富参考对比性强;更重要一点乃是全世界科研工作者均用国际公认的品系和标准的条件进行试验,其实验结果的科学性、可靠性、重复性高,自然会得到国际认可。 本文以百草枯、甲氰菊酯、乐果、草甘膦和敌敌畏五种常用农药为实验材料, 检测了它们对

小鼠的急性毒性试验之欧阳家百创编

五种农药对小鼠的急性毒性试验 欧阳家百(2021.03.07) 绪论 随着现代农业的飞速发展,农药的应用越来越广泛,在农林作物 的病虫防治中,农药一直发挥着巨大作用,尤其是本世纪60-70年代,人们大量使用农药,几乎使粮食产量增长一倍,但随着农药长期 的、大量的、不合理的使用,导致了对环境的严重污染并对人体健康产生极大的影响。它们对动、植物和人类的危害越来越严重。 一方面它们可以直接进入生物体内引起急性、慢性中毒和畸变, 同时还通过径流、排污、挥发等途径进入土壤、大气和水体,引 起各种生态环境下生物的死亡,并通过食物链的富集影响人类的 食品安全。目前,因农药使用与管理失控而引发的一系列水域环 境污染以及食品安全等问题,已引起政府相关部门和业内学者的 广泛重视。当前,随着有机氯农药的禁用,菊酯类和有机磷类等 成为我国目前使用较广泛的农药。 《中华人民共和国农药管理条例》指明,农药是指用于预防、消 灭或者控制危害农业、林业的病、虫、草和其他有害生物以及有 目的地调节植物、昆虫生长的化学合成物或者几种物质混合物及 其制剂。农药残留是指农药使用后残存于环境、生物体和食品中 的农药及其衍生物和杂质的总称。动植物在生长期间、食品在加 工和流通中均可受到农药的污染,导致食品中农药残留。

相关报道表明,农药利用率一般为10%,约90%的残留在环境中,过多地使用农药,大量未被利用的农药经过降雨、农田渗滤和水田排水等进入水体,同时,还有大量散失的农药挥发到空气中,最后汇入水域,沉降积淀在土壤中,通过农作物吸收和食物链进入人体进行累积,并对人体健康造成危害。目前中国一些食品,如茶叶、大米、肉、蛋等食品中农药残留量常超过规定标准,过多的残留量对人体健康会造成危害。为此,论述农药残留对人体健康的危害效应及其毒理机制和防治措施,以期对防治食品中农药残留对人体健康的危害提供理论依据。 在哺乳类实验动物中,由于小鼠个体小,饲养管理方便,生产繁殖快,质量控制严格,价廉可以大量供应,又有大量的具有各种不同特点的近交品系,突变品系,封闭群及杂交一代动物,小鼠实验研究资料丰富参考对比性强;更重要一点乃是全世界科研工作者均用国际公认的品系和标准的条件进行试验,其实验结果的科学性、可靠性、重复性高,自然会得到国际认可。 本文以百草枯、甲氰菊酯、乐果、草甘膦和敌敌畏五种常用农药为实验材料, 检测了它们对小鼠的单一和联合急性毒性效应,来评价各种农药的的毒性强弱以及对环境的危害。 1 材料与方法 1.1动物 SPF 级昆明小鼠,雌雄各半,体重18~22 g,通过腹腔注射药物给药,给药后密切观察小鼠的反应,观察4小时。给药前禁食不禁水十二小时。

小鼠经口染毒急性毒性评价

亚硝酸盐的急性毒性评价 摘要:此次试验主要是研究亚硝酸钠的急性毒性评价,通过对健康小鼠的选择,有毒性资料可查得亚硝酸钠的急性经口染毒LD50值,依据霍恩氏法LD50计算的设计原则按照随机数分组的方法将动物分成4个染毒组,每组4只小白鼠。一次灌胃给予受试物后,观察动物所产生的急性毒性反应及其严重程度,分析中毒死亡的原因,必要时进行解剖,观察受试物毒性反应与剂量的关系,采用霍恩氏法求出亚硝酸钠的半数致死剂量(LD50),并根据LD50值将亚硝酸钠进行急性毒性分级,从而外推到人,推测亚硝酸钠的毒性对人的影响。 关键词:小鼠、亚硝酸钠、急性毒性、LD50、霍恩氏法 1.前言 亚硝酸钠(NaNO2),是亚硝酸根离子与钠离子化和生成的无机盐。亚硝酸钠易潮解, 亚硝酸钠有咸味,又是被用来制造假食盐。亚硝酸钠暴露于空气中会与氧气反应生成硝酸钠。若加热到320℃以上则分解,生成氧气、氧化氮和氧化纳。接触有机物易燃烧爆炸。由于其具有咸味且价钱便宜,常在非法食品制作时用作食盐的不合理替代品,因为亚硝酸钠有毒,含有工业盐的食品对人体危害很大,有致癌性。亚硝酸钠是国家规定允许添加的食品添加剂。肉类制品加工中用作发色剂,可用于肉类罐头、肉类制品。在肉制品中对抑制微生物的增殖有一定作用(对肉毒梭状芽孢杆菌有特殊抑制作用),能提高腌肉的风味,而且亚硝酸钠还可作杀菌剂,抑制肉制品中微生物的生长。 亚硝酸钠虽然应用于多方面的工业用途途中,但在食品方面,中国食品添加剂使用卫生标准规定: 食品级亚硝酸钠用作食品添加剂时,最大使用量为0.15g/kg,残留量:肉类罐头≤0.05g/kg,肉制品≤0.03g/kg,因为如果人体摄入过多的亚硝酸钠就会导致机体致癌和后代畸变,过多的使用对人体的危害非常巨大。因此,对亚硝酸钠的急性毒性评价的研究就非常有必要。 2.材料与方法 2.1材料 实验动物:选取健康成年小鼠(30g左右),试验前要对动物饲养观察2~3天,以适应饲养环境,并淘汰不健康或体重不符合要求的动物。 2.2仪器与试剂 2.2.1器材:

小鼠急毒实验标准操作LD50 SOP

标准操作规程(Standard Operating Procedure) 小鼠LD50毒性试验 编号: 制定日期: 起草人: 审核人:

BALB/c 小鼠LD50毒性试验 1.实验目的 衡量化合物的毒性,寻找安全剂量范围,为进一步体内活性评价提供数据支持。 2.实验原理 经口一次性给予或24 h 内多次给予受试物后,在短时间内观察动物所产生的毒性反应,包括致死的和非致死的指标参数,致死剂量通常用半数致死剂量LD50来表示。 3.实验内容 (1) 探测化合物的LD50剂量范围。 (2) 确定组数并计算各组剂量。 (3)正式实验:给不同组的小鼠灌胃不同剂量的药物,并观察记录各组别小鼠的行为变化及死亡情况。 (4)记录实验结果,并计算LD50。 4.实验材料 试剂:化合物,生理盐水。 材料:电子天平,注射器,灌胃针。 实验动物:动物品系:BALB/c小鼠;性别:雌性;级别:SPF级;年龄:7周龄,实验周期内的动物年龄约为8-10周龄;体重,20±2g,实验前禁食12h。 5.实验方法与步骤 1.预实验:取小鼠20只,以3只为一组,分成5组。单次口服固定剂量方法(Fixed-dose procedure)。选取一组剂量,进行化合物溶液灌胃给药。 给药前禁食不禁水12小时,观察出现的症状并记录死亡数,找出引起0%及100%死亡率剂量的所在范围。

2.正式试验:在预试验所获得的0%和100%致死量的范围内,选用几个剂量(一般用5个剂量,按等比级数增减,相邻剂量之间比例为1:0.7或1:0.8)和生理盐水溶媒对照组,各组动物数为10只,分别用marker笔标记。 动物的体重和性别随机分配,完成动物分组和剂量计算后灌胃给药最好先从中剂量组开始,以便能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适,否则可随时进行调整,尽可能使动物的死亡率在50%上下,死亡率为0%或100%时,不能用于计算。 6.观察与记录 首日给药后4小时内每小时密切观察小鼠活动状态和死亡情况,每天对各组小鼠进行称重,统计死亡数量。连续观察1-2周。 7.LD50的计算 1.改良寇氏法计算[2]

实验二 经口急性毒性试验

毒理学实验二经口急性毒性试验 一、实验目得 1、掌握实验动物分组方法 2、测定LD50得试验设计原则 3、小鼠得经口灌胃技术 二、试剂与材料 1、实验动物: (1)动物品种:健康成年ICR小鼠,体重18g~22g (2)样品来源:首都医科大学实验动物部 2、器材:注射器(1ml)、灌胃针头、烧杯、吸管、容量瓶、烧杯、棉签、动物秤。 3、试剂:敌敌畏(1400mg/ml)、苦味酸染液(标记用)。 三、实验内容 1、健康实验动物得选择与性别鉴定 选择健康得雄性小鼠(健康标准:毛顺、毛顺、无分泌物、反应敏锐。动物出现圆圈动作可能为中耳炎,废弃。) 肛门与生殖孔距离:大者为雄性,小者为雌性 2、实验动物称重、编号与随机分组 选择体重在18-22 g得小鼠,采用随机分组得方法(动物按体重分为几个体重段,再从每个体重段分出各组动物),每组10只小鼠,用黄色得苦味酸饱与液标号1 ~9,10号小鼠不标记、 3、受试化学物溶液得配制 (1)确定灌胃量:0、1ml/10g (2)确定最高给药量,计算溶液浓度,估计给药总体积 (3)药品称量及稀释 4、小鼠灌胃技术 左手固定,右手持灌胃器,插入动物口腔,沿咽后壁徐徐插入食道,深度为口腔至剑突得距离。 5、毒性体征得观察与LD50计算 (1)毒性体征得观察: 染毒后注意观察小鼠中毒得发生、发展过程及死亡数与死亡时间 按表格记录动物体征及出现时间,记录死亡情况及时间,观察期为30 min (2)LD50得计算: a、实验各组剂量得确定:设5组,每组雌雄动物各10只。 剂量组距 d 为: d为相邻两个剂量组剂量对数之差 利用lgLD0依次加d,取反对数,即可得出各组剂量。 b、LD50得计算(见附件):

动物急性毒性试验-小鼠

动物急性毒性试验(Acute toxicity test,Single dose toxicity test),研究动物一次或24小时内多次给予受试物后,一定时间内所产生的毒性反应.拟用于人体的药物通常需要进行动物急性毒性试验[1].急性毒性试验处在药物毒理研究的早期阶段,对阐明药物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要意义.急性毒性试验所获得的信息对长期毒性试验剂量的设计和某些药物Ⅰ期临床试验起始剂量的选择具有重要参考价值,并能提供一些与人类药物过量急性中毒相关的信息 [实验目的] 通过实验,培养学生科研设计能力,提高学生科研思维素质;学习药物急性 毒性实验的测定方法(统计方法)及观察方法。 1、计算敌百虫半数致死量。 [实验材料] 小白鼠(雌雄均可,18-22 g)、鼠笼、1ml注射器、苦味酸溶液、敌百虫等。(计算机仿真实验) [实验方法] 1. 预试验:取小鼠24只,以4只为一组分成6组,选择组间距较大的一系列剂量,各组分别灌胃给药敌百虫,观察出现的症状并记录死亡数,找出引起0%死亡率和100%死亡率剂量的所在范围。 2. 正式试验:在预试验所获得的0%和100%致死量的范围内,选用5个剂量,相邻剂量之间的比例为1:0.7。将小鼠随机分组,每组10只小白鼠灌胃给药敌百虫。 3. 观察纪录给各种反应:潜伏期,中毒现象,开始出现死亡的时间,死前的现象,各组死亡的只数等。通常药后要观察3-7天。根据各组动物的死亡率,用改良寇氏法(Korbor)或简化机率单位法算出LD50和可信限。 [实验结果] 在给药后1 小时内,随药物剂量的增加,小鼠中毒的潜伏期逐渐缩短,中毒症状随药物剂量的增加和作用时间的延长而逐渐加重(口吐泡沫→大小便失禁→肌肉僵直→兴奋→死亡)。给药后3 小时内各组小鼠死亡情况见下表:

(完整版)急性毒性试验

试验目的:急性毒性试验是在24小时内给药1次或2次(间隔6-8小时),观察动物接受过量的受试药物所产生的急性中毒反应,为多次反复给药的毒性试验设计剂量、分析毒性作用的主要靶器官、分析人体过量时可能出现的毒性反应、I期临床的剂量选择和观察指标的设计提供参考信息等。 一、啮齿类动物单次给药的毒性试验 (一)试验条件 1.动物品系:常用健康的小鼠、大鼠。选用其他动物应说明原因。年龄一般为7-9周龄。同批试验中,小鼠或大鼠的初始体重不应超过或低于所用动物平均体重的20%.实验前至少驯养观察1周,记录动物的行为活动、饮食、体重及精神状况。 2.饲养管理:动物饲料应符合动物的营养标准。若用自己配制的饲料,应提供配方及营养成分含量的检测报告;若是购买的饲料,应注明生产单位。应写明动物饲养室内环境因素的控制情况。 3.受试药物:应注明受试药物的名称、批号、来源、纯度、保存条件及配制方法。 (二)试验方法: 由于受试药物的化学结构、活性成分的含量、药理、毒理学特点各异,毒性也不同,有的很难观察到毒性反应,实验者可根据受试药物的特点,由下列几种实验方法中选择一种进行急性毒性试验。 1.伴随测定半数致死量(LD50)的急性毒性试验方法。 2.最大耐受剂量(MTD)试验方法:最大耐受剂量,是引起动物出现明显的中毒反应而不产生死亡的剂量。 3.最大受试药物量试验方法:在合理的浓度及合理的容量条件下,用最大的剂量给予实验动物,观察动物的反应。 4.单次口服固定剂量方法(Fixed-dose procedure)。选择5、50、500和2000mg/kg四个固定剂量。 实验动物首选大鼠,给药前禁食6-12小时,给受试药物后再禁食3-4小时。如无资料证明雄性动物对受药试物更敏感,首先用雌性动物进行预试。根据受试药物的有关资料,由上述四个剂量中选择一个作初始剂量,若无有关资料作参考,可用500mg/kg作初始剂量进行预试,如无毒性反应,则用2000mg/kg 进行预试,此剂量如无死亡发生即可结束预试。如初始剂量出现严重的毒性反应,那就用下一个挡次的剂量进行预试,如该动物存活,就在此两个固定剂量之间选择一个中间剂量试验。每个剂量给一只动物,预试一般不超过5只动物。每个剂量试验之间至少应间隔24小时。给受试药物后的观察期至少7天,如动物的毒性反应到第7天仍然存在,尚应继续再观察7天。 在上述预试的基础上进行正式试验。每个剂量最少用10只动物,雌雄各半。根据预试的结果,由前面所述的四种剂量中选择出可能产生明显毒性但又不引起死亡的剂量;如预试结果表明,50mg/kg引起死亡,则降低一个剂量档次试验。

鱼的急性毒性试验

鱼的急性毒性试验 一、实验目的和要求: 通过本试验,熟悉和掌握鱼类急性毒性试验的设计、条件、操作步骤,以及试验结果的计算、分析和报告等全过程。 二、实验原理: 鱼类对水环境的变化反应十分灵敏,当水体中的污染物达到一定程度时,就会引起一系列中毒反应,例如行为异常、生理功能紊乱、组织细胞病变直至死亡。在规定的条件下,使鱼接触含不同浓度受试物的水溶液,实验至少进行24h,最好以96h为一个实验周期,在24h、48h、72h、96h时记录实验鱼的死亡率,确定鱼类死亡50%时的受试物浓度。鱼类毒性试验在研究水污染及水环境质量中占重要地位。通过鱼类急性毒性试验可以评价受试物仅用于测定化学物质毒性强度、测定水体污染程度、检查废水处理的有效成都,也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供环境依据。 三、实验材料: 1.实验鱼的选择和驯养 12×6 小锦鲤鱼体长7-12cm 体宽3-5cm 体重 7-12g 不同浓度的苯酚(mg/L)0、24、48、96、192、384 2、实验仪器设备 (1)实验容器 实验容器一般用玻璃或其他化学惰性材质制成的水槽。容器体积可以根据试验鱼的体重确定,通常以每升水中鱼的负荷不得超过2g(最好为1g)。一些小型鱼类幼鱼可选择500ml 或1000ml烧杯为实验容器。容器的深度必须超过16cm,水体表面积越大越好。同一实验应采用相同规格和质量的容器。为防止鱼类跳出容器,可在容器上加上网罩。实验容器使用后,必须彻底洗净,以除去所有毒性残留物。 (2)其他 吸光光度计 3、实验用水:曝气水 四、操作步骤: 1、设置5个浓度组,1个空白对照组,选择不同浓度的苯酚(mg/L)0、24、48、96、 192、384。每个浓度放入12条小锦鲤鱼。采用直接投毒方式,将配制的苯酚溶液直接倒入水槽中,搅拌均匀。分别分为1、2、3、4、5、6组。染毒后观察其活动状况,并

实验二 经口急性毒性试验

毒理学实验二经口急性毒性试验 1、实验目的 1、掌握实验动物分组方法 2、测定LD50的试验设计原则 3、小鼠的经口灌胃技术 二、试剂和材料 1、实验动物: (1)动物品种:健康成年ICR小鼠,体重18g~22g (2)样品来源:首都医科大学实验动物部 2、器材:注射器(1ml)、灌胃针头、烧杯、吸管、容量瓶、烧杯、棉签、动物秤。 3、试剂:敌敌畏(1400mg/ml)、苦味酸染液(标记用)。 3、实验内容 1、健康实验动物的选择和性别鉴定 选择健康的雄性小鼠(健康标准:毛顺、毛顺、无分泌物、反应敏锐。动物出现圆圈动作可能为中耳炎,废弃。) 肛门与生殖孔距离:大者为雄性,小者为雌性 2、实验动物称重、编号和随机分组 选择体重在18-22 g的小鼠,采用随机分组的方法(动物按体重分为几个体重段,再从每个体重段分出各组动物),每组10只小鼠,用黄色的苦味酸饱和液标号1~9,10号小鼠不标记。 3、受试化学物溶液的配制 (1)确定灌胃量:0.1ml/10g (2)确定最高给药量,计算溶液浓度,估计给药总体积 (3)药品称量及稀释 4、小鼠灌胃技术 左手固定,右手持灌胃器,插入动物口腔,沿咽后壁徐徐插入食道,深度为口腔至剑突的距离。 5、毒性体征的观察和LD50计算 (1)毒性体征的观察:

染毒后注意观察小鼠中毒的发生、发展过程及死亡数和死亡时间 按表格记录动物体征及出现时间,记录死亡情况及时间,观察期为30 min (2) LD50的计算: a、实验各组剂量的确定:设5组,每组雌雄动物各10只。 剂量组距 d 为: d为相邻两个剂量组剂量对数之差 利用lgLD0依次加d,取反对数,即可得出各组剂量。 b、LD50的计算(见附件): C、求半数致死量的95%可信区间 4、实验过程 1、人员分工:本次实习同学分两个大组(A组和B组),分别在不同实验室。每大组分5个小组,分别处理雌雄动物,每小组10只动物。 集体活动:1、 2、 3、 4、5 组各1人,进行受试物配制。 各小组活动: 每小组1人(共4人),进行动物标记。(1-10号) 每小组1人(共4人),进行体重记录。(1-10号) 每小组1人(共4人),进行灌胃。(1-10号) 每小组1人(共4人),根据体重吸取受试物(0.1ml/10g)

鱼类的急性毒性实验

鱼类的急性毒性实验 鱼类急性毒性试验,是水生生态毒理学的重要内容之一,并广泛应用于水域环境污染监测工作中,对控制工业废水的排放、保护水域环境、发展渔业生产,制定渔业水质标准,具有重要意义。 一、实验原理 鱼类对水环境的变化反应十分灵敏,当水体中的污染物达到一定程度时,就会引起一系列中毒反应,例如行为异常、生理功能紊乱、组织细胞病变、直至死亡。在规定的条件下,使鱼接触含不同浓度受试物的水溶液,实验至少进行24h,最好以96h为一个实验周期,在24h、48h、72h、96h时记录实验鱼的死亡率,确定鱼类死亡50%时的受试物浓度。鱼类毒性试验在研究水污染及水环境质量中占重要地位。通过鱼类急性毒性试验可以评价受试物对水生生物可能产生的影响,以短期暴露效应表明受试物的毒害性。鱼类急性毒性试验不仅用于测定化学物质毒性强度、测定水体污染程度、检查废水处理的有效程度,也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供环境依据。 二、实验材料 1、试验用鱼的选择与驯养 试验用的鱼必须对毒物敏感,应具有代表性,便于在实验条件下饲养,来源丰富,个体健康。我国可采用的试验鱼有四大养殖淡水鱼(青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼)、金鱼、鲫鱼等。 在同一实验中要求试验鱼必须同属、同种、同龄,最好是当年生。鱼的平均体长以7cm 以下为宜。金鱼体短、身宽,一般以3cm以下较为合适。同组鱼中最大的体长不应超过最小的体长的1.5倍。 选用的试验鱼在试验前必须在实验室内经过驯养,使之适应实验室条件的生活环境和进行健康选择。驯养鱼应该与试验相同水质水温的水体中至少驯养7天,使其适应试验环境,不应长期养殖(<2个月)。驯养期间,应每天换水,可每天喂食1~2次,但在试验前一天应停止喂食,以免试验时,剩余饵料及粪便影响水质。驯养期间试验鱼死亡率不得超过5%,否则,可以认为这批鱼不符合试验鱼的要求,应该继续驯养或者重新更换试验鱼进行驯养。 试验前必须挑选健康的鱼,即选择行动活泼、体色光泽、鱼鳍舒展完整、逆水性强、大小无太大悬殊、无任何疾病的鱼作为试验鱼。任何畸形鱼、外观上反常态的鱼都不得作试验鱼。 2、实验仪器设备 (1)实验容器 实验容器一般用玻璃或其他化学惰性材质制成的水族箱或水槽。容器体积可根据试验鱼的体重确定,通常以每升水中鱼的负荷不得超过2g(最好为1g),或者其盛水量以每条鱼2~3L为宜。一些小型鱼类幼鱼可选择500mL或1000mL烧杯为实验容器。容器的深度必须超过16cm,水体表面积越大越好。同一实验应采用相同规格和质量的容器。为防止鱼类跳出容器,可在容器上加上网罩。实验容器使用后,必须彻底洗净,以除去所有毒性残留物。 (2)其他 溶解氧测定仪、水硬度计、温度控制仪、pH计、分析天平。 3、实验用水(稀释水)及水质条件 用来驯养和配制实验液的水,必须是未受污染的清洁水。一般可采用天然河水、湖水或

实验二 鱼类急性毒性实验

实验二鱼类急性毒性实验 一、实验目的 (1)掌握鱼类急性毒性实验的原理和操作 (2)掌握半致死浓度的计算方法 二、实验原理 鱼类对水环境的变化十分灵敏,运用毒理实验方法,观察鱼类在含有化学污染物的水环境中的反应,可以比较不同化学物质的毒性高低。鱼类毒性实验方法可分为静态方法和动态方法两大类。静态实验方法操作简单,不需要特殊设备,适宜于受试化学物在水中相对稳定,在实验过程中耗氧量较低的短期实验。动态实验方法要求具备一定的设备,对于在水中不稳定、耗氧量较高的化学物需要进行较长时间的实验观察时,可采用动态实验方法。本实验介绍静态实验方法。三、实验器材 玻璃缸或搪瓷桶、重金属盐、金鱼 四、实验步骤 (1)预备实验:预备实验的方法,可参考有关资料初步估计3~4个浓度,每个浓度用3~4尾鱼,观察24~48h。进行预备实验的目的是确定实验浓度的范围(找出引起实验鱼全部死亡和不引起实验鱼死亡的浓度);观察鱼中毒的表现和出现中毒的时间,为正式实验选择观察指标提供依据。同时还要做一些化学测定,以了解实验液的稳定性、pH值、溶解氧的变化情况,以便在正式实验时采取措施。 (2)正式实验: 1、根据在预备实验中得到的浓度范围,其间距按等比级数插入3~5个中间浓度 实验中至少选择5个不同浓度,一般以7个浓度较常用,但所选择的浓度应包括有使实验鱼在24h内死亡的浓度,以及96h内不发生中毒的浓度。表中第1纵行包括的浓度最常用。 实验中无论采用何种分组方法,都必须同时设对照组。 配制实验液时应先配制少量高浓度的储备液,实验时临时稀释所需浓度的实验液。先把药液与水均匀混合后,再放入实验鱼,禁止先放入实验鱼后往实验缸中加受试药液,以免实验鱼接触到不均匀的高浓度的药液而提前死亡。

什么是急性毒性试验

什么是急性毒性试验 急性毒性试验,其实就是一种毒性研究,当然对我们来讲对这种常识问题,很多人都不会去注重,因为毕竟不是作为学术研究的人,但是对这些常识有一些基本的常识了解,其实对我们的生活,也可以带来一定的帮助功效,下面就为大家具体介绍一下,什么是急性毒性试验。 急性毒性试验是指一次或24小时每多次染毒的试验,是毒性研究的第一步。要求采用啮齿类或非啮齿类两种动物。通常为小鼠或大鼠采用经口、吸入或经皮染毒途径。急性毒性试验主要测定半数致死量(浓度),观察急性中毒表现,经皮肤吸收能力以及对皮肤、粘膜和眼有无局部刺激作用等,以提供受试物质的急性毒性资料,确定毒作用方式、中毒反应,并为亚急性和慢性毒性试验的观察指标及剂量分组提供参考。试验概述及染毒方法 概念和实验目的 急性毒性是指机体(人或实验动物)一次(或24小时内多次)接触外来化合物之后所引起的中毒效应,甚至引起死亡。

但须指出化合物使实验动物发生中毒效应的快慢和剧烈的 程度,可因所接触的化合物的质与量不同而异。有的化合物在实验动物接触致死剂量的几分钟之内,就可发生中毒症状,甚至死亡。而有的化合物则在几天后才显现中毒症状和死亡,即迟发死亡。此外,实验动物接触化合物的方式或途径不同,“一次”的 含义也有所不同。凡经口接触和各种方式的注射接触,“一次” 是指在瞬间将受试化合物输入实验动物的体内。而经呼吸道吸入与经皮肤接触,“一次”是指在一个特定的期间内实验动物持续 地接触受试化合物的过程,所以“一次”含有时间因素。 以上就是关于急性毒性试验的内容介绍,希望通过这些介绍,每个人对这些常识,都有一定的认识和了解,虽然说很多时候在生活当中,我们运用不到,但是毕竟对这种常识有一定的了解,对自己身体的保护,也是比较有利的。

实验二-经口急性毒性试验

毒理学实验二经口急性毒性试验 一、实验目的 1、掌握实验动物分组方法 2、测定LD50的试验设计原则 3、小鼠的经口灌胃技术 二、试剂和材料 1、实验动物: (1)动物品种:健康成年ICR小鼠,体重18g~22g (2)样品来源:首都医科大学实验动物部 2、器材:注射器(1ml)、灌胃针头、烧杯、吸管、容量瓶、烧杯、棉签、动物秤。 3、试剂:敌敌畏(1400mg/ml)、苦味酸染液(标记用)。 三、实验内容 1、健康实验动物的选择和性别鉴定 选择健康的雄性小鼠(健康标准:毛顺、毛顺、无分泌物、反应敏锐。动物出现圆圈动作可能为中耳炎,废弃。) 肛门与生殖孔距离:大者为雄性,小者为雌性 2、实验动物称重、编号和随机分组 选择体重在18-22 g的小鼠,采用随机分组的方法(动物按体重分为几个体重段,再从每个体重段分出各组动物),每组10只小鼠,用黄色的苦味酸饱和液标号1~9,10号小鼠不标记。 3、受试化学物溶液的配制 (1)确定灌胃量:0.1ml/10g (2)确定最高给药量,计算溶液浓度,估计给药总体积 (3)药品称量及稀释 4、小鼠灌胃技术 左手固定,右手持灌胃器,插入动物口腔,沿咽后壁徐徐插入食道,深度为口腔至剑突的距离。 5、毒性体征的观察和LD50计算 (1)毒性体征的观察: 染毒后注意观察小鼠中毒的发生、发展过程及死亡数和死亡时间 按表格记录动物体征及出现时间,记录死亡情况及时间,观察期为30 min

组数 :各组死亡率:数相邻两组对数剂量之差:最大剂量的对数 P d :X )P P (d 21X lg 150i i k i i k LD ∑++-=)lg 96.1(lg lg 95%:1)P 1(P d lg 50501-50LD S LD ni ni LD S i i ±--=∑可信区间:实验动物数。标准误公式: (2)LD50的计算: a 、实验各组剂量的确定:设5组,每组雌雄动物各10只。 剂量组距 d 为: d 为相邻两个剂量组剂量对数之差 利用lgLD0依次加d ,取反对数,即可得出各组剂量。 b 、LD50的计算(见附件): C 、求半数致死量的95%可信区间 四、实验过程 1、人员分工:本次实习同学分两个大组(A 组和B 组),分别在不同实验室。每大组分5个小组,分别处理雌雄动物,每小组10只动物。 集体活动:1、 2、 3、 4、5 组各1人,进行受试物配制。 1 lg lg d 0100--=组数LD LD

小鼠急性毒性实验及文献资料讲解学习

小鼠急性毒性实验及 文献资料

苏贝止咳颗粒小鼠急性毒性实验 【摘要】 苏贝止咳颗粒组方来自民间验方,该方在临床使用多年,疗效确切,安全可靠。具有散寒宣肺,祛痰、止咳、平喘之功,用于急性气管、支气管炎(风寒袭肺证)所致的咳嗽、咳痰稀薄、咽痒、气急等症状。根据该方的功能主治、各味药材的理化性质和验方汤剂的临床应用实践,我们对其进行了止咳、祛痰、抗炎、解热、抗病毒、抗菌等主要药效学实验和急性毒性实验研究。 苏贝止咳颗粒经国家食品药品监督管理总局药品审评中心技术审评,发补充资料通知(药审补字[2014]第1030号),其中药理毒理方面要求为:本品进行的急毒试验未提供剖检结果,建议补充。如果没有观察该方面的内容,建议补充规范的急性毒性试验。针对该问题,该项目研究在前期的申报材料中的确没有详述相关内容,因此按照中心老师的发文内容和相关规定对该品种的急性毒性实验重新进行规范性实验,对实验所有动物进行大体解剖、并对相关重要脏器进行病理形态学观察。 实验结果显示,苏贝止咳浸膏小鼠口服急性毒性实验测不出LD50,从而进行小鼠ig最大给药量实验,单次最大给药剂量164g生药/kg,单次最大给药容积为0.8mL/20g,24h内给药3次,连续观察13天,所观察的各项指标均正常,未见动物死亡,实验观察期结束时对所有动物大体解剖和相关重要脏器进行病理形态学观察,未见与药物相关性病变。 因此苏贝止咳浸膏小鼠一日口服最大给药剂量为492g生药/kg,相当于临床拟用量的424.1倍。表明苏贝止咳浸膏急性毒性较低,提示苏贝止咳浸膏在临床上急性用药具有一定的安全性。 【实验目的】观察苏贝止咳浸膏的小鼠急性毒性。 【供试品】 1.名称:苏贝止咳浸膏(本实验采用苏贝止咳颗粒为浸膏,实验代号:SB-补1),含量规格及配置:4.1g生药/每毫升浸膏,人用临床拟用剂量81g生药 /d。采用小鼠灌胃给药,以最大给药剂量164g生药/kg,最大给药容积为

金鱼毒性试验

环境毒理学实验报告 指导老师:XXXX 姓名:XXXX 班级:XXXX 学号:XXXX

实验一金鱼毒性试验 一、实验目的: 通过本实验,熟悉和掌握鱼类急性毒性试验的设计、条件、操作步骤,以及试验结果的计算、分析和报告等全过程。 二、实验原理: 鱼类对水环境的变化反应十分灵敏,当水体中的污染物达到一定程度时,就会引起一系列中毒反应,例如行为异常、生理功能紊乱、组织细胞病变、直至死亡。在规定的条件下,使鱼接触含不同浓度受试物的水溶液,实验至少进行24h,最好以96 h为一个实验周期,在24h、48h、72h、96h时记录实验鱼的死亡率,确定鱼类死亡50%时的受试物浓度。鱼类毒性试验在研究水污染及水环境质量中占重要地位。通过鱼类急性毒性试验可以评价受试物对水生生物可能产生的影响,以短期暴露效应表明受试物的毒害性。鱼类急性毒性试验不仅用于测定化学物质毒性强度、测定水体污染程度、检查废水处理的有效程度,也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供环境依据。 三、实验材料: 1、实验鱼:小型金鱼幼苗100尾 2、实验试剂:CdCl溶液 四、实验步骤:

1.饲养管理 本实验采用2000mL大烧杯对受试鱼进行饲养。水源为进过曝气后的自来水,PH值6.2-6.7,溶解氧6-10mg/L。水温12摄氏度。空气压缩机24小时增氧,实验期间受试鱼不喂食。 2.急性实验 按照急性毒性实验方法,在包括使鱼全部死亡的最低浓度和96 h 鱼类全部存活的最好浓度之间设置4个浓度组,分别是1mg/L、4mg/L、12mg/L、16mg/L。 每个试验浓度组设2个平行,每一系列设一个空白对照。试验溶液调节至相应温度后,从驯养鱼群中随即取出鱼并随机迅速放入各试验容器中,每个容器投放受试鱼10尾。同一试验,所有试验用鱼应30min内分组完毕。 在24h、48h、72h、96h后检查受试鱼的状况。观察并记录死鱼数目后,将死鱼从容器中取出。应在试验开始后3h观察各处理组鱼的状况,并记录试验鱼的异常行为(如鱼体侧翻、失去平衡,游泳能力和呼吸能力减弱,色素沉积等)。 以暴露浓度为横坐标,死亡率为纵坐标,在计算机或对数概率纸上,绘制暴露浓度对死亡率的曲线。用直线内插法或常用统计程序计算出24h、48h、72h、96h的半致死浓度(LC50)值,并计算95%的置信限。 2.化学物质急性毒性分级 依据LC50值的大小,可以将化学物质的急性毒性分为剧毒、高

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